Wirkung von Ingwerextrakt auf die postprandiale Glykämie gesunder Erwachsener und seine antioxidativen Eigenschaften

Diese klinische Studie wurde vom Ethikkomitee genehmigt (Prozessnummer 519 vom 23. November 2016). Alle Teilnehmer unterzeichneten eine schriftliche Einverständniserklärung nach Erläuterung des Ziels und der experimentellen Risikoverfahren und deren geschützte Vertraulichkeit wurde gewährleistet. Das experimentelle Verfahren mit Menschen wurde gemäß der Deklaration von Helsinki sorgfältig durchgeführt.

Diese (für die Teilnehmer) blinde, randomisierte, kontrollierte klinische Studie wurde an der Egas Moniz-Hochschule mit 30 nichtdiabetischen Erwachsenen durchgeführt. Teilnehmer im Alter zwischen 18 und 40 Jahren wurden ausgewählt und zufällig in die Interventionsgruppe (IG) (n=15) und die Kontrollgruppe (CG) (n=15) eingeteilt, wobei die Teilnehmer abwechselnd in die Gruppen aufgenommen wurden. Die IG führte einen oralen Glukosetoleranztest (OGTT) durch, gefolgt von der Verabreichung von wässrigem Ingwerextrakt, und die CG führte nur eine OGTT-Verabreichung durch.

Für die Zubereitung des Ingwerextrakts wurde Ingwerpulver (Zingibre officinalle Roscoe) von einem portugiesischen Unternehmen mit Ursprung in Indien bezogen und in einer getrockneten Umgebung vor Ort gelagert, bis es benötigt wird. Das Produkt hat die Chargennummer LI1GIGRNT150012. Ingwerpulver wurde einzeln abgewogen (0,2 g pro Dosis) und zu 100 ml kochendem Wasser gegeben, um den Ingwerextrakt zu erhalten, und 10 Minuten ziehen lassen. Die Ingwerextraktlösung wurde anschließend auf Raumtemperatur abgekühlt und an jeden Teilnehmer verteilt. Diese Methode wurde von Wilkinson, J. M. (2000) angepasst. Für die chemische Analyse wurde ein zuvor gewonnener wässriger Ingwerextrakt verwendet.

Zur Bestimmung des Blutzuckerspiegels wurde für jeden Teilnehmer vor dem Eingriff (Nüchtern) und nach 30, 60, 90 und 120 Minuten eine Blutprobe mithilfe eines Kapillarbluttropfens entnommen. Die Blutzuckerspiegelanalyse wurde mit einem Streifen für ein Glukosemessgerät (Onetouch Select Plus Flex), einer sterilisierten Lanzette und einem Glukosemessgerät durchgeführt.

Mithilfe eines Fragebogens wurden allgemeine Charakteristika der Teilnehmer erfasst, nämlich anthropometrische Daten, pharmakologische Behandlung und Gesundheitszustand. Darüber hinaus wurde am Tag vor der Intervention ein 24-Stunden-Ernährungsrückruf durchgeführt, um die Teilnehmer zu befragen. Die Nährwertanalyse der aufgenommenen Nahrung wurde mit Food Processor SQL (Version 10.5.0) durchgeführt.

Die Bestimmung der gesamten Phenolverbindungen des wässrigen Ingwerextrakts wurde nach der Folin-Ciocalteu-Methode bestimmt. Die gesamten phenolischen Ergebnisse wurden in mg Gallussäureäquivalent (GAE)/L Ingwerextrakt ausgedrückt. Ein Volumen von 125 μl Ingwerextrakt und 2 ml Natriumcarbonat wurden zu 2,5 ml Folin-Ciocalteu-Reagenz gegeben. Nach 15 Minuten wurde die Extinktion bei 765 nm gemessen. Die Bestimmung der Flavonoidverbindungen des wässrigen Ingwerextrakts erfolgte nach der Prabha-Methode. Die Flavonoid-Ergebnisse wurden in mg Quercetin-Äquivalent (GAE)/l Ingwerextrakt ausgedrückt. Ein Volumen von 2 ml Ingwerextrakt wurde zu 0,1 ml wasserfreier Aluminiumchloridlösung (10 %), 0,1 ml Kaliumacetat (1 M) und 2,8 ml destilliertem Wasser gegeben. Nach 30 Minuten wurde die Extinktion bei 415 nm gemessen.

