Efeito do extrato de gengibre na glicemia pós-prandial de adultos saudáveis ​​e suas propriedades antioxidantes

Este ensaio clínico foi aprovado pelo Comitê de Ética (processo número 519 em 23 de novembro de 2016). Todos os participantes assinaram um consentimento informado por escrito após explicação dos objetivos e procedimentos de risco experimentais e sua confidencialidade protegida foi garantida. O procedimento experimental envolvendo humanos foi realizado de acordo com a Declaração de Helsinque.

Este ensaio clínico randomizado controlado cego (para participantes) foi realizado na escola de ensino superior Egas Moniz em 30 adultos não diabéticos. Participantes com idades entre 18 e 40 anos foram selecionados e alocados aleatoriamente em grupo intervenção (GI) (n=15) e grupo controle (GC) (n=15), nos quais os participantes foram alternados entre os grupos. O GI realizou um teste oral de tolerância à glicose (TOTG) seguido da administração de extrato aquoso de gengibre e o GC realizou apenas a administração de OGTT.

Para a preparação do extrato de gengibre, o gengibre em pó (Zingibre officinalle Roscoe) foi obtido de Portugal Company com origem na Índia e armazenado em ambiente seco localmente até ser necessário. O produto tem um número de lote de LI1GIGRNT150012. O gengibre em pó foi pesado individualmente (0,2g cada dose) e adicionado a 100mL de água fervida obtendo-se o extrato de gengibre, em infusão por 10 minutos. A solução de extrato de gengibre foi resfriada à temperatura ambiente e distribuída a cada participante. Este método foi adaptado por Wilkinson, J. M. (2000). Para análise química, foi utilizado extrato aquoso de gengibre previamente obtido.

Em relação à avaliação da glicemia, a amostra de sangue foi coletada de cada participante por meio de gota capilar antes da intervenção (jejum) e após 30, 60, 90 e 120 minutos. A análise da glicemia foi realizada por meio de tiras para medidor de glicose (Onetouch Select Plus Flex), lanceta esterilizada e equipamento medidor de glicose.

Foram recolhidos dados de características gerais dos participantes, nomeadamente, dados antropométricos, tratamento farmacológico e condição médica através de um questionário. Além disso, um recordatório alimentar de 24 horas no dia anterior à intervenção foi empregado para amostrar os participantes. A análise nutricional da dieta ingerida foi realizada pelo Food Processor SQL (versão 10.5.0).

A determinação dos compostos fenólicos totais do extrato aquoso de gengibre foi determinada pelo método de Folin-Ciocalteu. Os resultados fenólicos totais foram expressos em mg equivalente de ácido gálico (GAE)/L de extrato de gengibre. Um volume de 125 μL de extrato de gengibre e 2 mL de carbonato de sódio foram adicionados a 2,5 mL de reagente Folin-Ciocalteu. Após 15 min, a absorbância foi medida a 765 nm. A determinação dos compostos flavonoides do extrato aquoso de gengibre foi determinada de acordo com o método de Prabha. Os resultados dos flavonoides foram expressos em mg de equivalente de quercetina (GAE)/L de extrato de gengibre. Um volume de 2 mL de extrato de gengibre foi adicionado a 0,1 mL de solução anidra de cloreto de alumínio (10%), 0,1 mL de acetato de potássio (1M) e 2,8 mL de água destilada. Após 30 min, a absorbância foi medida a 415 nm.

A atividade antioxidante foi medida através de diferentes ensaios:

A atividade sequestradora de radicais do ânion superóxido foi determinada com base no método de Morais et al. O ânion superóxido foi gerado pela reação de metossulfato de fenazina (PMS), hidreto de dinucleotídeo de nicotinamida adenina (NADH) e oxigênio, causando NBT reduzido em Formazan. Um volume de 0,5mL de amostra foi adicionado a 0,5mL de uma solução contendo NADH (189 microM) e NBT (120 microM) com Tris-HCl (40mM, pH = 8). A reação iniciou após a adição de 0,5mL de PMS (60microM). A amostra de controle foi medida usando apenas água destilada. Após 5 minutos de incubação, a absorbância de controle foi medida a 560 nm à temperatura ambiente.

A atividade inibitória do óxido nítrico foi determinada de acordo com o método de Khayami et al. Um volume de 1mL de nitroprussiato de sódio 10nm foi adicionado a 250microL de solução salina tamponada com fosfato (PBS) e 250microL de solução teste e foi agitado. A solução anterior foi incubada por 150 min a 25ºC e em seguida adicionar 3mL de ácido sulfanílico e 0,33% de ácido acético glacial. Após 5 min em temperatura ambiente, adicionou-se 3mL de dicloridrato de n-(1-naftil)etilenodiamina (NED, 0,1% m/v) e incubou-se por 30 min a 25ºC. A absorvância foi medida a 533 nm. O procedimento anterior foi empregado para o controle obtido com água.

O radical livre 2,2'-azino-bis (ácido 3-etilbenzotiazolina-6-sulfônico) (ABTS) foi obtido pela oxidação do ABTS com persulfato de potássio 140mM por 12h no escuro, segundo método de Zulueta et al. Foi preparada uma solução com 10mL de ABTS 7nm e 176microL de persulfato e armazenamento em temperatura ambiente por 12h no escuro. A solução anterior foi diluída com etanol até a absorbância de 0,7 a 734nm. Um volume de 2850microL de radical ABTS foi adicionado a 150microL de amostra e a 150microL de água. Após 30 minutos no escuro, a absorbância foi determinada a 734 nm. A concentração de Trolox foi usada como padrão (mM Trolox/L). Este teste foi realizado para várias concentrações de extrato para calcular o IC50.

A análise estatística dos dados foi realizada com o software SPSS Statistics (Statistical Package for the Social Sciences) (versão 22). Foram utilizados a média e o erro padrão da média. Shapiro-Wilk e ANOVA de medidas repetidas do tipo misto foram usadas. O teste T de amostras independentes foi usado para avaliar a diferença entre os 2 grupos para valor calórico total, carboidratos, proteínas e lipídios ingeridos, Cmax (concentração máxima), ΔCmax (variação da concentração máxima) e AUC (área sob a curva). valores. A AUC foi calculada pelo Software GraphPad Prim (versão 7.03). Todos os testes estatísticos foram realizados com nível de significância de 5%.