Efecto del extracto de jengibre sobre la glucemia posprandial de adultos sanos y sus propiedades antioxidantes

Este ensayo clínico fue aprobado por el Comité Ético (proceso número 519 a 23 de noviembre de 2016). Todos los participantes firmaron un consentimiento informado por escrito después de la explicación de los objetivos y procedimientos de riesgo experimental y se garantizó su confidencialidad protegida. El procedimiento experimental que involucró a humanos se llevó a cabo de acuerdo con la Declaración de Helsinki.

Este ensayo clínico controlado aleatorio ciego (para los participantes) se llevó a cabo en la escuela de educación superior Egas Moniz en 30 adultos no diabéticos. Los participantes con edades entre 18 y 40 años fueron seleccionados y asignados al azar en el grupo de intervención (GI) (n=15) y el grupo control (GC) (n=15), en los que los participantes se alternaron en los grupos. El GI realizó una prueba de tolerancia oral a la glucosa (TTOG) seguida de la administración de extracto acuoso de jengibre y el GC realizó una administración de SOG solo.

Para la preparación del extracto de jengibre, se obtuvo jengibre en polvo (Zingibre officinalle Roscoe) de Portugal Company con origen en la India y se almacenó localmente en un ambiente seco hasta que se necesite. El producto tiene un número de lote de LI1GIGRNT150012. El jengibre en polvo se pesó individualmente (0.2g cada dosis) y se agregó a 100mL de agua hervida obteniendo el extracto de jengibre, infundiendo 10 minutos. La solución de extracto de jengibre se enfrió luego a temperatura ambiente y se distribuyó a cada participante. Este método fue adaptado por Wilkinson, J. M. (2000). Para el análisis químico se utilizó un extracto acuoso de jengibre obtenido previamente.

En cuanto a la evaluación del nivel de glucosa en sangre, se recolectó la muestra de sangre de cada participante mediante una gota capilar de sangre antes de la intervención (ayuno) y después de 30, 60, 90 y 120 minutos. El análisis del nivel de glucosa en sangre se realizó utilizando tiras para glucómetro (Onetouch Select Plus Flex), una lanceta esterilizada y un equipo medidor de glucosa.

Se recogieron datos de las características generales de los participantes, es decir, datos antropométricos, tratamiento farmacológico y condición médica mediante un cuestionario. Además, se empleó un recordatorio dietético de 24 horas el día anterior a la intervención para muestrear a los participantes. El análisis nutricional de la dieta ingerida se realizó mediante Food Processor SQL (versión 10.5.0).

La determinación de compuestos fenólicos totales del extracto acuoso de jengibre se determinó según el método de Folin-Ciocalteu. Los resultados de fenoles totales se expresaron como mg equivalentes de ácido gálico (GAE)/L de extracto de jengibre. A 2,5 mL de reactivo de Folin-Ciocalteu se le añadió un volumen de 125 μL de extracto de jengibre y 2 mL de carbonato de sodio. Después de 15 min se midió la absorbancia a 765 nm. La determinación de compuestos flavonoides del extracto acuoso de jengibre se determinó según el método de Prabha. Los resultados de flavonoides se expresaron como mg de equivalente de quercetina (GAE)/L de extracto de jengibre. Se añadió un volumen de 2 mL de extracto de jengibre a 0,1 mL de solución anhidra de cloruro de aluminio (10%), 0,1 mL de acetato de potasio (1M) y 2,8 mL de agua destilada. Después de 30 min se midió la absorbancia a 415 nm.

La actividad antioxidante se midió a través de diferentes ensayos:

La actividad eliminadora de radicales de anión superóxido se determinó con base en el método de Morais et al. El anión superóxido se generó haciendo reaccionar metosulfato de fenazina (PMS), hidruro de dinucleótido de nicotinamida y adenina (NADH) y oxígeno, lo que provocó una NBT reducida en formazán. Se añadió un volumen de 0,5 mL de muestra a 0,5 mL de una solución que contenía NADH (189 microM) y NBT (120 microM) con Tris-HCl (40 mM, pH = 8). La reacción comenzó después de la adición de 0,5 mL de PMS (60 microM). La muestra de control se midió usando solo agua destilada. Después de 5 min de incubación, se midió la absorbancia de control a 560 nm a temperatura ambiente.

La actividad inhibidora del óxido nítrico se determinó según el método de Khayami et al. Se añadió un volumen de 1 mL de nitroprusiato de sodio 10 nm a 250 microL de solución salina tamponada con fosfato (PBS) y 250 microL de solución de prueba y se agitó. La solución anterior se incubó por 150 min a 25ºC y luego se agregaron 3mL de ácido sulfanílico y 0.33% de ácido acético glacial. Después de 5 min a temperatura ambiente, se añadieron 3mL de diclorhidrato de n-(1-naftil)etilendiamina (NED, 0,1% m/v) y se incubó durante 30 min a 25ºC. La absorbancia se midió a 533 nm. El procedimiento anterior se empleó para el control obtenido con agua.

El radical libre 2,2'-azino-bis (ácido 3-etilbenzotiazolina-6-sulfónico) (ABTS) se obtuvo por oxidación ABTS con persulfato de potasio 140 mM durante 12 h en oscuridad, según el método de Zulueta et al. Se preparó una solución con 10mL de ABTS 7nm y 176microL de persulfato y se almacenó a temperatura ambiente por 12h en oscuridad. La solución anterior se diluyó con etanol hasta absorbancia 0,7 a 734nm. Se añadió un volumen de 2850 microL de radical ABTS a 150 microL de muestra ya 150 microL de agua. Después de 30 minutos en la oscuridad, se determinó la absorbancia a 734 nm. La concentración de Trolox se utilizó como estándar (mM Trolox/L). Esta prueba se realizó para varias concentraciones de extracto con el fin de calcular IC50.

El análisis estadístico de los datos se realizó con el software SPSS Statistics (Statistical Package for Social Sciences) (versión 22). Se utilizaron la media y el error estándar de la media. Se utilizaron Shapiro-Wilk y ANOVA de medidas repetidas de tipo mixto. Se usó la prueba T de muestras independientes para evaluar la diferencia entre los 2 grupos para el valor calórico total, carbohidratos, proteínas y lípidos ingeridos, Cmax (concentración máxima), ΔCmax (variación de la concentración máxima) y AUC (área bajo la curva) Incremental valores. El AUC se calculó con el software GraphPad Prim (versión 7.03). Todas las pruebas estadísticas se realizaron al 5% de nivel de significación.