Kliniska konsekvenser av biofilm i kroniska sår

Observationell prospektiv klinisk studie kommer att genomföras vid avdelningen för undervattens- och hyperbarmedicin och avdelningen för dermatovenereologi, Clinical Hospital Center Rijeka, Rijeka, Kroatien under 3-årsperioden, från 2021 till 2024. Studien kommer att inkludera alla patienter som behandlas på grund av kroniska sår oavsett såretologi (arteriell, diabetisk, venös, dekubital, kombinerad etiologi, posttraumatisk, postamputation, brännskada och annat), 18 år och äldre, som undertecknat informerat samtycke. Patienterna kommer att behandlas med standardmetoder, d.v.s. förband, debridering, antibiotika och avlastning av bakteriebelastning (kontrollgrupp) och en annan grupp kommer att behandlas ytterligare med HBOT (HBOT-grupp). Exklusionskriterierna för studien är att inte uppfylla ett av inklusionskriterierna. Patienterna med kontraindikationer för HBOT, absolut eller relativ, patienter på bleomycinkemoterapi, med kronisk obstruktiv lungsjukdom, tidigare spontan pneumothorax, kronisk otitis media eller kronisk bihåleinflammation, instabil angina pectoris, svår hjärtsvikt, svår demens, anamnes på anfall, klaustrofobi, eller signifikant makroangiopati med frånvarande både distala pulser och inget positivt svar efter syreprovokationstest på transkutan oximetri som inte kommer att dra nytta av HBOT.

Urvalsstorleken har beräknats utifrån den tillgängliga formeln för att jämföra två oberoende grupper enligt kvalitativa variabler med 95 % konfidensintervall. Den totala urvalsstorleken i båda grupperna uppskattades till 62 patienter (totalt 124 patienter) med ett förväntat genomsnitt på 10-15 % patienter att hoppa av från studien, så den beräknade totala urvalsstorleken i båda grupperna uppskattades till 70 patienter ( 140 patienter totalt). Sårläkningshastighet på 90 % och högre förväntas uppnås i HBOT-gruppen, medan förväntad läkningshastighet i kontrollgruppen förväntas vara minst 20 % lägre efter 1 års uppföljning. På motsvarande sätt förväntas samma skillnader uppnås i kontroll och HBOT-grupp som när det gäller manifestationer av kliniska indikationer på närvaro av biofilm, kliniska och laboratoriemässiga tecken på infektioner.

Patienterna kommer att registreras i studien efter behörighetsscreening, informerat samtycke, insamling av patienthistoria och demografiska data (ålder, kön, civilstånd, barn, utbildningsnivå, yrke, sysselsättning) med särskild betoning på komorbiditeter och riskfaktorer (diabetes mellitus) , fetma, högt blodtryck, kardiovaskulära sjukdomar, perifera artärsjukdomar) fysisk undersökning, klinisk sårbedömning och utvärdering inklusive följande: sårnummer; sårplats; sårstorlek (bredd, längd och djup i cm, och beräknad såryta i cm2 och sårvolym i cm3); sårlängd (dagar); typ av sår (arteriell, diabetiker, venös, dekubital, kombinerad etiologi, annat); sårstatus (stagnerande, försämrad, förbättrad, läkt); kliniska tecken på sårinfektion (värme/värme, erytem, ​​ökat exsudat, purulent exsudat, ökad smärta, missfärgad granulationsvävnad, spröd granulationsvävnad, ödem, dålig lukt i såret, fördröjd läkning, misstänkt biofilm; kliniska indikationer på närvaro av sårbiofilm (överdriven fuktighet) och sårexsudat, låg nivå av erytem, ​​låg nivå av kronisk inflammation, historia av antibiotikasvikt även med lämplig antibiotika- eller antimikrobiell behandling, cykler av återkommande infektion/exacerbation, försenad läkning, motsträviga sår mot antimikrobiell eller antibiotikabehandling); sårbädd status (ungefärliga % av vävnaderna i sårbädden klassade som nekrotisk, sluggig, granulering, misstänkt biofilm, epitelisering); exsudatnivå (nivå, typ); tillstånd av omgivande hud (frisk, macererad, torr/eksematös); fotodokumentation vid inskrivning och vid varje uppföljning enligt protokoll. Ytterligare diagnostiska procedurer kommer att utföras för att bedöma patientens vaskulära status och identifiera den underliggande patofysiologin för såret och sårtypen (pulspalpering, ankel-brachial tryckindex, tåtryck och radiologisk bild, inklusive duplex Doppler ultraljud, magnetisk resonanstomografi ( MRT) och datortomografi (CT), transkutan oximetri), samt laboratorieundersökning, svabbar/biopsier för mikrobiologisk undersökning. Vid inskrivning, rutinmässig laboratorieundersökning (C-reaktivt protein, fullständigt och differentierat blodvärde, seruminterleukin-6 och pro-kalcitoninnivå, fasteblodsocker, glykosylerat hemoglobin, njur- och levertester) och sårprover/biopsi för mikrobiologiska analyser kommer att utföras och upprepas enligt indikation under uppföljningsperioden på grund av kliniskt misstänkta tecken på infektion.

