A 2. fokozatú méhnyak intraepiteliális neoplázia (CIN2) kialakulását előrejelző biomarkerek

Bevezetés A magas kockázatú humán papillomavírus (hrHPV) tartós fertőzése a méhnyakrák egyik fő forrása [1]. A cervicalis intraepitehelialis neoplázia CIN1 (alacsony), CIN2 (közepes), CIN3 (súlyos) a laphám sejtvonalból kifejlődött cervicalis precancer elváltozásokat határozza meg [3]. A CIN1 és CIN2 léziók a méhnyakrák alacsonyabb progressziójával járnak együtt, mint a CIN3 [4]. A CIN2 klinikailag komoly kihívást jelent, mind a CIN1-szerű, mind a CIN3-szerű evolúciós léziók heterogén expressziója miatt, amelyet a jelenlegi diagnosztikai eszközök nem tesznek lehetővé a progresszió kockázata szerinti rétegzéshez [5]. A CIN2 kockázati rétegezése rendkívül fontos a CIN2 klinikai kezelése és a túl- vagy alulkezelés kockázatának elkerülése érdekében. Történelmileg a CIN2 volt a sebészeti kezelés (kúpos kivágási biopszia) küszöbe. Mivel azonban a CIN2 léziók regressziós aránya magas, és a kúpos kimetszéssel végzett bioppia reproduktív károsodással, például koraszüléssel jár, sok országban, például Dániában, konzervatívabb megközelítést alkalmaztak a CIN2-vel rendelkező fiatal nők kezelésében (pl. aktív felügyelet: kolposzkópia, cervicalis punch biopszia 4-6 havonta, akár két éven keresztül sebészeti beavatkozás nélküli követés) [6,7]. Dánia középső régiójában 1995 óta javasolják az aktív megfigyelést a fiatal nők számára.

A p16 fehérje fontos szerepet játszik a sejtek szabályozásában és differenciálódásában, mint inhibitor. A p16 a hrHPV E6/E7 onkogén aktivitásának és a rák kialakulásával összefüggő sejttranszformációnak gyakori helyettesítő markere. A p16 intrapeitheliális expressziós szintje pozitívan kapcsolódik a CIN lézió súlyosságához, és a p16INK4a immunhisztokémiai biomarkerrel kimutatható [7, 8]. Bár a p16INK4a biomarker hozzáadott értéket képvisel a méhnyak prekancerolézióinak diagnosztikájában és osztályozásában, a biomarker nem megbízható a CIN2 kockázati rétegzésére [9].

A legújabb tanulmányok azt mutatják, hogy az új HPV E4 biomarker potenciálisan megkülönböztetheti a CIN2-t a CIN1-szerű és a CIN3-szerű elváltozásokban. Feltételezések szerint a HPV E4 potenciális biomarker lehet a CIN2 kockázati rétegzésére [10-12].

Azonban hiányoznak az ismeretek a HPV E4-ről, mint a CIN2 fejlődésének előrejelzőjéről.

Cél Annak feltárása, hogy a HPV E4 biomarker képes-e előre jelezni a CIN2 kialakulásának kockázatát.

Anyagok és módszerek Tanulmánytervezés: Történeti kohorsz vizsgálat. Vizsgálati populáció: N = 500 23-40 éves nő, a Dán Patológiai Adatbankban [2000-2010] CIN2 rekorddal, az Aarhusi Egyetemi Kórház Patológiai Osztályán. Minden nőt aktív megfigyeléssel kezelnek (pl. kolposzkópia és cervicalis punch biopszia 4-6 havonta, legfeljebb kétéves követés).

Kiválasztás: A 2000 és 2010 között CIN2 diagnózissal rendelkező összes nő közül a Dán Patológiai Adatbankban azonosítják azokat a jogosult nőket, akiknél véletlenül CIN2 diagnózist regisztráltak.

Laboratóriumi elemzés: Formalin-fixált paraffinba ágyazott (FFPE) szövetmintákat állítanak össze az archívumból, az Aarhusi Egyetemi Kórház Patológiai Osztályán.

Az FFPE blokkokat morfológiai analízishez (hematoxilin és eozin (H&E) és immunhisztokémiai analízishez (IHC) fogják metszeni. A szendvics technikát alkalmazzuk a p16INK4a és HPV E4 IHC elemzéshez, a CINtec® Histology Kit (Roche) és a SILgrade E4 assay (LBP) használatával. Ezt követően a festett tárgylemezeket a nőgyógyászati ​​patológiával foglalkozó szakértői testület értékeli (2 Dániából, 1 Az Egyesült Királyságból és 1 Az Egyesült Államokból).

Az expozíció a HPV E4 pozitív (CIN1-szerű) vs. a HPV E4-negatív (CIN3-szerű) intraepiteliális reakció kifejezése.

Statisztikai elemzés: Lineáris regressziós modell, hatásmérés; relatív kockázat (RR) (95% CI).

Hatványszámítások: N=500 nő mintaméretnél 89%-os statisztikai erő várható, 0,05 (alfa) szignifikancia szinten. Azoknál a nőknél, akik előrehaladnak vagy tartósak a megfigyelés alatt, 50%-ban a CIN2 HPV E4 pozitív elváltozások és 70%-ban a p16INK4a pozitív CIN2 léziók előfordulása várható.

Beállítások és munkatársak A projektet a Gødstrup Kórház Nőgyógyászati ​​és Szülészeti Osztályán hajtják végre, szoros együttműködésben az Aarhusi Egyetemi Kórház Patológiai Osztályával, beleértve a DDL Diagnosztikai Laboratóriumot is; Virginiai Egyetem; A Cambridge-i Egyetem és a Marylandi Egyetem Orvostudományi Kara.

Fő kutatócsoport Dániában

1. Docens, MD, Anne Hammer Lauridsen, Nőgyógyászati ​​és Szülészeti Osztály, Gødstrup Kórház, Közép-Dánia és Klinikai Orvostudományi Tanszék, Aarhusi Egyetem
2. Professzor, MD, Lone Kjeld Pedersen, Nőgyógyászati ​​és Szülészeti Osztály, Odense Egyetemi Kórház és OPEN, Dél-Dániai Egyetem.
3. Professzor, MD, Torben Steiniche, professzor, Aarhusi Egyetemi Kórház Patológiai Osztálya és Klinikai Orvostudományi Tanszék, Aarhusi Egyetem.
4. Ph.d-hallgató, Msch Health Science, Rikke Damgaard, Nőgyógyászati ​​és Szülészeti Osztály, Gødstrupi Kórház, Dánia Központi Régiója és Klinikai Orvostudományi Tanszék, Aarhusi Egyetem.

Etikai nyilatkozat A tanulmányt a Dánia Közép-Régiójának Egészségügyi Kutatási Etikai Regionális Bizottsága hagyta jóvá, és a dán törvényeknek megfelelően az Aarhusi Egyetem Egészségügyi Karának Jogi Tanszékén regisztrálták.

Perspektívák A CIN2 léziók kockázati rétegzésére megbízható biomarkerek fontosak a nők klinikai tanácsadásában, ez specifikusabb és személyre szabott nyomon követési stratégiát tesz lehetővé a túl- vagy alulkezelés kockázatának elkerülése érdekében. Mivel más országok konzervatívabb megközelítés (aktív felügyelet) felé haladnak a CIN2-vel rendelkező fiatal nők kezelésében, eredményeink nemzetközi szempontból is értékesek lehetnek.