Kliniske implikasjoner av biofilm i kroniske sår

Observasjonelle prospektive kliniske studier vil bli utført ved avdelingen for undersjøisk og hyperbarisk medisin og avdelingen for dermatovenereologi, Clinical Hospital Center Rijeka, Rijeka, Kroatia i løpet av 3-årsperioden, fra 2021 til 2024. Studien vil inkludere alle pasienter behandlet på grunn av kroniske sår uavhengig av såretologien (arteriell, diabetisk, venøs, dekubital, kombinert etiologi, posttraumatisk, postamputasjon, brannsår og annet), 18 år og eldre, som signerte informert samtykke. Pasientene vil bli behandlet med standardmetoder, dvs. bandasjer, debridement, antibiotika og bakteriell belastningsavlastning (kontrollgruppe), og en annen gruppe vil bli tilleggsbehandlet med HBOT (HBOT-gruppe). Eksklusjonskriteriene for studien er manglende oppfyllelse av et av inklusjonskriteriene. Pasientene med kontraindikasjoner for HBOT, absolutt eller relativ, pasienter på bleomycin kjemoterapi, med kronisk obstruktiv lungesykdom, tidligere spontan pneumothorax, kronisk mellomørebetennelse eller kronisk bihulebetennelse, ustabil angina pectoris, alvorlig hjertesvikt, alvorlig demens, klaustrofobi, klaustrophobia, eller signifikant makroangiopati med fraværende både distale pulser og ingen positiv respons etter oksygenprovokasjonstest på transkutan oksymetri som ikke vil ha nytte av HBOT.

Utvalgsstørrelsen er beregnet basert på den tilgjengelige formelen for å sammenligne to uavhengige grupper i henhold til kvalitative variabler med 95 % konfidensintervall. Total utvalgsstørrelse i begge gruppene ble estimert til å være 62 pasienter (124 pasienter totalt) med forventet gjennomsnitt på 10-15 % pasienter til frafall fra studien, så beregnet total utvalgsstørrelse i begge grupper ble estimert til å være 70 pasienter ( 140 pasienter totalt). Sårhelingsrate på 90 % og høyere forventes å oppnås i HBOT-gruppen, mens forventet tilhelingsrate i kontrollgruppen forventes å være minst 20 % lavere etter 1 års oppfølging. Tilsvarende forventes de samme forskjellene å oppnås i kontroll og HBOT-gruppe som når det gjelder manifestasjoner av kliniske indikasjoner på biofilmtilstedeværelse, kliniske og laboratoriemessige tegn på infeksjoner.

Pasientene vil bli registrert i studien etter kvalifikasjonsskjerm, informert samtykke, innsamling av pasienthistorie og demografiske data (alder, kjønn, sivilstatus, barn, utdanningsnivå, yrke, sysselsetting) med spesiell vekt på komorbiditeter og risikofaktorer (diabetes mellitus) , fedme, hypertensjon, kardiovaskulære sykdommer, perifere arterielle sykdommer) fysisk undersøkelse, klinisk sårvurdering og evaluering inkludert følgende: sårnummer; sårplassering; sårstørrelse (bredde, lengde og dybde i cm, og beregnet såroverflate i cm2 og sårvolum i cm3); sårvarighet (dager); type sår (arteriell, diabetisk, venøs, dekubital, kombinert etiologi, annet); sårstatus (stillestående, forverret, bedre, helbredet); kliniske tegn på sårinfeksjon (varme/varme, erytem, ​​økt ekssudat, purulent ekssudat, økt smerte, misfarget granulasjonsvev, sprøtt granulasjonsvev, ødem, vond sårlukt, forsinket tilheling, mistenkt biofilm; kliniske indikasjoner på tilstedeværelse av sårbiofilm (overdreven fuktighet) og såreksudat, lavt nivå av erytem, ​​lavt nivå av kronisk betennelse, historie med antibiotikasvikt selv med passende antibiotika eller antimikrobiell behandling, sykluser med tilbakevendende infeksjon/forverring, forsinket tilheling, gjenstridig sår til antimikrobiell eller antibiotikabehandling); sårseng status (omtrent % av vev tilstede i sårsengen vurdert som nekrotisk, sloughy, granulering, mistenkt biofilm, epitelialisering); ekssudatnivå (nivå, type); tilstanden til omkringliggende hud (sunn, maserert, tørr/eksematøs); fotodokumentasjon ved innmelding og ved hver oppfølging i henhold til protokollen. Ytterligere diagnostiske prosedyrer vil bli utført for å vurdere vaskulær status til pasienten og identifisere den underliggende patofysiologien til såret og sårtypen (pulspalpering, ankel-brachial trykkindeks, tåtrykk og radiologisk avbildning, inkludert dupleks doppler ultralyd, magnetisk resonansavbildning ( MR) og computertomografi (CT) avbildning, transkutan oksymetri), samt laboratorieundersøkelse, vattpinner/biopsier for mikrobiologisk undersøkelse. Ved påmelding, rutinemessig laboratorieundersøkelse (C-reaktivt protein, komplett og differensier blodtelling, serum interleukin-6 og pro-kalsitoninnivå, fastende blodsukker, glykosylert hemoglobin, nyre og leverprøver) og sårprøver/biopsi for mikrobiologisk analyser vil bli utført, og gjentatt som angitt under oppfølgingsperioden på grunn av klinisk mistenkte tegn på infeksjon.

