Kliniske implikationer af biofilm i kroniske sår

Observationelle prospektive kliniske undersøgelser vil blive udført på afdelingen for undersøisk og hyperbar medicin og afdelingen for dermatovenereologi, Klinisk Hospitalscenter Rijeka, Rijeka, Kroatien i løbet af den 3-årige periode fra 2021 til 2024. Undersøgelsen vil omfatte alle patienter, der behandles på grund af kroniske sår, uanset sårets etologi (arteriel, diabetisk, venøs, dekubital, kombineret ætiologi, posttraumatisk, postamputation, forbrænding og andet), 18 år og ældre, som har underskrevet informeret samtykke. Patienterne vil blive behandlet med standardmetoder, det vil sige forbindinger, debridering, antibiotika og bakteriel belastningsaflastning (kontrolgruppe), og en anden gruppe vil blive yderligere behandlet med HBOT (HBOT-gruppe). Eksklusionskriterierne for undersøgelsen er manglende opfyldelse af et af inklusionskriterierne. Patienterne med kontraindikationer for HBOT, absolut eller relativ, patienter i bleomycin-kemoterapi, med kronisk obstruktiv lungesygdom, tidligere spontan pneumothorax, kronisk mellemørebetændelse eller kronisk bihulebetændelse, ustabil angina pectoris, alvorligt hjertesvigt, svær demens, klaustrophobia, claustrophobia, eller signifikant makroangiopati med fraværende både distale pulser og ingen positiv respons efter iltprovokationstest på transkutan oximetri, som ikke vil drage fordel af HBOT.

Stikprøvestørrelsen er beregnet ud fra den tilgængelige formel til sammenligning af to uafhængige grupper i henhold til kvalitative variable med 95 % konfidensinterval. Samlet stikprøvestørrelse i begge grupper blev estimeret til at være 62 patienter (124 patienter i alt) med forventet gennemsnit på 10-15 % patienter til at droppe ud af undersøgelsen, så den beregnede samlede prøvestørrelse i begge grupper blev estimeret til at være 70 patienter ( 140 patienter i alt). Sårhelingshastighed på 90 % og højere forventes at blive opnået i HBOT-gruppen, mens forventet helingsrate i kontrolgruppen forventes at være mindst 20 % lavere efter 1 års opfølgning. Tilsvarende forventes de samme forskelle at blive opnået i kontrol- og HBOT-gruppen som vedrørende manifestationer af kliniske indikationer på biofilmtilstedeværelse, kliniske og laboratoriemæssige tegn på infektioner.

Patienterne vil blive tilmeldt undersøgelsen efter berettigelsesscreening, informeret samtykke, indsamling af patienthistorie og demografiske data (alder, køn, civilstand, børn, uddannelsesniveau, profession, beskæftigelse) med særlig vægt på komorbiditeter og risikofaktorer (diabetes mellitus , fedme, hypertension, kardiovaskulære sygdomme, perifere arterielle sygdomme) fysisk undersøgelse, klinisk sårvurdering og evaluering, herunder følgende: sårnummer; sårplacering; sårstørrelse (bredde, længde og dybde i cm, og beregnet sårflade i cm2 og sårvolumen i cm3); sårets varighed (dage); type af såret (arteriel, diabetisk, venøs, decubital, kombineret ætiologi, andet); sårstatus (stagneret, forværret, forbedret, helet); kliniske tegn på sårinfektion (varme/varme, erytem, ​​øget ekssudat, purulent ekssudat, øget smerte, misfarvet granulationsvæv, sprødt granulationsvæv, ødem, dårlig lugt i såret, forsinket heling, mistænkt biofilm; kliniske indikationer på tilstedeværelse af sårbiofilm (overdreven fugt og sårekssudat, lavt niveau af erytem, ​​lavt niveau af kronisk inflammation, historie med antibiotikasvigt selv med passende antibiotika eller antimikrobiel behandling, cyklusser med tilbagevendende infektion/forværring, forsinket heling, genstridigt sår til antimikrobiel eller antibiotikabehandling); sårleje status (ca. % af væv til stede i sårlejet vurderet som nekrotisk, slugt, granuleret, mistænkt biofilm, epitelisering); ekssudatniveau (niveau, type); tilstand af omgivende hud (sund, udblødt, tør/eksematøs); fotodokumentation ved tilmelding og ved hver opfølgning iht. protokollen. Yderligere diagnostiske procedurer vil blive udført for at vurdere patientens vaskulære status og identificere den underliggende patofysiologi af såret og sårtypen (pulspalpering, ankel-brachial trykindeks, tåtryk og radiologisk billeddannelse, inklusive duplex Doppler ultralyd, magnetisk resonansbilleddannelse ( MR) og computertomografi (CT) billeddannelse, transkutan oximetri), samt laboratorieundersøgelse, podninger/biopsier til mikrobiologisk undersøgelse. Ved tilmelding, rutinemæssig laboratorieoparbejdning (C-reaktivt protein, komplet og differentieret blodtal, serum interleukin-6 og pro-calcitonin niveau, fastende blodsukker, glykosyleret hæmoglobin, nyre- og leverprøver) og sårprøver/biopsi til mikrobiologisk analyser vil blive udført og gentaget som angivet under opfølgningsperioden på grund af klinisk mistænkte tegn på infektion.

