Effekt av ingefärsextrakt på postprandial glykemi hos friska vuxna och dess antioxidantegenskaper

Denna kliniska prövning godkändes av den etiska kommittén (processnummer 519 den 23 november 2016). Alla deltagare undertecknade ett skriftligt informerat samtycke efter förklaring av syfte och experimentella riskprocedurer och dess skyddade konfidentialitet garanterades. Det experimentella förfarandet som involverade människor sköttes enligt Helsingforsdeklarationen.

Denna blinda (för deltagarna) randomiserade kontrollerade kliniska prövningar genomfördes vid Egas Moniz högre utbildningsskola på 30 icke-diabetiker vuxna. Deltagare i åldrarna 18 till 40 valdes ut och fördelades slumpmässigt i interventionsgrupp (IG) (n=15) och kontrollgrupp (CG) (n=15), där deltagarna var alternerade inklusive i grupperna. IG utförde ett oralt glukostoleranstest (OGTT) följt av administrering av ingefäraextrakt i vatten och CG utförde en OGTT-administrering ensam.

För beredning av ingefärsextrakt erhölls pulver ingefära (Zingibre officinalle Roscoe) från Portugal Company med ursprung i Indien och lagrades i en torkad miljö lokalt tills det behövdes. Produkten har batchnummer LI1GIGRNT150012. Ingefära pulver vägdes individuellt (0,2 g varje dos) och sattes till 100 ml kokt vatten för att erhålla ingefäraextraktet, infundera 10 minuter. Ingefärsextraktlösning kyldes efter rumstemperatur och distribuerades till varje deltagare. Denna metod anpassades av Wilkinson, J.M. (2000). För kemisk analys användes ett vattenhaltigt ingefäraextrakt som tidigare erhållits.

När det gäller bedömning av blodsockernivån togs blodprovet för varje deltagare med hjälp av en kapillärdroppe av blod före interventionen (fasta) och efter 30, 60, 90 och 120 minuter. Blodsockernivåanalysen utfördes med hjälp av en remsa för glukosmätare (Onetouch Select Plus Flex), en steriliserad lansett och en utrustning för glukosmätare.

Allmänna karakteristikdata för deltagarna samlades in, nämligen antropometriska data, farmakologisk behandling och medicinskt tillstånd med hjälp av ett frågeformulär. Dessutom användes en 24-timmars dietåterkallelse dagen innan interventionen för att provdeltagare. Den näringsmässiga analysen av kost som intagits utfördes av Food Processor SQL (version 10.5.0).

Bestämningen av den totala mängden fenolföreningar i det vattenhaltiga ingefärsextraktet bestämdes enligt Folin-Ciocalteu-metoden. De totala fenolresultaten uttrycktes som mg gallussyraekvivalent (GAE)/L ingefärsextrakt. En volym på 125 μL ingefäraextrakt och 2 mL natriumkarbonat sattes till 2,5 mL Folin-Ciocalteu-reagens. Efter 15 minuter mättes absorbansen vid 765 nm. Flavonoidföreningarnas bestämning av det vattenhaltiga ingefärsextraktet bestämdes enligt Prabha-metoden. Flavonoidresultaten uttrycktes som mg quercetinekvivalent (GAE)/L ingefäraextrakt. En volym av 2 ml ingefäraextrakt sattes till 0,1 ml vattenfri lösning av aluminiumklorid (10%), 0,1 ml kaliumacetat (1M) och 2,8 ml destillerat vatten. Efter 30 minuter mättes absorbansen vid 415 nm.

Antioxidantaktiviteten mättes genom olika analyser:

Superoxidanjonradikaler-fångningsaktiviteten bestämdes baserat på Morais et al metod. Superoxidanjon genererades genom att reagera fenazinmetosulfat (PMS), nikotinamidadenindinukleotidhydrid (NADH) och syre som orsakade reducerad NBT i Formazan. En volym av 0,5 mL prov sattes till 0,5 mL av en lösning innehållande NADH (189 mikroM) och NBT (120 mikroM) med Tris-HCl (40 mM, pH = 8). Reaktionen startade efter tillsats av 0,5 ml PMS (60 mikroM). Kontrollprovet mättes med endast destillerat vatten. Efter 5 minuters inkubation mättes kontrollabsorbansen vid 560 nm vid rumstemperatur.

Den kväveoxidinhiberande aktiviteten bestämdes enligt Khayami et al metod. En volym av 1 ml natriumnitroprussid 10 nm sattes till 250 mikroliter fosfatbuffrad saltlösning (PBS) och 250 mikroliter testlösning och den skakades. Den tidigare lösningen inkuberades i 150 minuter vid 25ºC och efter tillsattes 3 ml sulfanilsyra och 0,33 % ättiksyra. Efter 5 minuter vid rumstemperatur tillsattes 3 ml n-(1-naftyl)etylendiamin-dihydroklorid (NED, 0,1% m/v) och inkuberades i 30 minuter vid 25°C. Absorbansen mättes vid 533 nm. Det tidigare förfarandet användes för att kontrollera erhållen med användning av vatten.

Den fria radikalen 2,2'-azino-bis (3-etylbensotiazolin-6-sulfonsyra) (ABTS) erhölls genom ABTS-oxidation med kaliumpersulfat 140 mM under 12 timmar i mörker, enligt Zulueta et al. Den bereddes en lösning med 10 ml ABTS 7 nm och 176 mikroL persulfat och lagring vid rumstemperatur i 12 timmar i mörker. Den tidigare lösningen späddes med etanol till 0,7 absorbans vid 734 nm. En volym av 2850 mikroliter ABTS-radikal sattes till 150 mikroliter prov och till 150 mikroliter vatten. Efter 30 minuter i mörker bestämdes absorbansen vid 734 nm. Trolox-koncentrationen användes som standard (mM Trolox/L). Detta test utfördes för flera extraktkoncentrationer för att beräkna IC50.

Datastatistisk analys utfördes med SPSS Statistics (Statistical Package for Social Sciences) (version 22). Medelvärde och standardfel för medelvärdet användes. Shapiro-Wilk och upprepade åtgärder ANOVA av blandad typ användes. Oberoende prover T-test användes för att bedöma skillnaden mellan de två grupperna för totalt kalorivärde, kolhydrater, protein och lipid intagna, Cmax (maximal koncentration), ΔCmax (variation av maximal koncentration) och AUC (area under kurvan) Inkrementell värden. AUC beräknades med Software GraphPad Prim (version 7.03). Alla statistiska tester utfördes på 5 % signifikansnivå.