Klinische implicaties van biofilm bij chronische wonden

Observationeel prospectief klinisch onderzoek zal worden uitgevoerd op de afdeling onderzeese en hyperbare geneeskunde en de afdeling dermatovenereologie, Clinical Hospital Centre Rijeka, Rijeka, Kroatië gedurende de periode van 3 jaar, van 2021 tot 2024. De studie omvat alle patiënten die worden behandeld vanwege een chronische wond, ongeacht de wondethologie (arterieel, diabetisch, veneus, decubitaal, gecombineerde etiologie, posttraumatisch, postamputatie, brandwonden en andere), 18 jaar en ouder, die geïnformeerde toestemming hebben ondertekend. De patiënten zullen worden behandeld met standaardmethoden, d.w.z. verbanden, debridement, antibiotica en verlichting van de bacteriële belasting (controlegroep) en een andere groep zal aanvullend worden behandeld met HBOT (HBOT-groep). Uitsluitingscriteria van de studie zijn het niet voldoen aan een van de inclusiecriteria. De patiënten met contra-indicaties voor HBOT, absoluut of relatief, patiënten op bleomycine-chemotherapie, met chronische obstructieve longziekte, eerdere spontane pneumothorax, chronische otitis media of chronische sinusitis, onstabiele angina pectoris, ernstig hartfalen, ernstige dementie, voorgeschiedenis van convulsies, claustrofobie, of significante macroangiopathie met afwezigheid van beide distale pulsen en geen positieve respons na zuurstofprovocatietest op transcutane oximetrie die geen baat zal hebben bij HBOT.

De steekproefomvang is berekend op basis van de beschikbare formule voor het vergelijken van twee onafhankelijke groepen volgens kwalitatieve variabelen met een betrouwbaarheidsinterval van 95%. De totale steekproefomvang in beide groepen werd geschat op 62 patiënten (124 patiënten in totaal) met een verwacht gemiddelde van 10-15% patiënten die uit het onderzoek zouden stoppen, dus de berekende totale steekproefomvang in beide groepen werd geschat op 70 patiënten ( 140 patiënten in totaal). Een wondgenezingspercentage van 90% en hoger zal naar verwachting worden bereikt in de HBOT-groep, terwijl het verwachte genezingspercentage in de controlegroep naar verwachting ten minste 20% lager zal zijn na 1 jaar follow-up. Dienovereenkomstig wordt verwacht dat dezelfde verschillen worden bereikt in de controlegroep en de HBOT-groep wat betreft manifestaties van klinische indicaties van de aanwezigheid van biofilm, klinische en laboratoriumsymptomen van infecties.

De patiënten zullen in het onderzoek worden opgenomen na geschiktheidsscreening, geïnformeerde toestemming, verzameling van patiëntengeschiedenis en demografische gegevens (leeftijd, geslacht, burgerlijke staat, kinderen, opleidingsniveau, beroep, werk) met speciale nadruk op comorbiditeit en risicofactoren (diabetes mellitus). , zwaarlijvigheid, hypertensie, hart- en vaatziekten, perifere arteriële aandoeningen) lichamelijk onderzoek, klinische beoordeling en evaluatie van wonden, waaronder het volgende: wondnummer; wond locatie; wondgrootte (breedte, lengte en diepte in cm, en berekend wondoppervlak in cm2 en wondvolume in cm3); wondduur (dagen); type wond (arteriële, diabetische, veneuze, decubitale, gecombineerde etiologie, andere); wondstatus (stilstaand, verslechterend, verbeterend, genezen); klinische tekenen van wondinfectie (hitte/warmte, erytheem, toegenomen exsudaat, purulent exsudaat, toegenomen pijn, verkleurd granulatieweefsel, brokkelig granulatieweefsel, oedeem, wondgeur, vertraagde genezing, vermoedelijke biofilm; klinische indicaties van aanwezigheid van wondbiofilm (overmatig vocht en wondexsudaat, laag erytheem, laag niveau van chronische ontsteking, voorgeschiedenis van falen van antibiotica, zelfs met geschikte antibiotica of antimicrobiële behandeling, cycli van terugkerende infectie/exacerbatie, vertraagde genezing, hardnekkige wond voor antimicrobiële of antibiotische behandeling); wondbed status (ongeveer % van de weefsels aanwezig in het wondbed beoordeeld als necrotisch, beslag, granulatie, vermoedelijke biofilm, epithelisatie); bij inschrijving en bij elke opvolging volgens het protocol. Aanvullende diagnostische procedures zullen worden uitgevoerd om de vasculaire status van de patiënt te beoordelen en de onderliggende pathofysiologie van de wond en het wondtype te identificeren (pulspalpatie, enkel-armdrukindex, teendruk en radiologische beeldvorming, inclusief duplex Doppler-echografie, magnetische resonantiebeeldvorming ( MRI) en computertomografie (CT) beeldvorming, transcutane oximetrie), evenals laboratoriumonderzoek, swabs/biopten voor microbiologisch onderzoek. Na inschrijving routinematig laboratoriumonderzoek (C-reactief proteïne, compleet en gedifferentieerd bloedbeeld, seruminterleukine-6- en procalcitoninespiegel, nuchtere bloedglucose, geglycosyleerd hemoglobine, nier- en levertesten) en wonduitstrijkjes/biopsie voor microbiologisch onderzoek. analyses worden uitgevoerd en herhaald zoals aangegeven tijdens de follow-upperiode vanwege klinisch vermoede tekenen van infectie.

