精子の表現型と異なるメチル化領域 (Epigenetics)
不妊男性における肛門性器距離、精子表現型およびエピジェネティクス間の関連。
精巣発育不全症候群 (TDS) は、精子のエピジェネティックな異常を引き起こすことが知られています。 肛門性器間距離 (AGD) は、TDS の適切な臨床マーカーであると考えられていますが、AGD とエピジェネティックな異常との間の直接的な関連性はまだ不明です。
次に、AGDが短縮された不妊男性（n = 10）と、AGDが正常な正常な精液ドナーの対照群（n = 10）に、それぞれ1つの精液サンプルを提供するよう求めます。 フローサイトメーターとソーター (FACS) を使用して、精子は、DNA 断片化の有無またはクロマチン脱凝縮の有無にかかわらず、精子の集団に分類されます。 これらの選別された精子集団は、その後、全ゲノム発現解析を使用して、エピジェネティックな刷り込みの違いの違いについて調べられます。 精子の選別はバーゼルで行われますが、エピジェネティック解析はジュネーブ大学で行われます。
調査の概要
詳細な説明
AGD が短縮された 10 人の男性のサブセット (正常な AGD を持つ 10 人の肥沃なドナーの対照群と一緒に) は、最大 3 つの精液サンプルを提供するよう求められます。クロマチン脱凝縮の有無にかかわらず、亜集団に。
断片化された DNA を持つ精子は、YoPro 1 色素を使用して無傷の DNA を持つ精子の FACS ソーティングによって分離されます。これは、精子の核内の DNA 断片化の程度と有意に相関することが示されています。
さらに、異常なクロマチン リモデリングを伴う精子は、DNA のマイナー グルーブへの結合をめぐってプロタミンを競合する蛍光色素クロモマイシン A3 (CMA3) を使用して、凝縮したクロマチンを伴う精子から選別することによって分離され、それによって精子核内のヒストンの持続性と相関します。 . パイロット実験では、CMA3 とアニリン ブルー染色との非常に有意で密接な相関関係が示されています。 アニリン ブルー染色は、精子の固定が必要なため、選別実験には適していません。 CMA3 に基づく選別は、生きた精子で行うことができます。
分類され匿名化されたサンプルは、ドライアイスで凍結され、ジュネーブ大学の研究室に送られ、全ゲノム発現研究を使用して DNA のエピジェネティックな刷り込みの違いが評価されます。
研究の種類
入学 (実際)
連絡先と場所
研究場所
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Basel、スイス、4031
- Christian De Geyter
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参加基準
適格基準
就学可能な年齢
健康ボランティアの受け入れ
サンプリング方法
調査対象母集団
説明
包含基準:
- 肛門性器間距離が既知の不妊男性
除外基準:
- フローサイトメトリーで適切に選別するには、精子濃度が 1,500 万 /ml を超えている必要があります...
研究計画
研究はどのように設計されていますか？
デザインの詳細
- 観測モデル：ケースコントロール
- 時間の展望：見込みのある
コホートと介入
グループ/コホート |
介入・治療 |
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生殖能力の低い男性
AGD が短縮された (< 40 mm) 10 人の不妊男性
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フローサイトメトリーによる精子の選別。
選別後の精子数が不十分な場合（
他の名前：
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肥沃な精液提供者
正常な AGD (>40 mm) の 10 人の受精精液ドナー
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フローサイトメトリーによる精子の選別。
選別後の精子数が不十分な場合（
他の名前：
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この研究は何を測定していますか？
主要な結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
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肛門性器の距離とエピジェネティクス
時間枠：6ヵ月
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選別された精子のゲノムにおける特異的にメチル化された転移性調節配列の数。
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6ヵ月
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二次結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
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精子表現型 1
時間枠：6ヵ月
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従来の精液分析に基づく: 精子の濃度 (ミル/ml)。
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6ヵ月
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精子表現型 2
時間枠：6ヵ月
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従来の精液分析に基づく: 進行性運動性 (%)。
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6ヵ月
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精子表現型 3
時間枠：6ヵ月
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従来の精液分析に基づく: 正常な形態 (%)、染色)。
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6ヵ月
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精子の表現型 4
時間枠：6ヵ月
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クロマチン脱凝縮 (CMA3 染色の % で指定)。
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6ヵ月
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精子表現型 5
時間枠：6ヵ月
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DNA の断片化 (YoPro 1 染色の %)。
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6ヵ月
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協力者と研究者
研究記録日
主要日程の研究
研究開始 (実際)
一次修了 (実際)
研究の完了 (実際)
試験登録日
最初に提出
QC基準を満たした最初の提出物
最初の投稿 (実際)
学習記録の更新
投稿された最後の更新 (実際)
QC基準を満たした最後の更新が送信されました
最終確認日
詳しくは
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