Клинические последствия биопленки при хронических ранах

Обсервационное проспективное клиническое исследование будет проводиться в отделении подводной и гипербарической медицины и отделении дерматовенерологии Центра клинической больницы Риека, Риека, Хорватия в течение 3-летнего периода, с 2021 по 2024 год. В исследование будут включены все пациенты, пролеченные по поводу хронической раны, независимо от ее этиологии (артериальная, диабетическая, венозная, пролежневая, комбинированной этиологии, посттравматическая, постампутационная, ожоговая и др.), в возрасте 18 лет и старше, подписавшие информированное согласие. Пациентов будут лечить стандартными методами, т. е. перевязками, санацией, антибиотиками и снижением бактериальной нагрузки (контрольная группа), а другой группе будет дополнительно проведено лечение ГБО (группа ГБО). Критерием исключения из исследования является несоответствие одному из критериев включения. Пациенты с противопоказаниями к ГБО, абсолютными или относительными, пациенты, получающие химиотерапию блеомицином, с хронической обструктивной болезнью легких, спонтанным пневмотораксом в анамнезе, хроническим средним отитом или хроническим синуситом, нестабильной стенокардией, тяжелой сердечной недостаточностью, тяжелой деменцией, судорогами в анамнезе, клаустрофобией, или выраженная макроангиопатия с отсутствием обоих дистальных импульсов и отсутствием положительного ответа после теста на провокацию кислородом при чрескожной оксиметрии, при которой ГБО не поможет.

Размер выборки рассчитан на основе доступной формулы сравнения двух независимых групп по качественным переменным с доверительным интервалом 95%. Общий размер выборки в обеих группах оценивается в 62 пациента (всего 124 пациента), при этом ожидается, что в среднем 10-15% пациентов выбывают из исследования, поэтому рассчитанный общий размер выборки в обеих группах оценивается в 70 пациентов. всего 140 пациентов). Ожидается, что скорость заживления ран 90% и выше будет достигнута в группе ГБО, в то время как ожидаемая скорость заживления в контрольной группе будет как минимум на 20% ниже после 1 года наблюдения. Соответственно, в контроле и группе ГБО ожидаются одинаковые различия в проявлении клинических признаков наличия биопленок, клинико-лабораторных признаков инфекций.

Пациенты будут включены в исследование после проверки на соответствие требованиям, получения информированного согласия, сбора истории болезни и демографических данных (возраст, пол, семейное положение, наличие детей, уровень образования, профессия, занятость) с особым акцентом на сопутствующие заболевания и факторы риска (сахарный диабет). , ожирение, гипертония, сердечно-сосудистые заболевания, заболевания периферических артерий) медицинский осмотр, клиническая оценка и оценка раны, включая следующее: номер раны; расположение раны; размер раны (ширина, длина и глубина в см, расчетная поверхность раны в см2 и объем раны в см3); продолжительность ранения (дни); тип раны (артериальная, диабетическая, венозная, пролежневая, комбинированной этиологии, др.); состояние раны (застойная, ухудшающаяся, улучшающаяся, зажившая); клинические признаки раневой инфекции (жар/теплота, эритема, увеличение экссудата, гнойный экссудат, усиление боли, обесцвеченная грануляционная ткань, рыхлая грануляционная ткань, отек, неприятный запах из раны, замедленное заживление, подозрение на биопленку; клинические признаки наличия раневой биопленки (чрезмерная влажность и раневой экссудат, низкий уровень эритемы, низкий уровень хронического воспаления, неэффективность антибиотиков даже при соответствующем лечении антибиотиками или противомикробными препаратами в анамнезе, циклы рецидивирующей инфекции/обострения, замедленное заживление, резистентность раны к противомикробным препаратам или лечению антибиотиками); ложе раны состояние (примерный % тканей в раневом ложе оценивается как некротический, рыхлый, грануляционный, подозрение на биопленку, эпителизацию); уровень экссудата (уровень, тип); состояние окружающей кожи (здоровая, мацерированная, сухая/экзематозная); фотодокументация. при поступлении и при каждом последующем наблюдении согласно протоколу. Будут выполнены дополнительные диагностические процедуры для оценки сосудистого статуса пациента и определения основной патофизиологии раны и типа раны (пальпация пульса, лодыжечно-плечевой индекс давления, давление пальцев стопы и рентгенологическая визуализация, в том числе дуплексная допплерография, магнитно-резонансная томография ( МРТ) и компьютерная томография (КТ), чрескожная оксиметрия), а также лабораторные исследования, мазки/биопсии для микробиологического исследования. При поступлении: рутинное лабораторное обследование (С-реактивный белок, полный и дифференцированный анализ крови, уровень интерлейкина-6 и прокальцитонина в сыворотке, уровень глюкозы в крови натощак, гликозилированный гемоглобин, анализы почек и печени) и мазки из раны/биопсия для микробиологического исследования. анализы будут выполняться и повторяться, как указано, в течение периода наблюдения из-за клинически подозреваемых признаков инфекции.

