健康な成人の食後血糖に対するショウガ抽出物の効果とその抗酸化特性

この臨床試験は倫理委員会によって承認されました (2016 年 11 月 23 日のプロセス番号 519)。 すべての参加者は、目的と実験リスク手順の説明の後、書面によるインフォームドコンセントに署名し、その秘密保持が保証されました。 人間を対象とした実験手順はヘルシンキ宣言に従って慎重に行われました。

この盲検（参加者に対する）ランダム化比較臨床試験は、エガス・モニス高等教育学校で、糖尿病でない成人30人を対象に実施されました。 18〜40歳の参加者が選択され、介入グループ（IG）（n=15）と対照グループ（CG）（n=15）にランダムに割り当てられ、参加者は交互にグループに参加しました。 IG は経口ブドウ糖負荷試験 (OGTT) を実施し、その後ショウガ水抽出物を投与し、CG は OGTT 投与のみを実施しました。

ショウガ抽出物の調製のために、粉末ショウガ（Zingibre officinalle Roscoe）をインド原産のポルトガル会社から入手し、必要になるまで現地で乾燥環境に保管した。 この製品のバッチ番号は LI1GIGRNT150012 です。 粉末生姜を個別に秤量し（各回０．２ｇ）、１００ｍＬの沸騰したお湯に加え、１０分間浸出させて生姜抽出物を得る。 ショウガ抽出液は室温に冷却した後、各参加者に配布した。 この方法は、Wilkinson, J.M. (2000) によって採用されました。 化学分析には、事前に取得したショウガ水抽出物を使用しました。

血糖値の評価に関しては、介入前 (絶食) と 30 分、60 分、90 分、および 120 分後に毛細管滴下血液を使用して各参加者の血液サンプルを収集しました。 血糖値分析は、グルコースメーター用ストリップ（Onetouch Select Plus Flex）、滅菌済みランセットおよびグルコースメーター機器を使用して実行されました。

参加者の一般的な特徴データ、すなわち、アンケートを使用して、人体計測データ、薬物治療および病状が収集されました。 さらに、介入前日の 24 時間の食事のリコールを参加者のサンプルに採用しました。 摂取した食事の栄養分析は、フード プロセッサ SQL (バージョン 10.5.0) によって実行されました。

ショウガ水抽出物の総フェノール化合物の測定は、Folin-Ciocalteu 法に従って測定しました。 総フェノールの結果は、ショウガ抽出物 1L あたりの没食子酸当量 (GAE) mg として表されました。 125μLのショウガ抽出物および2mLの炭酸ナトリウムを2.5mLのFolin-Ciocalteu試薬に添加した。 15分後、765nmで吸光度を測定した。 ショウガ水抽出物のフラボノイド化合物の測定は、Prabha 法に従って測定されました。 フラボノイドの結果は、ショウガ抽出物 1L 当たりのケルセチン当量 (GAE) mg として表されました。 体積２ｍＬのショウガ抽出物を、０．１ｍＬの無水塩化アルミニウム溶液（１０％）、０．１ｍＬの酢酸カリウム（１Ｍ）および２．８ｍＬの蒸留水に添加した。 30分後、415nmで吸光度を測定した。

抗酸化活性はさまざまなアッセイで測定されました。

スーパーオキシドアニオンラジカル消去活性は、Morais らの方法に基づいて測定されました。 スーパーオキシドアニオンは、フェナジン メト硫酸 (PMS)、ニコチンアミドアデニン ジヌクレオチド ヒドリド (NADH)、およびフォルマザンで NBT の還元を引き起こす酸素の反応によって生成されました。 ０．５ｍＬのサンプルを、Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ（４０ｍＭ、ｐＨ＝８）を含むＮＡＤＨ（１８９μＭ）およびＮＢＴ（１２０μＭ）を含む溶液０．５ｍＬに加えた。 ０．５ｍＬのＰＭＳ（６０μＭ）の添加後に反応が開始した。 対照サンプルは蒸留水のみを使用して測定されました。 5分間のインキュベーション後、対照の吸光度を室温で560 nmで測定しました。

一酸化窒素阻害活性は、Khayamiらの方法に従って測定した。 10nmのニトロプルシドナトリウム1mLを250μLの脱リン酸緩衝食塩水（PBS）と250μLの試験溶液に加え、振盪した。 前の溶液を 25℃で 150 分間インキュベートし、その後 3 mL のスルファニル酸と 0.33% の氷酢酸を加えました。 室温で5分後、3mLのn-(1-ナフチル)エチレンジアミン二塩酸塩(NED、0.1% m/v)を加え、25℃で30分間インキュベートしました。 吸光度は533nmで測定した。 前述の手順を使用して、水を使用して得られた結果を制御しました。

フリーラジカル 2,2'-アジノ-ビス (3-エチルベンゾチアゾリン-6-スルホン酸) (ABTS) は、Zulueta らの方法に従って、暗所で 140 mM 過硫酸カリウムを用いた 12 時間の ABTS 酸化によって得られました。 10mLのABTS 7nmおよび176μLの過硫酸塩を含む溶液を調製し、暗所で室温で12時間保管した。 前の溶液を、734nmでの吸光度が0.7になるまでエタノールで希釈しました。 2850μLのABTSラジカルを150μLのサンプルと150μLの水に加えました。 暗所で30分後、734nmで吸光度を測定した。 Trolox 濃度は標準として使用しました (mM Trolox/L)。 この試験は、IC50 を計算するために、いくつかの抽出物濃度に対して実行されました。

データ統計分析は、SPSS Statistics (社会科学のための統計パッケージ) (バージョン 22) ソフトウェアを使用して実行されました。 平均値と平均値の標準誤差を使用しました。 Shapiro-Wilk および混合タイプの反復測定 ANOVA が使用されました。 独立したサンプルの T 検定を使用して、総カロリー値、摂取した炭水化物、タンパク質、脂質、Cmax (最大濃度)、ΔCmax (最大濃度の変動)、および AUC (曲線下面積) について 2 つのグループ間の差を評価しました。価値観。 AUC は Software GraphPad Prim (バージョン 7.03) によって計算されました。 すべての統計検定は 5% の有意水準で実行されました。