Klinische Auswirkungen von Biofilm bei chronischen Wunden

Die prospektive klinische Beobachtungsstudie wird in der Abteilung für Unterwasser- und Überdruckmedizin und der Abteilung für Dermatovenerologie, Clinical Hospital Center Rijeka, Rijeka, Kroatien, während des 3-Jahres-Zeitraums von 2021 bis 2024 durchgeführt. Die Studie umfasst alle Patienten, die aufgrund einer chronischen Wunde behandelt werden, unabhängig von der Wundethologie (arteriell, diabetisch, venös, dekubital, kombinierte Ätiologie, posttraumatisch, postamputiert, Verbrennung und andere), die 18 Jahre und älter sind und eine Einverständniserklärung unterzeichnet haben. Die Patienten werden mit Standardmethoden, d. h. Verbänden, Debridement, Antibiotika und bakterieller Entlastung behandelt (Kontrollgruppe) und eine weitere Gruppe wird zusätzlich mit HBOT behandelt (HBOT-Gruppe). Ausschlusskriterium der Studie ist das Nichterfüllen eines der Einschlusskriterien. Die Patienten mit absoluten oder relativen Kontraindikationen für HBOT, Patienten unter Bleomycin-Chemotherapie, mit chronisch obstruktiver Lungenerkrankung, früherem Spontanpneumothorax, chronischer Mittelohrentzündung oder chronischer Sinusitis, instabiler Angina pectoris, schwerer Herzinsuffizienz, schwerer Demenz, Krampfanfällen in der Anamnese, Klaustrophobie, oder signifikante Makroangiopathie mit Fehlen beider distaler Pulse und ohne positive Reaktion nach Sauerstoffprovokationstest bei transkutaner Oximetrie, die von HBOT nicht profitieren.

Die Stichprobengröße wurde basierend auf der verfügbaren Formel zum Vergleich zweier unabhängiger Gruppen nach qualitativen Variablen mit einem Konfidenzintervall von 95 % berechnet. Die Gesamtstichprobengröße in beiden Gruppen wurde auf 62 Patienten (insgesamt 124 Patienten) geschätzt, wobei erwartet wurde, dass durchschnittlich 10-15 % der Patienten die Studie abbrachen, sodass die berechnete Gesamtstichprobengröße in beiden Gruppen auf 70 Patienten geschätzt wurde ( 140 Patienten insgesamt). Es wird erwartet, dass in der HBOT-Gruppe eine Wundheilungsrate von 90 % und höher erreicht wird, während die erwartete Heilungsrate in der Kontrollgruppe nach 1 Jahr Follow-up voraussichtlich mindestens 20 % niedriger sein wird. Dementsprechend werden in der Kontroll- und der HBOT-Gruppe die gleichen Unterschiede erwartet wie in Bezug auf die Manifestationen klinischer Hinweise auf das Vorhandensein von Biofilm, klinische und Laborzeichen von Infektionen.

Die Patienten werden nach Eignungsprüfung, Einverständniserklärung, Erhebung der Anamnese und demografischer Daten (Alter, Geschlecht, Familienstand, Kinder, Bildungsniveau, Beruf, Beschäftigung) in die Studie aufgenommen, wobei besondere Betonung auf Komorbiditäten und Risikofaktoren (Diabetes mellitus) gelegt wird , Adipositas, Bluthochdruck, Herz-Kreislauf-Erkrankungen, periphere arterielle Erkrankungen) körperliche Untersuchung, klinische Wundbeurteilung und -bewertung einschließlich Folgendem: Wundnummer; wundstelle; Wundgröße (Breite, Länge und Tiefe in cm und berechnete Wundfläche in cm2 und Wundvolumen in cm3); Wunddauer (Tage); Art der Wunde (arteriell, diabetisch, venös, dekubital, kombinierte Ätiologie, andere); Wundstatus (stagnierend, sich verschlechternd, verbessernd, geheilt); klinische Anzeichen einer Wundinfektion (Hitze/Wärme, Erythem, vermehrtes Exsudat, eitriges Exsudat, verstärkter Schmerz, verfärbtes Granulationsgewebe, brüchiges Granulationsgewebe, Ödeme, fauliger Wundgeruch, verzögerte Heilung, Verdacht auf Biofilm; klinische Anzeichen für das Vorhandensein eines Wundbiofilms (übermäßige Feuchtigkeit und Wundexsudat, geringes Erythem, geringe chronische Entzündung, Antibiotikaversagen in der Anamnese trotz angemessener antibiotischer oder antimikrobieller Behandlung, Zyklen wiederkehrender Infektionen/Exazerbationen, verzögerte Heilung, resistente Wunde gegenüber antimikrobieller oder antibiotischer Behandlung); Wundbett Status (ungefährer Prozentsatz der im Wundbett vorhandenen Gewebe, bewertet als nekrotisch, schorfig, Granulation, Verdacht auf Biofilm, Epithelisierung), Exsudatmenge (Höhe, Art), Zustand der umgebenden Haut (gesund, mazeriert, trocken/ekzematös), Fotodokumentation bei der Einschreibung und bei jeder Nachsorge gemäß Protokoll. Zusätzliche diagnostische Verfahren werden durchgeführt, um den Gefäßstatus des Patienten zu beurteilen und die zugrunde liegende Pathophysiologie der Wunde und den Wundtyp zu identifizieren (Pulspalpation, Knöchel-Arm-Druckindex, Zehendruck und radiologische Bildgebung, einschließlich Duplex-Doppler-Ultraschall, Magnetresonanztomographie ( MRT) und Computertomographie (CT), transkutane Oximetrie) sowie Laboruntersuchungen, Abstriche/Biopsien zur mikrobiologischen Untersuchung. Bei der Einschreibung routinemäßige Laboruntersuchungen (C-reaktives Protein, vollständiges und differenziertes Blutbild, Serum-Interleukin-6- und Pro-Calcitonin-Spiegel, Nüchternblutzucker, glykosyliertes Hämoglobin, Nieren- und Lebertests) und Wundabstriche/Biopsie für mikrobiologische Untersuchungen Analysen werden durchgeführt und wie angegeben während der Nachbeobachtungszeit aufgrund klinisch vermuteter Anzeichen einer Infektion wiederholt.