Die antioxidative Aktivität wurde durch verschiedene Tests gemessen:

Die Radikalfängeraktivität für Superoxidanionen wurde auf der Grundlage der Methode von Morais et al. bestimmt. Superoxidanionen wurden durch die Reaktion von Phenazinmethosulfat (PMS), Nicotinamidadenindinukleotidhydrid (NADH) und Sauerstoff erzeugt, was zu reduziertem NBT in Formazan führte. Ein Volumen von 0,5 ml Probe wurde zu 0,5 ml einer Lösung, die NADH (189 MikroM) und NBT (120 MikroM) enthielt, mit Tris-HCl (40 mM, pH = 8) gegeben. Die Reaktion begann nach der Zugabe von 0,5 ml PMS (60 Mikromol). Die Kontrollprobe wurde nur mit destilliertem Wasser gemessen. Nach 5-minütiger Inkubation wurde die Kontrollabsorption bei 560 nm und Raumtemperatur gemessen.

Die Stickoxid-hemmende Aktivität wurde nach der Methode von Khayami et al. bestimmt. Ein Volumen von 1 ml Natriumnitroprussid 10 nm wurde zu 250 Mikroliter phosphatgepufferter Kochsalzlösung (PBS) und 250 Mikroliter Testlösung gegeben und geschüttelt. Die vorherige Lösung wurde 150 Minuten lang bei 25 °C inkubiert und anschließend 3 ml Sulfanilsäure und 0,33 % Eisessig hinzugefügt. Nach 5 Minuten bei Raumtemperatur wurden 3 ml n-(1-Naphthyl)ethylendiamin-dihydrochlorid (NED, 0,1 % m/v) hinzugefügt und 30 Minuten lang bei 25 °C inkubiert. Die Absorption wurde bei 533 nm gemessen. Das vorherige Verfahren wurde zur Kontrolle der unter Verwendung von Wasser erhaltenen Mengen eingesetzt.

Das freie Radikal 2,2'-Azino-bis(3-ethylbenzothiazolin-6-sulfonsäure) (ABTS) wurde durch ABTS-Oxidation mit 140 mM Kaliumpersulfat für 12 Stunden im Dunkeln gemäß der Methode von Zulueta et al. erhalten. Es wurde eine Lösung mit 10 ml ABTS 7 nm und 176 Mikroliter Persulfat hergestellt und 12 Stunden lang bei Raumtemperatur im Dunkeln gelagert. Die vorherige Lösung wurde mit Ethanol verdünnt, bis die Absorption bei 734 nm 0,7 betrug. Ein Volumen von 2850 Mikroliter ABTS-Radikal wurde zu 150 Mikroliter Probe und zu 150 Mikroliter Wasser hinzugefügt. Nach 30 Minuten im Dunkeln wurde die Absorption bei 734 nm bestimmt. Als Standard wurde die Trolox-Konzentration verwendet (mM Trolox/L). Dieser Test wurde für mehrere Extraktkonzentrationen durchgeführt, um den IC50 zu berechnen.

Die statistische Datenanalyse wurde mit der Software SPSS Statistics (Statistical Package for Social Sciences) (Version 22) durchgeführt. Mittelwert und Standardfehler des Mittelwerts wurden verwendet. Es wurden Shapiro-Wilk und ANOVA mit wiederholten Messungen vom gemischten Typ verwendet. Der T-Test mit unabhängigen Proben wurde verwendet, um den Unterschied zwischen den beiden Gruppen hinsichtlich des Gesamtkalorienwerts, der aufgenommenen Kohlenhydrate, Proteine ​​und Lipide, Cmax (maximale Konzentration), ΔCmax (Variation der maximalen Konzentration) und AUC (Fläche unter der Kurve) inkrementell zu bewerten Werte. Die AUC wurde mit der Software GraphPad Prim (Version 7.03) berechnet. Alle statistischen Tests wurden mit einem Signifikanzniveau von 5 % durchgeführt.