Effekt av ingefærekstrakt på postprandial glykemi hos friske voksne og dens antioksidantegenskaper

Denne kliniske studien ble godkjent av den etiske komité (prosessnummer 519 23. november 2016). Alle deltakerne signerte et skriftlig informert samtykke etter forklaring av mål og eksperimentelle risikoprosedyrer, og dets beskyttede konfidensialitet var garantert. Den eksperimentelle prosedyren som involverte mennesker ble behandlet i henhold til Helsinki-erklæringen.

Denne blinde (for deltakerne) randomiserte kontrollerte kliniske studien ble utført ved Egas Moniz høyere utdanningsskole med 30 ikke-diabetiske voksne. Deltakere i alderen mellom 18 og 40 år ble valgt ut og tilfeldig fordelt i intervensjonsgruppe (IG) (n=15) og kontrollgruppe (CG) (n=15), der deltakerne ble vekslet inkludert i gruppene. IG utførte en oral glukosetoleransetest (OGTT) etterfulgt av administrering av vandig ingefærekstrakt, og CG utførte en OGTT-administrasjon alene.

For tilberedning av ingefærekstrakt ble pulver ingefær (Zingibre officinalle Roscoe) hentet fra Portugal Company med India-opprinnelse og lagret i et tørket miljø lokalt inntil nødvendig. Produktet har batchnummeret LI1GIGRNT150012. Ingefærpulver ble individuelt vektet (0,2 g hver dose) og tilsatt til 100 ml kokt vann for å oppnå ingefærekstraktet, tilsatt 10 minutter. Ingefærekstraktløsning ble etter avkjølt ved romtemperatur og distribuert til hver deltaker. Denne metoden ble tilpasset av Wilkinson, J. M. (2000). For kjemisk analyse ble et tidligere oppnådd vandig ingefærekstrakt brukt.

Når det gjelder vurdering av blodsukkernivå, ble blodprøven samlet for hver deltaker ved bruk av en kapillærdråpeblod før intervensjonen (faste) og etter 30, 60, 90 og 120 minutter. Blodsukkernivåanalysen ble utført ved bruk av en strips for glukosemåler (Onetouch Select Plus Flex), en sterilisert lansett og et glukosemålerutstyr.

Generelle karakteristikkdata for deltakerne ble samlet inn, nemlig antropometriske data, farmakologisk behandling og medisinsk tilstand ved hjelp av et spørreskjema. I tillegg ble en 24-timers diett tilbakekalling dagen før intervensjonen brukt til å prøve deltakere. Ernæringsanalysen av inntatt kost ble utført av Food Processor SQL (versjon 10.5.0).

Bestemmelsen av totale fenolforbindelser av det vandige ingefærekstraktet ble bestemt i henhold til Folin-Ciocalteu-metoden. De totale fenoliske resultatene ble uttrykt som mg gallussyreekvivalent (GAE)/L ingefærekstrakt. Et volum på 125 μL ingefærekstrakt og 2 mL natriumkarbonat ble tilsatt 2,5 mL Folin-Ciocalteu-reagens. Etter 15 minutter ble absorbansen målt ved 765 nm. Bestemmelsen av flavonoidforbindelser av det vandige ingefærekstraktet ble bestemt i henhold til Prabha-metoden. Flavonoidresultatene ble uttrykt som mg quercetinekvivalent (GAE)/L ingefærekstrakt. Et volum på 2 ml ingefærekstrakt ble tilsatt 0,1 ml vannfri aluminiumkloridløsning (10%), 0,1 ml kaliumacetat (1M) og 2,8 ml destillert vann. Etter 30 minutter ble absorbansen målt ved 415 nm.

Antioksidantaktiviteten ble målt gjennom forskjellige analyser:

Superoksyd-anionradikaler-renseaktiviteten ble bestemt basert på Morais et al-metoden. Superoksidanion ble generert ved å reagere fenazinmetosulfat (PMS), nikotinamidadenindinukleotidhydrid (NADH) og oksygen som forårsaket redusert NBT i Formazan. Et volum på 0,5 mL prøve ble tilsatt til 0,5 mL av en løsning inneholdende NADH (189 mikroM) og NBT (120 mikroM) med Tris-HCl (40 mM, pH = 8). Reaksjonen startet etter tilsetning av 0,5 ml PMS (60 mikroM). Kontrollprøven ble målt med kun destillert vann. Etter 5 min inkubering ble kontrollabsorbansen målt ved 560 nm ved romtemperatur.

Den nitrogenoksidinhiberende aktiviteten ble bestemt i henhold til Khayami et al-metoden. Et volum på 1 ml natriumnitroprussid 10 nm ble tilsatt til 250 mikrol fosfatbufret saltvann (PBS) og 250 mikroliter testløsning og den ble ristet. Den forrige løsningen ble inkubert i 150 minutter ved 25ºC og tilsett deretter 3 ml sulfanilsyre og 0,33 % iseddik. Etter 5 minutter ved romtemperatur ble det tilsatt 3 ml n-(1-naftyl)etylendiamin-dihydroklorid (NED, 0,1 % m/v) og inkubert i 30 minutter ved 25ºC. Absorbansen ble målt ved 533 nm. Den tidligere fremgangsmåten ble brukt for å kontrollere oppnådd ved bruk av vann.

Det frie radikalet 2,2'-azino-bis (3-etylbenzotiazolin-6-sulfonsyre) (ABTS) ble oppnådd ved ABTS-oksidasjon med kaliumpersulfat 140 mM i 12 timer i mørke, ifølge Zulueta et al-metoden. Det ble fremstilt en løsning med 10mL ABTS 7nm og 176mikroL persulfat og lagring ved romtemperatur i 12 timer i mørke. Den forrige løsningen ble fortynnet med etanol til 0,7 absorbans ved 734 nm. Et volum på 2850 mikroL ABTS-radikal ble tilsatt til 150 mikroL prøve og til 150 mikroL vann. Etter 30 minutter i mørke ble absorbansen bestemt ved 734 nm. Trolox-konsentrasjonen ble brukt som standard (mM Trolox/L). Denne testen ble utført for flere ekstraktkonsentrasjoner for å beregne IC50.

Datastatistisk analyse ble utført ved bruk av SPSS Statistics (Statistical Package for Social Sciences) (versjon 22). Gjennomsnitt og standardfeil for gjennomsnittet ble brukt. Shapiro-Wilk og gjentatte målinger ANOVA av blandet type ble brukt. Uavhengige prøver T-test ble brukt for å vurdere forskjellen mellom de 2 gruppene for total kaloriverdi, karbohydrater, protein og lipid inntatt, Cmax (maksimal konsentrasjon), ΔCmax (variasjon av maksimal konsentrasjon) og AUC (areal under kurven) Inkrementell verdier. AUC ble beregnet av Software GraphPad Prim (versjon 7.03). Alle statistiske tester ble utført på 5 % signifikansnivå.