Implicações clínicas do biofilme em feridas crônicas

O estudo clínico prospectivo observacional será conduzido no Departamento de medicina submarina e hiperbárica e no Departamento de Dermatovenereologia, Centro Hospitalar Clínico Rijeka, Rijeka, Croácia durante o período de 3 anos, de 2021 a 2024. O estudo incluirá todos os pacientes tratados devido à ferida crônica, independentemente da etologia da ferida (arterial, diabética, venosa, decúbito, etiologia combinada, pós-traumática, pós-amputação, queimadura e outros), 18 anos de idade ou mais, que assinaram o consentimento informado. Os pacientes serão tratados com métodos convencionais, ou seja, curativos, desbridamentos, antibióticos e alívio da carga bacteriana (grupo controle) e outro grupo será tratado adicionalmente com OHB (grupo HBOT). O critério de exclusão do estudo é o não cumprimento de um dos critérios de inclusão. Os pacientes com contra-indicações para OHB, absoluta ou relativa, pacientes em quimioterapia com bleomicina, com doença pulmonar obstrutiva crônica, pneumotórax espontâneo prévio, otite média crônica ou sinusite crônica, angina pectoris instável, insuficiência cardíaca grave, demência grave, história de convulsões, claustrofobia, ou macroangiopatia significativa com pulsos distais ausentes e sem resposta positiva após teste de provocação de oxigênio na oximetria transcutânea que não se beneficiará da OHB.

O tamanho da amostra foi calculado com base na fórmula disponível para comparação de dois grupos independentes de acordo com variáveis ​​qualitativas com intervalo de confiança de 95%. O tamanho total da amostra em ambos os grupos foi estimado em 62 pacientes (124 pacientes no total) com uma média esperada de 10-15% de pacientes para abandonar o estudo, então o tamanho total da amostra calculado em ambos os grupos foi estimado em 70 pacientes ( 140 pacientes no total). Espera-se que a taxa de cicatrização de feridas de 90% ou mais seja alcançada no grupo OHB, enquanto a taxa de cicatrização esperada no grupo controle deve ser pelo menos 20% menor após 1 ano de acompanhamento. Correspondentemente, espera-se que as mesmas diferenças sejam alcançadas no grupo controle e OHB em relação às manifestações de indicações clínicas de presença de biofilme, sinais clínicos e laboratoriais de infecções.

Os pacientes serão incluídos no estudo após triagem de elegibilidade, consentimento informado, coleta do histórico do paciente e dados demográficos (idade, sexo, estado civil, filhos, escolaridade, profissão, emprego) com ênfase especial para comorbidades e fatores de risco (diabetes mellitus , obesidade, hipertensão, doenças cardiovasculares, doenças arteriais periféricas) exame físico, avaliação clínica da ferida e avaliação incluindo o seguinte: número da ferida; localização da ferida; tamanho da ferida (largura, comprimento e profundidade em cm, superfície da ferida calculada em cm2 e volume da ferida em cm3); duração da ferida (dias); tipo de ferida (arterial, diabética, venosa, decúbito, etiologia combinada, outra); estado da ferida (estagnada, deteriorada, melhorando, cicatrizada); sinais clínicos de infecção da ferida (calor/calor, eritema, aumento do exsudato, exsudato purulento, aumento da dor, tecido de granulação descolorido, tecido de granulação friável, edema, odor fétido da ferida, cicatrização retardada, suspeita de biofilme; indicações clínicas da presença de biofilme na ferida (umidade excessiva e exsudato da ferida, baixo nível de eritema, baixo nível de inflamação crônica, história de falha antibiótica mesmo com tratamento antibiótico ou antimicrobiano apropriado, ciclos de infecção recorrente/exacerbação, cicatrização retardada, ferida recalcitrante ao tratamento antimicrobiano ou antibiótico); leito da ferida estado (% aproximada de tecidos presentes no leito da ferida classificado como necrótico, esfacelado, granulação, biofilme suspeito, epitelização); nível de exsudato (nível, tipo); condição da pele circundante (saudável, macerada, seca/eczematosa); fotodocumentação no ato da inscrição e a cada acompanhamento de acordo com o protocolo. Procedimentos diagnósticos adicionais serão realizados para avaliar o estado vascular do paciente e identificar a fisiopatologia subjacente da ferida e o tipo de ferida (palpação do pulso, índice de pressão tornozelo-braquial, pressão do dedo do pé e imagem radiológica, incluindo ultrassom Doppler duplex, ressonância magnética ( ressonância magnética) e tomografia computadorizada (TC), oximetria transcutânea), bem como exames laboratoriais, swabs/biópsias para exame microbiológico. Após a inscrição, exames laboratoriais de rotina (proteína C reativa, hemograma completo e diferenciado, nível sérico de interleucina-6 e pró-calcitonina, glicemia de jejum, hemoglobina glicosilada, testes renais e hepáticos) e esfregaços/biópsia de feridas para exames microbiológicos as análises serão realizadas e repetidas conforme indicado durante o período de acompanhamento devido a sinais clinicamente suspeitos de infecção.

