Фенотип сперматозоидов и дифференциально метилированные области (Epigenetics)
Связь между аногенитальным расстоянием, фенотипом сперматозоидов и эпигенетикой у бесплодных мужчин.
Известно, что синдром тестикулярной дисгенезии (TDS) вызывает эпигенетические аномалии в сперматозоидах. Аногенитальное расстояние (AGD) считается подходящим клиническим маркером TDS, но прямая связь между AGD и эпигенетическими аномалиями до сих пор отсутствует.
Затем бесплодным мужчинам (n = 10) с укороченной АГД и контрольной группе нормальных доноров спермы (n = 10) с нормальной АГД будет предложено предоставить по одному образцу спермы каждому. Используя проточный цитометр и сортировщик (FACS), их сперматозоиды будут сортированы на популяции сперматозоидов с/без фрагментации ДНК или с/без деконденсации хроматина. Затем эти отсортированные популяции сперматозоидов будут исследованы на предмет различий в различиях эпигенетического импринтинга с использованием анализа экспрессии всего генома. В то время как сортировка сперматозоидов будет проводиться в Базеле, эпигенетический анализ будет проводиться в Женевском университете.
Обзор исследования
Статус
Условия
Вмешательство/лечение
Подробное описание
Подгруппе из 10 мужчин с укороченной АГД (вместе с контрольной группой из 10 фертильных доноров с нормальной АГД) будет предложено предоставить до трех образцов спермы, каждый из которых затем будет отсортирован с помощью FACS на субпопуляции с/без фрагментации ДНК и на субпопуляции с/без деконденсации хроматина.
Сперматозоиды с фрагментированной ДНК будут разделены посредством FACS-сортировки сперматозоидов с интактной ДНК с использованием красителя YoPro 1, который, как было показано, значительно коррелирует со степенью фрагментации ДНК в ядрах сперматозоидов.
Кроме того, сперматозоиды с аномальным ремоделированием хроматина будут отделены путем сортировки от сперматозоидов с конденсированным хроматином с использованием флуорохрома хромомицина А3 (СМА3), который конкурирует за протамин за связывание с малой бороздкой ДНК, тем самым коррелируя с сохранением гистонов в ядрах сперматозоидов. . Пилотные эксперименты продемонстрировали очень значимую и тесную корреляцию CMA3 с окрашиванием анилиновым синим. Окрашивание анилиновым синим не подходит для эксперимента по сортировке, так как требует фиксации сперматозоидов. Сортировку на основе CMA3 можно проводить с живыми сперматозоидами.
Затем отсортированные и анонимные образцы будут отправлены в замороженном виде в сухом льду в лабораторию Женевского университета для оценки различий в эпигенетическом импринтинге ДНК с использованием исследований экспрессии всего генома.
Тип исследования
Регистрация (Действительный)
Контакты и местонахождение
Места учебы
-
-
-
Basel, Швейцария, 4031
- Christian De Geyter
-
-
Критерии участия
Критерии приемлемости
Возраст, подходящий для обучения
Принимает здоровых добровольцев
Метод выборки
Исследуемая популяция
Описание
Критерии включения:
- бесплодные мужчины с известным аногенитальным расстоянием
Критерий исключения:
- концентрация сперматозоидов должна быть более 15 миллионов/мл, чтобы можно было провести соответствующую сортировку с помощью проточной цитометрии...
Учебный план
Как устроено исследование?
Детали дизайна
- Наблюдательные модели: Кейс-контроль
- Временные перспективы: Перспективный
Когорты и вмешательства
Группа / когорта |
Вмешательство/лечение |
|---|---|
|
субфертильные мужчины
10 бесплодных мужчин с укороченной ВГД (< 40 мм)
|
сортировка сперматозоидов методом проточной цитометрии.
При наличии недостаточного количества сперматозоидов после сортировки (
Другие имена:
|
|
фертильные доноры спермы
10 фертильных доноров спермы с нормальным АГД (>40 мм)
|
сортировка сперматозоидов методом проточной цитометрии.
При наличии недостаточного количества сперматозоидов после сортировки (
Другие имена:
|
Что измеряет исследование?
Первичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
аногенитальная дистанция и эпигенетика
Временное ограничение: 6 месяцев
|
количество дифференциально метилированных мобильных регуляторных последовательностей в геноме отсортированных сперматозоидов.
|
6 месяцев
|
Вторичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
сперматозоиды фенотип 1
Временное ограничение: 6 месяцев
|
на основе обычного анализа спермы: концентрация сперматозоидов (млн/мл).
|
6 месяцев
|
|
фенотип 2 сперматозоидов
Временное ограничение: 6 месяцев
|
на основе обычного анализа спермы: прогрессивная подвижность (в %).
|
6 месяцев
|
|
фенотип спермы 3
Временное ограничение: 6 месяцев
|
на основании обычного анализа спермы: нормальная морфология (в %), окрашивание).
|
6 месяцев
|
|
фенотип спермы 4
Временное ограничение: 6 месяцев
|
деконденсация хроматина (как указано в % окрашивания CMA3).
|
6 месяцев
|
|
фенотип спермы 5
Временное ограничение: 6 месяцев
|
Фрагментация ДНК (% окрашивания YoPro 1).
|
6 месяцев
|
Соавторы и исследователи
Спонсор
Соавторы
Даты записи исследования
Изучение основных дат
Начало исследования (Действительный)
Первичное завершение (Действительный)
Завершение исследования (Действительный)
Даты регистрации исследования
Первый отправленный
Впервые представлено, что соответствует критериям контроля качества
Первый опубликованный (Действительный)
Обновления учебных записей
Последнее опубликованное обновление (Действительный)
Последнее отправленное обновление, отвечающее критериям контроля качества
Последняя проверка
Дополнительная информация
Термины, связанные с этим исследованием
Дополнительные соответствующие термины MeSH
Другие идентификационные номера исследования
- RME12072017
Планирование данных отдельных участников (IPD)
Планируете делиться данными об отдельных участниках (IPD)?
Информация о лекарствах и устройствах, исследовательские документы
Изучает лекарственный продукт, регулируемый FDA США.
Изучает продукт устройства, регулируемый Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США.
продукт, произведенный в США и экспортированный из США.
Эта информация была получена непосредственно с веб-сайта clinicaltrials.gov без каких-либо изменений. Если у вас есть запросы на изменение, удаление или обновление сведений об исследовании, обращайтесь по адресу register@clinicaltrials.gov. Как только изменение будет реализовано на clinicaltrials.gov, оно будет автоматически обновлено и на нашем веб-сайте. .