Sperma fenotype en differentieel gemethyleerde regio's (Epigenetics)
Associatie tussen anogenitale afstand, spermafenotype en epigenetica bij onvruchtbare mannen.
Het is bekend dat het testiculaire dysgenesesyndroom (TDS) epigenetische afwijkingen in spermatozoa veroorzaakt. Anogenitale afstand (AGD) wordt beschouwd als een geschikte klinische marker van TDS, maar de directe link tussen AGD en epigenetische afwijkingen ontbreekt nog.
Onvruchtbare mannen (n=10) die zich presenteren met verkorte AGD en een controlegroep van normale spermadonoren (n=10) met normale AGD zullen vervolgens worden gevraagd om elk één spermamonster af te staan. Met behulp van een flowcytometer en sorteerder (FACS) zullen hun spermatozoa worden gesorteerd in populaties van spermatozoa met/zonder DNA-fragmentatie of met/zonder chromatine-decondensatie. Deze gesorteerde populaties spermatozoa zullen vervolgens worden onderzocht op verschillen in epigenetische imprinting-verschillen met behulp van volledige genoom-expressie-analyse. Terwijl het sorteren van spermatozoa zal worden uitgevoerd in Bazel, zal de epigenetische analyse worden uitgevoerd aan de Universiteit van Genève.
Studie Overzicht
Toestand
Conditie
Interventie / Behandeling
Gedetailleerde beschrijving
Een subgroep van 10 mannen met verkorte AGD (samen met een controlegroep van 10 vruchtbare donoren met normale AGD) zal worden gevraagd om maximaal drie spermamonsters te leveren, die vervolgens elk met FACS zullen worden gesorteerd in subpopulaties met/zonder DNA-fragmentatie en in subpopulaties met/zonder chromatinedecondensatie.
Spermatozoa met gefragmenteerd DNA zullen worden gescheiden door FACS-sortering van spermatozoa met intact DNA met behulp van de YoPro 1-kleurstof, waarvan is aangetoond dat deze significant correleert met de mate van DNA-fragmentatie in de kernen van sperma.
Bovendien zullen spermatozoa met abnormale chromatine-remodellering door middel van sortering worden gescheiden van spermatozoa met gecondenseerd chromatine met behulp van het fluorochroomchromomycine A3 (CMA3), dat concurreert om protamine voor binding aan de kleine groef van DNA, waardoor het correleert met de persistentie van histonen in de spermakernen. . Pilotexperimenten hebben de zeer significante en nauwe correlatie van CMA3 met anilinblauwkleuring aangetoond. Anilin-blauwkleuring is niet geschikt voor het sorteerexperiment, omdat het fixatie van de spermatozoa vereist. Sorteren op basis van CMA3 kan worden uitgevoerd met levende spermatozoa.
De gesorteerde en geanonimiseerde monsters worden vervolgens ingevroren in droogijs naar een laboratorium van de Universiteit van Genève gestuurd voor de beoordeling van verschillen in de epigenetische inprenting van het DNA met behulp van volledige genoomexpressiestudies.
Studietype
Inschrijving (Werkelijk)
Contacten en locaties
Studie Locaties
-
-
-
Basel, Zwitserland, 4031
- Christian De Geyter
-
-
Deelname Criteria
Geschiktheidscriteria
Leeftijden die in aanmerking komen voor studie
Accepteert gezonde vrijwilligers
Bemonsteringsmethode
Studie Bevolking
Beschrijving
Inclusiecriteria:
- onvruchtbare mannen met bekende anogenitale afstand
Uitsluitingscriteria:
- De spermaconcentratie moet meer dan 15 miljoen/ml zijn om een juiste sortering met flowcytometrie mogelijk te maken...
Studie plan
Hoe is de studie opgezet?
Ontwerpdetails
- Observatiemodellen: Case-control
- Tijdsperspectieven: Prospectief
Cohorten en interventies
Groep / Cohort |
Interventie / Behandeling |
|---|---|
|
subfertiele mannen
10 onvruchtbare mannen met verkorte AGD (< 40 mm)
|
sorteren van spermatozoa met flowcytometrie.
In aanwezigheid van onvoldoende aantallen spermatozoa na sortering (
Andere namen:
|
|
vruchtbare spermadonoren
10 vruchtbare spermadonoren met normale AGD (>40 mm)
|
sorteren van spermatozoa met flowcytometrie.
In aanwezigheid van onvoldoende aantallen spermatozoa na sortering (
Andere namen:
|
Wat meet het onderzoek?
Primaire uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Maatregel Beschrijving |
Tijdsspanne |
|---|---|---|
|
anogenitale afstand en epigenetica
Tijdsspanne: 6 maanden
|
aantal differentieel gemethyleerde transponeerbare regulerende sequenties in het genoom van gesorteerde spermatozoa.
|
6 maanden
|
Secundaire uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Maatregel Beschrijving |
Tijdsspanne |
|---|---|---|
|
sperma fenotype 1
Tijdsspanne: 6 maanden
|
gebaseerd op conventionele sperma-analyse: concentratie van spermatozoa (in mill/ml).
|
6 maanden
|
|
sperma fenotype 2
Tijdsspanne: 6 maanden
|
op basis van conventioneel sperma-onderzoek: progressieve motiliteit (in %).
|
6 maanden
|
|
sperma fenotype 3
Tijdsspanne: 6 maanden
|
op basis van conventionele spermaanalyse: normale morfologie (in %), kleuring).
|
6 maanden
|
|
sperma fenotype 4
Tijdsspanne: 6 maanden
|
chromatine-decondensatie (zoals gegeven door % CMA3-kleuring).
|
6 maanden
|
|
sperma fenotype 5
Tijdsspanne: 6 maanden
|
DNA-fragmentatie (% van YoPro 1-kleuring).
|
6 maanden
|
Medewerkers en onderzoekers
Sponsor
Medewerkers
Studie record data
Bestudeer belangrijke data
Studie start (Werkelijk)
Primaire voltooiing (Werkelijk)
Studie voltooiing (Werkelijk)
Studieregistratiedata
Eerst ingediend
Eerst ingediend dat voldeed aan de QC-criteria
Eerst geplaatst (Werkelijk)
Updates van studierecords
Laatste update geplaatst (Werkelijk)
Laatste update ingediend die voldeed aan QC-criteria
Laatst geverifieerd
Meer informatie
Termen gerelateerd aan deze studie
Aanvullende relevante MeSH-voorwaarden
Andere studie-ID-nummers
- RME12072017
Plan Individuele Deelnemersgegevens (IPD)
Bent u van plan om gegevens van individuele deelnemers (IPD) te delen?
Informatie over medicijnen en apparaten, studiedocumenten
Bestudeert een door de Amerikaanse FDA gereguleerd geneesmiddel
Bestudeert een door de Amerikaanse FDA gereguleerd apparaatproduct
product vervaardigd in en geëxporteerd uit de V.S.
Deze informatie is zonder wijzigingen rechtstreeks van de website clinicaltrials.gov gehaald. Als u verzoeken heeft om uw onderzoeksgegevens te wijzigen, te verwijderen of bij te werken, neem dan contact op met register@clinicaltrials.gov. Zodra er een wijziging wordt doorgevoerd op clinicaltrials.gov, wordt deze ook automatisch bijgewerkt op onze website .