De patiënten in de controlegroepen zullen worden geëvalueerd bij inschrijving, na 2, 4, 6 weken, 3 maanden, 6 maanden, 9 maanden, 12 maanden, en in de HBOT-groep na 10, 20, 30 behandelingen, 3 maanden, 6 maanden, 9 maanden, 12 maanden, voor klinische wondbeoordeling en -evaluatie, en om de snelheid en status van wondgenezing te evalueren, wondbeoordeling uit te voeren, klinische indicaties van biofilmaanwezigheid en/of tekenen van infectie, laboratoriumbevindingen, wondkenmerken, de behoefte aan antibiotica vast te leggen behandeling en ziekenhuisopname en het uitvoeren van fotodocumentatie.

De patiënten in beide groepen zullen routinematig worden behandeld met standaardbehandeling (verbanden, debridement, antibiotica en verlichting van bacteriële belasting). Het verband wordt aangebracht op basis van de wondkenmerken en wordt om de twee dagen vervangen, inclusief primair verband (alginaten, hydrofiberverband, antimicrobieel verband, gelvormend vezelverband), met zilver indien geïnfecteerd, en secundair beschermend verband (schuim met polyurethaan) bij wonden met gevormd granulaat zakdoek. Wekelijks wordt de progressie van de wond en de behoefte aan een specifieke behandeling geëvalueerd en geregistreerd door dermatoloog en vaatchirurg die gespecialiseerd is in wondzorg, en wordt een passende behandeling uitgevoerd volgens de wondbeoordeling (antibiotica, verband, verbandwissel, debridement, amputaties).

In de HBOT-groep worden de HBOT-sessies, naast de standaardbehandeling, 5 dagen per week uitgevoerd in een kamer met meerdere plaatsen bij 2,4 atm absoluut (ATA) en 100% O2 met een effectieve behandeling van 90 minuten. De sessies worden begeleid door artsen die zijn opgeleid in hyperbare geneeskunde.

De impact van chronische wonden en beide, standaard- en gecombineerde behandeling, op patiëntgerelateerde uitkomstmaten zal worden geëvalueerd door middel van gestandaardiseerde vragenlijsten, waarbij intensiteit en pijnkenmerken, kwaliteit van leven, depressie en angst worden beoordeeld. Intensiteit en kenmerken van pijn zullen worden geëvalueerd met behulp van zelfbeoordelingsschalen voor het evalueren van pijn: visuele analoge schaal -VAS (gemeten terwijl verband in situ is, bij verbandwissel, tijdens debridement, 30 minuten na verbandwissel of debridement) en McGill Pijnvragenlijst bij inschrijving, na 2, 4, 6 weken, 3 maanden, 6 maanden, 9 maanden, 12 maanden. Vragenlijsten voor het evalueren van de kwaliteit van leven en de algehele gezondheidstoestand van de patiënt zullen worden uitgevoerd bij inschrijving, na 2, 4, 6 weken, 3 maanden, 6 maanden, 9 maanden, 12 maanden, inclusief: Wound Quality of Life Index (Wound-QoL) en Health Quality of Life Questionnaire (EQ-5D), en vragenlijsten voor het evalueren van depressie en angst (Beck-depressie-inventaris, Beck-angst-inventarisatie) zullen worden uitgevoerd bij inschrijving, na een periode van 6 weken, 3 maanden, 6 maanden, 9 maanden, 12 maanden .

Bovendien zullen microbiologische analyses van uitstrijkjes/biopsieën worden geëvalueerd met behulp van gestandaardiseerde, routinematige microbiologische, culturele en geautomatiseerde procedures om het microbiële profiel, de verschillen en de microbiële resistentie te bepalen. Daarnaast zal detectie en objectivering van biofilm worden geëvalueerd met behulp van standaardmethoden voor biofilmdetectie (Weefselkweekplaatmethode, Congo-rode agar-methode, Tube-methode), confocale scanning lasermicroscopie (met behulp van FilmTracer LIVE/DEAD fluorescentietest en FilmTracer SYPRO Ruby Biofilm Matrix kleuring, Invitrogen), en op klinische monsters, door middel van lichtmicroscopie en verschillende kleuringsmethoden en -procedures (Gramkleuring, Giemsa-kleuring, Kristalvioletkleuring, Congoroodkleuring, Periodiekzuur-Schiff-kleuring, Hematoxyline- en eosinekleuring).