Patienterne i kontrolgrupperne vil blive evalueret ved tilmelding, efter 2, 4, 6 uger, 3 måneder, 6 måneder, 9 måneder, 12 måneders periode og i HBOT-gruppen efter 10, 20, 30 behandlinger, 3 måneder, 6 måneder, 9 måneder, 12 måneder, til klinisk sårvurdering og -evaluering, og for at evaluere sårhelingshastigheden og -status, udføre sårvurdering, registrere kliniske indikationer på biofilmtilstedeværelse og/eller tegn på infektion, laboratoriefund, sårkarakteristika, behovet for antibiotika behandling og indlæggelse og udføre foto-dokumentation.

Patienterne i begge grupper vil blive behandlet rutinemæssigt med standardbehandling (forbindinger, debridering, antibiotika og aflastning af bakteriel belastning). Forbindingen vil blive udført i henhold til sårkarakteristika med skift hver anden dag, inklusive primær bandage (alginater, hydrofiberbandage, antimikrobiel bandage, gelerende fiberbandage), med sølv, hvis det er inficeret, og sekundær beskyttelsesbandage (skum med polyurethan) i sår med dannet granulering væv. Sårets udvikling og behovet for specifik behandling vil blive evalueret og registreret ugentligt af hudlæge og karkirurg med speciale i sårpleje, og passende behandling udføres i henhold til sårvurdering (antibiotika, bandage, bandageskift, debridering, amputationer).

I HBOT-gruppen, udover standardbehandling, vil HBOT-sessionerne blive udført 5 dage om ugen, i multi-place kammer ved 2,4 atm absolut (ATA) og 100% O2 med effektiv behandling, der varer i 90 min. Sessionerne vil blive overvåget af læger uddannet i hyperbar medicin.

Indvirkningen af ​​kroniske sår og både standard- og kombineret behandling på patientrelaterede resultatmål vil blive evalueret ved at vurdere intensitet og smertekarakteristika, livskvalitet, depression og angst ved hjælp af standardiserede spørgeskemaer. Intensitet og karakteristika af smerte vil blive evalueret ved hjælp af selvevalueringsskalaer til evaluering af smerte: visuel analog skala -VAS (målt mens bandager er in situ, ved bandageskift, under debridering, 30 minutter efter bandageskift eller debridering) og McGill Pain spørgeskema ved tilmelding, efter 2, 4, 6 uger, 3 måneder, 6 måneder, 9 måneder, 12 måneders periode. Spørgeskemaer til evaluering af patientens livskvalitet og overordnede helbredstilstand vil blive udført ved tilmelding, efter 2, 4, 6 uger, 3 måneder, 6 måneder, 9 måneder, 12 måneders periode, herunder: Livskvalitetsindeks for sår (Wound-QoL) og Health Quality of Life Questionnaire (EQ-5D), og spørgeskemaer til evaluering af depression og angst (Beck depression inventory, Beck anxiety inventory) vil blive udført ved tilmelding, efter 6 uger, 3 måneder, 6 måneder, 9 måneder, 12 måneders periode .

Derudover vil mikrobiologiske analyser af podninger/biopsier blive evalueret ved hjælp af standardiserede, rutinemæssige mikrobiologiske, kulturelle og automatiserede procedurer for at bestemme mikrobiel profil, forskelle og mikrobiel resistens. Derudover vil detektion og objektivisering af biofilm blive evalueret ved brug af standardmetoder til biofilmdetektion (vævskulturplademetode, Congo rød agarmetode, rørmetode), konfokal scanning lasermikroskopi (ved hjælp af FilmTracer LIVE/DEAD fluorescensassay og FilmTracer SYPRO Ruby Biofilm Matrix farve, Invitrogen), og på kliniske prøver, ved lysmikroskopi og forskellige farvningsmetoder og -procedurer (Gram-farvning, Giemsa-farve, Krystalviolet-farve, Congo-rød farve, Periodic acid-Schiff-farve, Hematoxylin og eosin-farvning).