Biomarcadores predictivos de la evolución de la neoplasia intraepitelial cervical de grado 2 (CIN2)

Introducción La infección persistente por el virus del papiloma humano de alto riesgo (VPHar) es una fuente causal de cáncer de cuello uterino [1]. La neoplasia intraepitelial cervical CIN1 (baja), CIN2 (moderada), CIN3 (grave) define las lesiones precancerosas cervicales evolucionadas a partir de la línea celular del epitelio escamoso [3]. Las lesiones CIN1 y CIN2 se asocian con tasas de progresión más bajas para el cáncer de cuello uterino que las CIN3 [4]. CIN2 plantea un desafío importante clínicamente, debido a la expresión heterogénea de lesiones en evolución similares a CIN1 y CIN3, que las herramientas de diagnóstico actuales no permiten estratificar en riesgo de progresión [5]. La estratificación del riesgo de CIN2 es muy importante para el manejo clínico de CIN2 y para evitar el riesgo de tratamiento excesivo o insuficiente. Históricamente, CIN2 ha sido el umbral para el manejo quirúrgico (biopsia por escisión de cono). Sin embargo, dado que las tasas de regresión de las lesiones CIN2 son altas y la biopsia por escisión de cono se asocia con daños reproductivos, como el parto prematuro, muchos países, como Dinamarca, han adoptado un enfoque más conservador en el tratamiento de mujeres jóvenes con CIN2 (es decir, vigilancia activa: colposcopía, biopsias cervicales en sacabocados cada 4-6 meses hasta dos años de seguimiento sin ningún procedimiento quirúrgico) [6,7]. En la Región Central de Dinamarca, se recomienda la vigilancia activa para mujeres jóvenes desde 1995.

La proteína p16 juega un papel importante como inhibidor en la regulación y diferenciación celular. p16 es un marcador sustituto común para la actividad oncogénica de hrHPV E6/E7 y la transformación celular asociada con la evolución del cáncer. El nivel de expresión intrapeitelial de p16 se asocia positivamente con el grado de lesión CIN y puede detectarse mediante el biomarcador inmunohistoquímico p16INK4a [7, 8]. Aunque el biomarcador p16INK4a tiene un valor agregado para el diagnóstico y la clasificación de las lesiones precancerosas de cuello uterino, el biomarcador no es sólido para la estratificación del riesgo de CIN2 [9].

Estudios recientes muestran que el nuevo biomarcador HPV E4 puede distinguir potencialmente CIN2 en lesiones similares a CIN1 frente a CIN3. Sugiriendo que HPV E4 podría ser un biomarcador potencial para la estratificación de riesgo de CIN2 [10-12].

Sin embargo, falta conocimiento sobre HPV E4 como predictor de evolución de CIN2.

Objetivo Explorar si el biomarcador HPV E4 puede predecir el riesgo de evolución de CIN2.

Materiales y métodos Diseño del estudio: Estudio de cohorte histórica. Población de estudio: N = 500 mujeres de 23 a 40 años de edad, con un registro de CIN2 en el Danish Patological Data Bank [2000-2010], en el Departamento de Patología del Hospital Universitario de Aarhus. Todas las mujeres se definen como manejadas por vigilancia activa (es decir, colposcopia y biopsias cervicales con sacabocados cada 4 a 6 meses hasta dos años de seguimiento).

Selección: Las mujeres elegibles con un registro de diagnóstico incidental de CIN2 se identificarán en el Danish Pathology Databank entre todas las mujeres con un registro de diagnóstico de CIN2 durante 2000-2010.

Análisis de laboratorio: Las muestras de tejido fijadas en formalina e incluidas en parafina (FFPE) se recopilarán de los archivos del Departamento de Patología del Hospital Universitario de Aarhus.

Los bloques FFPE se seccionarán para análisis morfológicos (hematoxilina y eosina (H&E) y para análisis inmunohistoquímicos (IHC). Aplicaremos la técnica del sándwich para el análisis IHC de p16INK4a y HPV E4, utilizando el CINtec® Histology Kit (Roche) y el ensayo SILgrade E4 (LBP). Posteriormente, los portaobjetos teñidos serán evaluados por un panel de expertos en patología ginecológica (2 de Dinamarca, 1 del Reino Unido y 1 de los EE. UU., respectivamente).

La exposición se definirá como la expresión de una reacción intraepitelial VPH E4 positiva (similar a CIN1) frente a VPH E4 negativa (similar a CIN3).

Análisis estadístico: Modelo de regresión lineal, medida del efecto; riesgo relativo (RR) (IC 95%).

Cálculos de potencia: Con un tamaño de muestra de N=500 mujeres, se espera una potencia estadística del 89 %, con un nivel de significancia de 0,05 (alfa). Entre las mujeres que progresan o persisten durante la vigilancia, se espera una prevalencia del 50 % de lesiones CIN2 VPH E4 positivas y del 70 % de lesiones CIN2 positivas para p16INK4a.

Entornos y colaboradores El proyecto se llevará a cabo en el Departamento de Ginecología y Obstetricia del Hospital Gødstrup en estrecha colaboración con el Departamento de Patología del Hospital Universitario de Aarhus, incluido el Laboratorio de Diagnóstico DDL; Universidad de Virginia; Universidad de Cambridge y Facultad de Medicina de la Universidad de Maryland.

Principal grupo de investigación en Dinamarca

1. Profesor asociado, MD, Anne Hammer Lauridsen, Departamento de Ginecología y Obstetricia, Hospital Gødstrup, Región Central de Dinamarca y Departamento de Medicina Clínica, Universidad de Aarhus
2. Profesor, MD, Lone Kjeld Pedersen, Departamento de Ginecología y Obstetricia, Hospital Universitario de Odense y OPEN, Universidad del Sur de Dinamarca.
3. Profesor, MD, Torben Steiniche, Profesor, Departamento de Patología, Hospital Universitario de Aarhus y Departamento de Medicina Clínica, Universidad de Aarhus.
4. Estudiante de doctorado, Msch Health Science, Rikke Damgaard, Departamento de Ginecología y Obstetricia, Hospital Gødstrup, Región Central de Dinamarca y Departamento de Medicina Clínica, Universidad de Aarhus.

Declaración ética El estudio está aprobado por el Comité Regional de Ética de la Investigación en Salud, Región Central de Dinamarca y registrado en el Departamento Legal, Facultad de Salud, Universidad de Aarhus, según lo exige la ley danesa.

Perspectivas Los biomarcadores fiables para la estratificación del riesgo de las lesiones CIN2 son importantes para el asesoramiento clínico de las mujeres, lo que permitirá una estrategia de seguimiento más específica y personalizada para evitar el riesgo de tratamiento excesivo o insuficiente. A medida que otros países avanzan hacia un enfoque más conservador (vigilancia activa) con respecto al manejo de mujeres jóvenes con NIC2, nuestros resultados también pueden ser valiosos desde una perspectiva internacional.