慢性創傷におけるバイオフィルムの臨床的意義

観察的前向き臨床研究は、2021 年から 2024 年までの 3 年間、クロアチアのリエカにあるクリニカル ホスピタル センター リエカの海底および高圧医療部門および皮膚血管科で実施されます。 この研究には、傷の病態（動脈、糖尿病、静脈、褥瘡、複合病因、心的外傷後、切断後、火傷など）に関係なく、慢性創傷のために治療されたすべての患者が含まれ、インフォームドコンセントに署名した18歳以上。 患者は、標準的な方法、すなわち包帯、デブリドマン、抗生物質、および細菌負荷軽減 (対照群) で治療され、別の群はさらに HBOT で治療されます (HBOT 群)。 研究の除外基準は、包含基準の1つを満たさないことです。 HBOTの禁忌、絶対的または相対的、ブレオマイシン化学療法を受けている患者、慢性閉塞性肺疾患、以前の自然気胸、慢性中耳炎または慢性副鼻腔炎、不安定狭心症、重度の心不全、重度の認知症、発作歴、閉所恐怖症、または、HBOT の恩恵を受けない経皮的オキシメトリーでの酸素誘発試験後に、遠位パルスの両方が欠落し、陽性反応がない重大な大血管症。

サンプル サイズは、2 つの独立したグループを 95% の信頼区間で質的変数に従って比較するための利用可能な式に基づいて計算されています。 両方のグループの合計サンプル サイズは 62 人の患者 (合計 124 人の患者) と推定され、平均 10 ～ 15% の患者が研究から脱落すると予想されたため、両方のグループの計算された合計サンプル サイズは 70 人の患者と推定されました (合計140人の患者）。 HBOT グループでは 90% 以上の創傷治癒率が達成されると予想されますが、対照グループの予想される治癒率は、1 年間の追跡調査後に少なくとも 20% 低くなると予想されます。 それに応じて、バイオフィルムの存在の臨床的徴候、感染症の臨床的および実験的徴候の発現に関して、対照群とHBOT群で同じ違いが達成されると予想されます。

患者は、適格性スクリーニング、インフォームドコンセント、患者の履歴および人口統計データの収集（年齢、性別、婚姻状況、子供、教育レベル、職業、雇用）に続いて、併存疾患および危険因子（真性糖尿病）を特に強調して研究に登録されます。 、肥満、高血圧、心血管疾患、末梢動脈疾患) 身体検査、臨床的創傷評価、および以下を含む評価: 創傷数;傷の場所;創傷サイズ (cm 単位の幅、長さ、深さ、および cm2 単位の計算された創傷面と cm3 単位の創傷容積);創傷期間（日）;創傷の種類（動脈、糖尿病、静脈、褥瘡、複合病因、その他）;傷の状態（停滞、悪化、改善、治癒）;創傷感染の臨床的徴候（熱/暖かさ、紅斑、滲出液の増加、化膿性滲出液、痛みの増加、肉芽組織の変色、砕けやすい肉芽組織、浮腫、創傷の悪臭、治癒の遅延、バイオフィルムの疑い）; 創傷バイオフィルムの存在の臨床的徴候（過剰な水分および創傷滲出液、低レベルの紅斑、低レベルの慢性炎症、適切な抗生物質または抗菌薬治療を行っても抗生物質の効果が得られなかった病歴、再発性感染症/増悪のサイクル、治癒の遅延、抗菌薬または抗菌薬治療に対する難治性の創傷); 創傷床状態 (壊死、脱落、肉芽、バイオフィルムの疑い、上皮化と評価された創傷床に存在する組織のおよその割合); 浸出液のレベル (レベル、タイプ); 周囲の皮膚の状態 (健康、浸軟、乾燥/湿疹); 写真記録プロトコルに従って、登録時およびフォローアップごとに。 患者の血管状態を評価し、創傷の根底にある病態生理学と創傷タイプを特定するために、追加の診断手順が実行されます（脈触診、足首上腕圧指数、つま先圧、およびデュプレックスドップラー超音波、磁気共鳴画像法を含む放射線画像法（ MRI) およびコンピューター断層撮影 (CT) イメージング、経皮酸素濃度計)、ならびに臨床検査、微生物学的検査のためのスワブ/生検。 登録時に、定期的な検査室での精査 (C 反応性タンパク質、血算の完了および鑑別、血清インターロイキン 6 およびプロカルシトニン レベル、空腹時血糖、グリコシル化ヘモグロビン、腎臓、および肝臓の検査) および微生物学的検査のための創傷スワブ/生検分析が行われ、臨床的に疑われる感染の徴候のためにフォローアップ期間中に示されているように繰り返されます。