Die Patienten in den Kontrollgruppen werden bei der Aufnahme nach 2, 4, 6 Wochen, 3 Monaten, 6 Monaten, 9 Monaten, 12 Monaten und in der HBOT-Gruppe nach 10, 20, 30 Behandlungen, 3 Monaten, 6 Monaten, 9 Monate, 12 Monate, zur klinischen Wundbeurteilung und -beurteilung und zur Beurteilung der Wundheilungsrate und des Wundstatus, zur Durchführung der Wundbeurteilung, zur Aufzeichnung klinischer Hinweise auf das Vorhandensein von Biofilm und/oder Anzeichen einer Infektion, zur Aufzeichnung von Laborbefunden, Wundmerkmalen und der Notwendigkeit von Antibiotika Behandlung und Krankenhausaufenthalt und führen eine Fotodokumentation durch.

Die Patienten in beiden Gruppen werden routinemäßig mit einer Standardbehandlung (Verbände, Debridement, Antibiotika und bakterielle Entlastung) behandelt. Der Verband wird gemäß den Wundeigenschaften mit einem Wechsel alle zwei Tage durchgeführt, einschließlich Primärverband (Alginate, Hydrofaserverband, antimikrobieller Verband, Gelierfaserverband), mit Silber bei Infektion und sekundärer Schutzverband (Schaum mit Polyurethan) bei Wunden mit gebildeter Granulation Gewebe. Der Wundverlauf und die Notwendigkeit einer spezifischen Behandlung werden wöchentlich von Dermatologen und Gefäßchirurgen der Fachrichtung Wundversorgung evaluiert, protokolliert und entsprechend der Wundbeurteilung eine entsprechende Behandlung durchgeführt (Antibiotika, Verband, Verbandswechsel, Débridement, Amputationen).

In der HBOT-Gruppe werden zusätzlich zur Standardbehandlung die HBOT-Sitzungen an 5 Tagen in der Woche in einer Kammer mit mehreren Plätzen bei 2,4 atm absolut (ATA) und 100 % O2 durchgeführt, wobei die wirksame Behandlung 90 Minuten dauert. Die Sitzungen werden von Ärzten überwacht, die in Überdruckmedizin ausgebildet sind.

Die Auswirkungen der chronischen Wunde und sowohl der Standard- als auch der kombinierten Behandlung auf patientenbezogene Ergebnismessungen werden anhand standardisierter Fragebögen bewertet, wobei Intensität und Schmerzmerkmale, Lebensqualität, Depression und Angst bewertet werden. Intensität und Merkmale des Schmerzes werden anhand von Selbsteinschätzungsskalen zur Schmerzbewertung bewertet: visuelle Analogskala – VAS (gemessen, während die Verbände in situ sind, beim Verbandswechsel, während des Debridements, 30 Minuten nach dem Verbandswechsel oder Debridement) und McGill-Schmerzfragebogen bei der Einschreibung, nach 2, 4, 6 Wochen, 3 Monaten, 6 Monaten, 9 Monaten, 12 Monaten. Fragebögen zur Bewertung der Lebensqualität und des allgemeinen Gesundheitszustands des Patienten werden bei der Aufnahme nach 2, 4, 6 Wochen, 3 Monaten, 6 Monaten, 9 Monaten, 12 Monaten durchgeführt, einschließlich: Wound Quality of Life Index (Wound-QoL) und Health Quality of Life Questionnaire (EQ-5D) und Fragebögen zur Bewertung von Depressionen und Angstzuständen (Beck-Depressionsinventar, Beck-Angstinventar) werden bei der Einschreibung nach 6 Wochen, 3 Monaten, 6 Monaten, 9 Monaten, 12 Monaten durchgeführt Zeitraum .

Darüber hinaus werden mikrobiologische Analysen von Abstrichen/Biopsien unter Verwendung standardisierter mikrobiologischer, kultureller und automatisierter Routineverfahren ausgewertet, um mikrobielles Profil, Unterschiede und mikrobielle Resistenz zu bestimmen. Darüber hinaus wird der Nachweis und die Objektivierung von Biofilm unter Verwendung von Standardmethoden für den Biofilmnachweis (Gewebekulturplattenmethode, Kongorot-Agar-Methode, Röhrchenmethode), konfokaler Rasterlasermikroskopie (unter Verwendung des FilmTracer LIVE/DEAD-Fluoreszenzassays und der FilmTracer SYPRO Ruby Biofilm Matrix) bewertet Färbung, Invitrogen) und an klinischen Proben, durch Lichtmikroskopie und verschiedene Färbemethoden und -verfahren (Gram-Färbung, Giemsa-Färbung, Kristallviolett-Färbung, Kongorot-Färbung, Perjodsäure-Schiff-Färbung, Hämatoxylin- und Eosin-Färbung).