A gyömbér kivonat hatása egészséges felnőttek étkezés utáni glikémiájára és antioxidáns tulajdonságai

Ezt a klinikai vizsgálatot az Etikai Bizottság hagyta jóvá (folyamatszám: 519, 2016. november 23-án). Valamennyi résztvevő írásos beleegyező nyilatkozatot írt alá a cél és a kísérleti kockázati eljárások ismertetése után, és annak védett titkossága garantált volt. Az emberrel végzett kísérleti eljárás a Helsinki Deklaráció szerint történt.

Ezt a vak (a résztvevők számára) randomizált, kontrollált klinikai vizsgálatot az Egas Moniz felsőoktatási iskolában végezték 30 nem cukorbeteg felnőtt bevonásával. A 18 és 40 év közötti résztvevőket véletlenszerűen választottuk ki az intervenciós csoportba (IG) (n=15) és a kontrollcsoportba (CG) (n=15), ahol a résztvevőket felváltva helyezték el a csoportokban. Az IG orális glükóz tolerancia tesztet (OGTT) végzett, amelyet vizes gyömbérkivonat beadása követett, a CG pedig önmagában végzett OGTT beadást.

A gyömbérkivonat elkészítéséhez a gyömbérport (Zingibre officinalle Roscoe) az indiai származású Portugal Company-tól szereztük be, és szükségig szárított környezetben tároltuk. A termék tételszáma LI1GIGRNT150012. A gyömbérport egyenként súlyozzuk (0,2 g adagonként), és 100 ml forralt vízhez adjuk, így megkapjuk a gyömbérkivonatot, 10 percig infundálva. A gyömbérkivonat oldatát szobahőmérsékletre hűtöttük, és minden résztvevőnek kiosztottuk. Ezt a módszert Wilkinson, J. M. (2000) adaptálta. A kémiai analízishez korábban kapott vizes gyömbérkivonatot használtunk.

A vércukorszint mérését illetően a beavatkozás előtt (éhgyomorra) és 30, 60, 90 és 120 perc elteltével minden résztvevőtől kapilláris csepp vért vettünk. A vércukorszint elemzést glükózmérő csíkkal (Onetouch Select Plus Flex), sterilizált lándzsával és glükózmérő berendezéssel végeztük.

Kérdőív segítségével gyűjtöttem össze a résztvevők általános jellemzőit, nevezetesen az antropometriai adatokat, a gyógyszeres kezelést és az egészségi állapotot. Ezenkívül a beavatkozás előtti napon 24 órás étrend-visszahívást alkalmaztak a résztvevők mintájára. Az elfogyasztott étrend táplálkozási elemzését Food Processor SQL (10.5.0-s verzió) segítségével végeztük.

A vizes gyömbérkivonat összes fenolos vegyületének meghatározását Folin-Ciocalteu módszerrel végeztük. Az összes fenolos eredményt mg galluszsav-ekvivalensben (GAE)/l gyömbérkivonatban fejeztük ki. 125 μl gyömbérkivonatot és 2 ml nátrium-karbonátot adtunk 2,5 ml Folin-Ciocalteu reagenshez. 15 perc elteltével az abszorbanciát 765 nm-en mértük. A vizes gyömbérkivonat flavonoid vegyületeinek meghatározását Prabha módszerrel végeztük. A flavonoidok eredményeit mg kvercetin egyenértékben (GAE)/l gyömbérkivonatban fejeztük ki. 2 ml gyömbérkivonatot adunk 0,1 ml vízmentes alumínium-klorid-oldathoz (10%), 0,1 ml kálium-acetáthoz (1 M) és 2,8 ml desztillált vízhez. 30 perc elteltével az abszorbanciát 415 nm-en mértük.

Az antioxidáns aktivitást különböző tesztekkel mérték:

A szuperoxid anion gyökfogó aktivitását Morais és munkatársai módszere alapján határoztuk meg. A szuperoxid-aniont fenazin-metoszulfát (PMS), nikotinamid-adenin-dinukleotid-hidrid (NADH) és oxigén reakciójával állítottuk elő, ami csökkentett NBT-t okoz a Formazanban. 0,5 ml mintát adtunk 0,5 ml NADH-t (189 mikroM) és NBT-t (120 mikroM) és Tris-HCl-t (40 mM, pH=8) tartalmazó oldathoz. A reakció 0,5 ml PMS (60 mikroM) hozzáadása után indul el. A kontroll mintát csak desztillált vízzel mértük. 5 perces inkubálás után a kontroll abszorbanciát 560 nm-en mértük szobahőmérsékleten.

A nitrogén-monoxid-gátló aktivitást Khayami és munkatársai módszerével határoztuk meg. 1 ml 10 nm-es nátrium-nitroprusszidot adtunk 250 mikroliter foszfáttal pufferolt sóoldathoz (PBS) és 250 mikroliter tesztoldathoz, és felráztuk. Az előző oldatot 150 percig 25 °C-on inkubáltuk, majd hozzáadtunk 3 ml szulfanilsavat és 0,33%-os jégecetet. 5 perc szobahőmérsékleten tartás után 3 ml n-(1-naftil)-etilén-diamin-dihidrokloridot (NED, 0,1% m/v) adtunk hozzá, és 30 percig 25 °C-on inkubáltuk. Az abszorbanciát 533 nm-en mértük. Az előző eljárást alkalmaztuk a vízzel nyert kontrollra.

A 2,2'-azino-bisz(3-etil-benzotiazolin-6-szulfonsav) (ABTS) szabad gyököt 140 mM kálium-perszulfáttal végzett ABTS oxidációval állítottuk elő sötétben 12 órán át Zulueta és munkatársai módszere szerint. 10 ml ABTS 7 nm-es és 176 mikroliter perszulfáttal oldatot készítettünk, és szobahőmérsékleten 12 órán át sötétben tároltuk. Az előző oldatot etanollal hígítottuk 0,7-es abszorbanciáig 734 nm-en. 2850 mikroliter ABTS-gyököt adtunk 150 mikroliter mintához és 150 mikroliter vízhez. 30 perc sötétben tartózkodás után az abszorbanciát 734 nm-en határoztuk meg. A Trolox koncentrációt standardként alkalmaztuk (mM Trolox/L). Ezt a vizsgálatot több kivonatkoncentrációra is elvégeztük az IC50 kiszámítása céljából.

Az adatok statisztikai elemzését az SPSS Statistics (Statistical Package for Social Sciences) (22-es verzió) szoftverrel végeztük. Az átlagot és az átlag standard hibáját használtuk. Shapiro-Wilk és Repeated Measures ANOVA vegyes típusú vizsgálatokat alkalmaztunk. Független minták T-tesztjét használtuk a két csoport közötti különbség értékelésére a teljes kalóriaérték, a szénhidrátok, a fehérjék és a lipidek, a Cmax (maximális koncentráció), a ΔCmax (a maximális koncentráció változása) és az AUC (görbe alatti terület) tekintetében. értékeket. Az AUC-t a Software GraphPad Prim (7.03-as verzió) számította ki. Minden statisztikai tesztet 5%-os szignifikanciaszinten végeztünk.