Fenotipo espermático y regiones diferencialmente metiladas (Epigenetics)
Asociación entre distancia anogenital, fenotipo espermático y epigenética en hombres infértiles.
Se sabe que el síndrome de disgenesia testicular (TDS) causa anomalías epigenéticas en los espermatozoides. La distancia anogenital (AGD) se considera un marcador clínico adecuado de TDS, pero aún falta el vínculo directo entre AGD y anomalías epigenéticas.
A los hombres infértiles (n=10) que presentan AGD acortada y a un grupo de control de donantes de semen normales (n=10) con AGD normal se les pedirá que proporcionen una muestra de semen a cada uno. Usando un citómetro de flujo y clasificador (FACS), sus espermatozoides se clasificarán en poblaciones de espermatozoides con/sin fragmentación de ADN o con/sin descondensación de cromatina. Estas poblaciones clasificadas de espermatozoides luego se examinarán para detectar diferencias en las diferencias de impronta epigenética utilizando el análisis de expresión del genoma completo. Mientras que la clasificación de los espermatozoides se llevará a cabo en Basilea, el análisis epigenético se realizará en la Universidad de Ginebra.
Descripción general del estudio
Estado
Condiciones
Intervención / Tratamiento
Descripción detallada
Se le pedirá a un subconjunto de 10 hombres con AGD acortada (junto con un grupo de control de 10 donantes fértiles con AGD normal) que proporcionen hasta tres muestras de semen, cada una de las cuales se clasificará con FACS en subpoblaciones con/sin fragmentación de ADN y en subpoblaciones con/sin descondensación de cromatina.
Los espermatozoides con ADN fragmentado se separarán mediante clasificación FACS de espermatozoides con ADN intacto utilizando el tinte YoPro 1, que se ha demostrado que se correlaciona significativamente con el grado de fragmentación del ADN en los núcleos de los espermatozoides.
Además, los espermatozoides con remodelación anormal de la cromatina se separarán de los espermatozoides con cromatina condensada utilizando el fluorocromo cromomicina A3 (CMA3), que compite por la protamina para unirse al surco menor del ADN, lo que se correlaciona con la persistencia de las histonas en los núcleos espermáticos. . Los experimentos piloto han demostrado la estrecha y altamente significativa correlación de CMA3 con la tinción con azul de anilina. La tinción con azul de anilina no es adecuada para el experimento de clasificación, ya que requiere la fijación de los espermatozoides. La clasificación basada en CMA3 se puede realizar con espermatozoides vivos.
Las muestras clasificadas y anonimizadas se enviarán congeladas en hielo seco a un laboratorio de la Universidad de Ginebra para la evaluación de las diferencias en la impresión epigenética del ADN mediante estudios de expresión del genoma completo.
Tipo de estudio
Inscripción (Actual)
Contactos y Ubicaciones
Ubicaciones de estudio
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Basel, Suiza, 4031
- Christian De Geyter
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Criterios de participación
Criterio de elegibilidad
Edades elegibles para estudiar
Acepta Voluntarios Saludables
Método de muestreo
Población de estudio
Descripción
Criterios de inclusión:
- hombres infértiles con distancia anogenital conocida
Criterio de exclusión:
- la concentración de espermatozoides debe ser superior a 15 millones/ml para permitir una clasificación adecuada con citometría de flujo...
Plan de estudios
¿Cómo está diseñado el estudio?
Detalles de diseño
- Modelos observacionales: Control de caso
- Perspectivas temporales: Futuro
Cohortes e Intervenciones
Grupo / Cohorte |
Intervención / Tratamiento |
|---|---|
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hombres subfértiles
10 hombres infértiles con AGD acortada (< 40 mm)
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clasificación de espermatozoides con citometría de flujo.
En presencia de un número insuficiente de espermatozoides después de la clasificación (
Otros nombres:
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donantes de semen fértil
10 donantes de semen fértil con AGD normal (>40 mm)
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clasificación de espermatozoides con citometría de flujo.
En presencia de un número insuficiente de espermatozoides después de la clasificación (
Otros nombres:
|
¿Qué mide el estudio?
Medidas de resultado primarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
|---|---|---|
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distancia anogenital y epigenética
Periodo de tiempo: 6 meses
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número de secuencias reguladoras transponibles diferencialmente metiladas en el genoma de espermatozoides clasificados.
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6 meses
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Medidas de resultado secundarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
|---|---|---|
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espermatozoide fenotipo 1
Periodo de tiempo: 6 meses
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basado en análisis de semen convencional: concentración de espermatozoides (en mill/ml).
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6 meses
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espermatozoide fenotipo 2
Periodo de tiempo: 6 meses
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basado en análisis de semen convencional: motilidad progresiva (en %).
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6 meses
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espermatozoide fenotipo 3
Periodo de tiempo: 6 meses
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basado en análisis de semen convencional: morfología normal (en %), tinción).
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6 meses
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espermatozoide fenotipo 4
Periodo de tiempo: 6 meses
|
descondensación de la cromatina (dada por % de tinción CMA3).
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6 meses
|
|
espermatozoide fenotipo 5
Periodo de tiempo: 6 meses
|
Fragmentación del ADN (% de tinción con YoPro 1).
|
6 meses
|
Colaboradores e Investigadores
Patrocinador
Colaboradores
Fechas de registro del estudio
Fechas importantes del estudio
Inicio del estudio (Actual)
Finalización primaria (Actual)
Finalización del estudio (Actual)
Fechas de registro del estudio
Enviado por primera vez
Primero enviado que cumplió con los criterios de control de calidad
Publicado por primera vez (Actual)
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Última actualización publicada (Actual)
Última actualización enviada que cumplió con los criterios de control de calidad
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Términos relacionados con este estudio
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Otros números de identificación del estudio
- RME12072017
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Estudia un producto farmacéutico regulado por la FDA de EE. UU.
Estudia un producto de dispositivo regulado por la FDA de EE. UU.
producto fabricado y exportado desde los EE. UU.
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