Os pacientes dos grupos controle serão avaliados no momento da inscrição, após 2, 4, 6 semanas, 3 meses, 6 meses, 9 meses, 12 meses, e no grupo OHB após 10, 20, 30 tratamentos, 3 meses, 6 meses, 9 meses, 12 meses, para avaliação e avaliação clínica da ferida e para avaliar a taxa e o estado de cicatrização da ferida, realizar avaliação da ferida, registrar indicações clínicas da presença de biofilme e/ou sinais de infecção, achados laboratoriais, características da ferida, necessidade de antibiótico tratamento e internação e realizar fotodocumentação.

Os pacientes de ambos os grupos serão tratados rotineiramente com tratamento padrão (curativos, desbridamentos, antibióticos e alívio da carga bacteriana). O curativo será realizado de acordo com as características da ferida com troca a cada dois dias incluindo curativo primário (alginatos, curativo de hidrofibra, curativo antimicrobiano, curativo de fibra gelificante), com prata se infectado, e curativo protetor secundário (espuma com poliuretano) em feridas com granulação formada tecido. A evolução da ferida e a necessidade de tratamento específico serão avaliadas e registradas semanalmente por dermatologista e cirurgião vascular especializado no tratamento de feridas, sendo realizado o tratamento adequado de acordo com a avaliação da ferida (antibióticos, curativo, troca de curativos, desbridamentos, amputações).

No grupo OHB, além do tratamento padrão, as sessões de OHB serão realizadas 5 dias por semana, em câmara multilugar a 2,4 atm absoluto (ATA) e O2 a 100% com tratamento efetivo com duração de 90 min. As sessões serão supervisionadas por médicos formados em medicina hiperbárica.

O impacto da ferida crônica e de ambos, tratamento padrão e combinado, nas medidas de resultado relacionadas ao paciente será avaliado avaliando a intensidade e as características da dor, qualidade de vida, depressão e ansiedade por meio de questionários padronizados. A intensidade e as características da dor serão avaliadas por meio de escalas de autoavaliação para avaliação da dor: escala visual analógica -VAS (medida enquanto os curativos estão in situ, na troca do curativo, durante o desbridamento, 30 min após a troca do curativo ou desbridamento) e questionário de dor McGill após a inscrição, após 2, 4, 6 semanas, 3 meses, 6 meses, 9 meses, 12 meses. Questionários para avaliar a qualidade de vida e o estado geral de saúde do paciente serão realizados após a inscrição, após 2, 4, 6 semanas, 3 meses, 6 meses, 9 meses, 12 meses, incluindo: Índice de Qualidade de Vida de Feridas (Wound-QoL) e questionário de qualidade de vida em saúde (EQ-5D) e questionários para avaliação de depressão e ansiedade (inventário de depressão de Beck, inventário de ansiedade de Beck) serão realizados no momento da inscrição, após 6 semanas, 3 meses, 6 meses, 9 meses, período de 12 meses .

Além disso, análises microbiológicas de zaragatoas/biópsias serão avaliadas usando procedimentos padronizados, microbiológicos de rotina, culturais e automatizados, para determinar perfil microbiano, diferenças e resistência microbiana. Além disso, a detecção e a objetivação do biofilme serão avaliadas usando métodos padrão para detecção de biofilme (método de placa de cultura de tecidos, método de ágar vermelho Congo, método de tubo), microscopia confocal de varredura a laser (usando o ensaio de fluorescência FilmTracer LIVE/DEAD e FilmTracer SYPRO Ruby Biofilm Matrix corante, Invitrogen) e em amostras clínicas, por microscopia de luz e diferentes métodos e procedimentos de coloração (coloração de Gram, coloração de Giemsa, coloração de cristal violeta, coloração de vermelho Congo, coloração de ácido periódico-Schiff, coloração de hematoxilina e eosina).