対照群の患者は、登録時に、2、4、6 週間、3 か月、6 か月、9 か月、12 か月の期間後に評価され、HBOT グループでは 10、20、30 回の治療、3 か月、6 か月、 9 か月、12 か月、臨床的な創傷の評価と評価、および創傷治癒率と状態の評価、創傷評価の実施、バイオフィルムの存在および/または感染の兆候の臨床的徴候の記録、検査所見、創傷の特徴、抗生物質の必要性治療と入院を行い、写真記録を行います。

両方のグループの患者は、標準治療（包帯、デブリドマン、抗生物質、および細菌負荷軽減）で日常的に治療されます。 包帯は、一次包帯（アルギン酸塩、ハイドロファイバー包帯、抗菌包帯、ゲル化繊維包帯）、感染した場合は銀、肉芽が形成された創傷の二次保護包帯（ポリウレタンを含むフォーム）など、2日ごとに変化する創傷の特性に従って実行されます。組織。 創傷の進行と特定の治療の必要性は、創傷ケアを専門とする皮膚科医と血管外科医によって毎週評価および記録され、創傷評価（抗生物質、包帯、包帯の交換、デブリドマン、切断）に従って適切な治療が行われます。

HBOT グループでは、標準治療に加えて、HBOT セッションが週 5 日、2.4 atm 絶対圧 (ATA) および 100% O2 のマルチプレイス チャンバーで実行され、90 分間効果的な治療が行われます。 セッションは、高圧医療の訓練を受けた医師によって監督されます。

標準化されたアンケートにより、強度と痛みの特徴、生活の質、うつ病、不安を評価して、慢性創傷とその両方、標準および併用治療の患者関連の結果測定への影響を評価します。 痛みの強度と特徴は、痛みを評価するための自己評価スケールを使用して評価されます：視覚的アナログスケール-VAS（ドレッシングがその場にある間、ドレッシング交換時、デブリードマン中、ドレッシング交換またはデブリードマンの30分後に測定）、およびMcGill Painアンケート入学時、2、4、6 週間、3 か月、6 か月、9 か月、12 か月後。 患者の生活の質と全体的な健康状態を評価するための質問は、登録時に、2、4、6 週間、3 か月、6 か月、9 か月、12 か月の期間後に実行されます。および健康生活の質に関するアンケート (EQ-5D)、およびうつ病と不安を評価するための質問 (ベックうつ病インベントリー、ベック不安インベントリー) は、登録時に、6 週間、3 か月、6 か月、9 か月、12 か月の期間後に実行されます。 .

さらに、スワブ/生検の微生物学的分析は、標準化された日常的な微生物学的、文化的、および自動化された手順を使用して評価され、微生物のプロファイル、違い、および微生物耐性が決定されます。 さらに、バイオフィルムの検出と客観化は、バイオフィルム検出の標準的な方法（組織培養プレート法、コンゴーレッド寒天法、チューブ法）、共焦点走査レーザー顕微鏡法（FilmTracer LIVE/DEAD蛍光アッセイおよびFilmTracer SYPRO Ruby Biofilm Matrixを使用）を使用して評価されます。染色、Invitrogen)、および臨床サンプルでは、​​光学顕微鏡およびさまざまな染色方法および手順 (グラム染色、ギムザ染色、クリスタル バイオレット染色、コンゴ赤染色、過ヨウ素酸シッフ染色、ヘマトキシリンおよびエオシン染色) による。