Pasientene i kontrollgruppene vil bli evaluert ved innmelding, etter 2, 4, 6 uker, 3 måneder, 6 måneder, 9 måneder, 12 måneders periode, og i HBOT-gruppen etter 10, 20, 30 behandlinger, 3 måneder, 6 måneder, 9 måneder, 12 måneder, for klinisk sårvurdering og evaluering, og for å evaluere sårhelingshastighet og -status, utføre sårvurdering, registrere kliniske indikasjoner på biofilmtilstedeværelse og/eller tegn på infeksjon, laboratoriefunn, sårkarakteristikker, behov for antibiotika behandling og sykehusinnleggelse og utføre fotodokumentasjon.

Pasientene i begge gruppene vil bli behandlet rutinemessig med standardbehandling (bandasjer, debridement, antibiotika og avlastning av bakteriell belastning). Bandasjen vil bli utført i henhold til sårkarakteristikker med skifte annenhver dag, inkludert primær bandasje (alginater, hydrofiberbandasje, antimikrobiell bandasje, gelerende fiberbandasje), med sølv hvis infisert, og sekundær beskyttende bandasje (skum med polyuretan) i sår med dannet granulering vev. Progresjonen av såret og behovet for spesifikk behandling vil bli evaluert og registrert ukentlig av hudlege og karkirurg med spesialisering i sårbehandling, og hensiktsmessig behandling utført i henhold til sårvurdering (antibiotika, bandasje, bandasjeskift, debridering, amputasjoner).

I HBOT-gruppen, i tillegg til standardbehandling, vil HBOT-sesjonene utføres 5 dager i uken, i flerplasserskammer ved 2,4 atm absolutt (ATA) og 100 % O2 med effektiv behandling som varer i 90 min. Øktene vil bli veiledet av leger med opplæring i hyperbar medisin.

Effekten av kroniske sår og begge, standard og kombinert behandling, på pasientrelaterte utfallsmål vil bli evaluert ved å vurdere intensitet og smertekarakteristikker, livskvalitet, depresjon og angst ved hjelp av standardiserte spørreskjemaer. Intensitet og karakteristika for smerte vil bli evaluert ved å bruke egenvurderingsskalaer for å evaluere smerte: visuell analog skala -VAS (målt mens bandasjer er in situ, ved bandasjeskift, under debridering, 30 minutter etter bandasjebytte eller debridering), og McGill Pain spørreskjema ved påmelding, etter 2, 4, 6 uker, 3 måneder, 6 måneder, 9 måneder, 12 måneder. Spørreskjemaer for evaluering av livskvalitet og generell helsetilstand til pasienten vil bli utført ved registrering, etter 2, 4, 6 uker, 3 måneder, 6 måneder, 9 måneder, 12 måneders periode, inkludert: Livskvalitetsindeks for sår (Wound-QoL) og Health Quality of Life Questionnaire (EQ-5D), og spørreskjemaer for evaluering av depresjon og angst (Beck depression inventory, Beck anxiety inventory) vil bli utført ved påmelding, etter 6 uker, 3 måneder, 6 måneder, 9 måneder, 12 måneders periode .

I tillegg vil mikrobiologiske analyser av vattpinner/biopsier bli evaluert ved bruk av standardiserte, rutinemessige mikrobiologiske, kulturelle og automatiserte prosedyrer, for å bestemme mikrobiell profil, forskjeller og mikrobiell resistens. I tillegg vil deteksjon og objektivisering av biofilm bli evaluert ved bruk av standardmetoder for biofilmdeteksjon (vevskulturplatemetode, kongorød agarmetode, tubemetode), konfokal skanningslasermikroskopi (ved bruk av FilmTracer LIVE/DEAD fluorescensanalyse og FilmTracer SYPRO Ruby Biofilm Matrix flekker, Invitrogen), og på kliniske prøver, ved lysmikroskopi og ulike fargingsmetoder og prosedyrer (Gramfarging, Giemsa-farging, Krystallfiolettflekk, Kongo-rødflekk, Periodic acid-Schiff-farging, Hematoxylin og eosin-farging).