Пациенты в контрольных группах будут оцениваться при включении, через 2, 4, 6 недель, 3 месяца, 6 месяцев, 9 месяцев, 12 месяцев, а в группе ГБО после 10, 20, 30 процедур, 3 месяцев, 6 месяцев, 9 месяцев, 12 месяцев, для клинической оценки и оценки раны, а также для оценки скорости и состояния заживления раны, проведения оценки раны, регистрации клинических признаков наличия биопленки и/или признаков инфекции, лабораторных данных, характеристик раны, потребности в антибиотиках лечение и госпитализация и выполнение фотодокументации.

Пациентам в обеих группах будет назначено стандартное лечение (перевязки, хирургическая обработка раны, антибиотики и снижение бактериальной нагрузки). Перевязки будут выполняться в соответствии с характеристиками раны со сменой каждые два дня, включая первичную повязку (альгинаты, гидроволоконные повязки, антимикробные повязки, повязки из гелеобразных волокон), с серебром при инфицировании и вторичные защитные повязки (пена с полиуретаном) при ранах со сформированными грануляциями. салфетка. Дерматолог и сосудистый хирург, специализирующиеся на уходе за раной, будут еженедельно оценивать и фиксировать прогрессирование раны и необходимость специального лечения, а соответствующее лечение будет проводиться в соответствии с оценкой раны (антибиотики, перевязка, смена повязки, хирургическая обработка раны, ампутация).

В группе ГБО, помимо стандартного лечения, сеансы ГБО будут проводиться 5 дней в неделю, в многоместной камере при абсолютном давлении 2,4 атм (АТА) и 100% О2 с эффективной продолжительностью лечения 90 мин. Занятия будут проходить под наблюдением врачей, прошедших подготовку в области гипербарической медицины.

Влияние хронической раны и как стандартного, так и комбинированного лечения на показатели исхода, связанные с пациентом, будет оцениваться путем оценки интенсивности и характеристик боли, качества жизни, депрессии и тревоги с помощью стандартизированных опросников. Интенсивность и характеристики боли будут оцениваться с использованием шкал самооценки боли: визуально-аналоговая шкала -ВАШ (измеряется во время наложения повязок, при смене повязки, во время санации, через 30 мин после смены повязки или санации) и опросник McGill Pain. при зачислении, через 2, 4, 6 недель, 3 месяца, 6 месяцев, 9 месяцев, 12 месяцев. Анкеты для оценки качества жизни и общего состояния здоровья пациента будут проводиться при включении в исследование, через 2, 4, 6 недель, 3 месяца, 6 месяцев, 9 месяцев, 12 месяцев, включая: Индекс качества жизни после ранения (Wound-QoL) и опросник качества жизни здоровья (EQ-5D), а также опросники для оценки депрессии и тревоги (опросник депрессии Бека, опросник Бека о тревоге) будут выполняться при зачислении, через 6 недель, 3 месяца, 6 месяцев, 9 месяцев, 12 месяцев. .

Кроме того, микробиологические анализы мазков/биопсий будут оцениваться с использованием стандартных, рутинных микробиологических, культуральных и автоматизированных процедур для определения микробного профиля, различий и микробной резистентности. Кроме того, обнаружение и объективация биопленки будут оцениваться с использованием стандартных методов обнаружения биопленки (метод на чашках для культивирования тканей, метод с агаром с красным конго, метод с пробирками), конфокальной сканирующей лазерной микроскопии (с использованием флуоресцентного анализа FilmTracer LIVE/DEAD и FilmTracer SYPRO Ruby Biofilm Matrix). окрашивание, Invitrogen), а на клинических образцах - с помощью световой микроскопии и различных методов и процедур окрашивания (окрашивание по Граму, окрашивание по Гимзе, окрашивание кристаллическим фиолетовым, окрашивание конго красным, окрашивание периодической кислотой-Шиффом, окрашивание гематоксилином и эозином).