Patienterna i kontrollgrupper kommer att utvärderas vid inskrivning, efter 2, 4, 6 veckor, 3 månader, 6 månader, 9 månader, 12 månaders period, och i HBOT-gruppen efter 10, 20, 30 behandlingar, 3 månader, 6 månader, 9 månader, 12 månader, för klinisk sårbedömning och utvärdering, och för att utvärdera sårläkningshastigheten och -status, utföra sårbedömning, registrera kliniska indikationer på närvaro av biofilm och/eller tecken på infektion, laboratoriefynd, såregenskaper, behov av antibiotika behandling och sjukhusvistelse samt utföra fotodokumentation.

Patienterna i båda grupperna kommer att behandlas rutinmässigt med standardbehandling (förband, debridering, antibiotika och avlastning av bakteriebelastning). Förbandet kommer att utföras enligt såregenskaper med byte varannan dag inklusive primärförband (alginater, hydrofiberförband, antimikrobiellt förband, gelningsfiberförband), med silver om det är infekterat och sekundärt skyddsförband (skum med polyuretan) i sår med bildad granulering vävnad. Sårets utveckling och behovet av specifik behandling kommer att utvärderas och registreras varje vecka av hudläkare och kärlkirurg specialiserade på sårvård, och lämplig behandling utförs enligt sårbedömning (antibiotika, bandage, förbandsbyte, debridering, amputationer).

I HBOT-gruppen, utöver standardbehandling, kommer HBOT-sessionerna att utföras 5 dagar i veckan, i flerplatskammare vid 2,4 atm absolut (ATA) och 100 % O2 med effektiv behandling som varar i 90 minuter. Sessionerna kommer att övervakas av läkare utbildade i hyperbar medicin.

Inverkan av kroniska sår och båda, standard och kombinerad behandling, på patientrelaterade utfallsmått kommer att utvärderas med bedömning av intensitet och smärtegenskaper, livskvalitet, depression och ångest med hjälp av standardiserade frågeformulär. Smärtans intensitet och egenskaper kommer att utvärderas med hjälp av självbedömningsskalor för att utvärdera smärta: visuell analog skala -VAS (mätt medan förband är in situ, vid förbandsbyte, under debridering, 30 minuter efter förbandsbyte eller debridering) och McGill Pain frågeformulär vid inskrivning, efter 2, 4, 6 veckor, 3 månader, 6 månader, 9 månader, 12 månader. Frågeformulär för att utvärdera patientens livskvalitet och övergripande hälsotillstånd kommer att utföras vid inskrivningen, efter 2, 4, 6 veckor, 3 månader, 6 månader, 9 månader, 12 månader inklusive: Livskvalitetsindex för sår (Wound-QoL) och Health Quality of Life Questionnaire (EQ-5D), och frågeformulär för att utvärdera depression och ångest (Beck depression inventory, Beck anxiety inventory) kommer att utföras vid inskrivningen, efter 6 veckor, 3 månader, 6 månader, 9 månader, 12 månader. .

Dessutom kommer mikrobiologiska analyser av svabbar/biopsier att utvärderas med hjälp av standardiserade, rutinmässiga mikrobiologiska, kulturella och automatiserade procedurer, för att fastställa mikrobiell profil, skillnader och mikrobiell resistens. Dessutom kommer detektion och objektivisering av biofilm att utvärderas med hjälp av standardmetoder för biofilmdetektion (vävnadsodlingsplattmetod, Congo rödagarmetoden, tubmetoden), konfokal scanning lasermikroskopi (med FilmTracer LIVE/DEAD fluorescensanalys och FilmTracer SYPRO Ruby Biofilm Matrix färg, Invitrogen), och på kliniska prover, genom ljusmikroskopi och olika färgningsmetoder och procedurer (Gramfärgning, Giemsa-färgning, Kristallviolettfärgning, Kongoröd färg, Periodic acid-Schiff-färgning, Hematoxylin och eosinfärgning).