Spermien-Phänotyp und differentiell methylierte Regionen (Epigenetics)
Assoziation zwischen anogenitaler Distanz, Spermien-Phänotyp und Epigenetik bei unfruchtbaren Männern.
Es ist bekannt, dass das testikuläre Dysgenesis-Syndrom (TDS) epigenetische Anomalien in Spermien verursacht. Die anogenitale Distanz (AGD) gilt als geeigneter klinischer Marker für TDS, aber der direkte Zusammenhang zwischen AGD und epigenetischen Anomalien fehlt noch.
Unfruchtbare Männer (n=10) mit verkürzter AGD und eine Kontrollgruppe normaler Samenspender (n=10) mit normaler AGD werden dann gebeten, jeweils eine Samenprobe abzugeben. Unter Verwendung eines Durchflusszytometers und Sortierers (FACS) werden ihre Spermien in Populationen von Spermien mit/ohne DNA-Fragmentierung oder mit/ohne Chromatin-Dekondensation sortiert. Diese sortierten Spermatozoen-Populationen werden dann mithilfe einer Gesamtgenom-Expressionsanalyse auf Unterschiede in der epigenetischen Prägung untersucht. Während die Sortierung der Spermien in Basel durchgeführt wird, erfolgt die epigenetische Analyse an der Universität Genf.
Studienübersicht
Status
Bedingungen
Intervention / Behandlung
Detaillierte Beschreibung
Eine Untergruppe von 10 Männern mit verkürzter AGD (zusammen mit einer Kontrollgruppe von 10 fruchtbaren Spendern mit normaler AGD) wird gebeten, bis zu drei Samenproben abzugeben, von denen jede dann mit FACS in Subpopulationen mit/ohne DNA-Fragmentierung und sortiert wird in Subpopulationen mit/ohne Chromatin-Dekondensation.
Spermien mit fragmentierter DNA werden durch FACS-Sortierung von Spermien mit intakter DNA unter Verwendung des YoPro 1-Farbstoffs getrennt, der nachweislich signifikant mit dem Grad der DNA-Fragmentierung in den Spermienkernen korreliert.
Darüber hinaus werden Spermien mit abnormalem Chromatin-Umbau durch Sortieren von Spermien mit kondensiertem Chromatin unter Verwendung des Fluorochroms Chromomycin A3 (CMA3) getrennt, das um Protamin um die Bindung an die kleine Furche der DNA konkurriert und dadurch mit der Persistenz von Histonen in den Spermienkernen korreliert . Pilotversuche haben die hochsignifikante und enge Korrelation von CMA3 mit Anilinblau-Färbung gezeigt. Eine Anilinblau-Färbung ist für den Sortierversuch nicht geeignet, da sie eine Fixierung der Spermien erfordert. Die Sortierung nach CMA3 kann mit lebenden Spermien durchgeführt werden.
Die sortierten und anonymisierten Proben werden dann gefroren in Trockeneis an ein Labor der Universität Genf geschickt, um Unterschiede in der epigenetischen Prägung der DNA anhand von Studien zur Expression des gesamten Genoms zu untersuchen.
Studientyp
Einschreibung (Tatsächlich)
Kontakte und Standorte
Studienorte
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Basel, Schweiz, 4031
- Christian De Geyter
-
-
Teilnahmekriterien
Zulassungskriterien
Studienberechtigtes Alter
Akzeptiert gesunde Freiwillige
Probenahmeverfahren
Studienpopulation
Beschreibung
Einschlusskriterien:
- unfruchtbare Männer mit bekannter anogenitaler Distanz
Ausschlusskriterien:
- Die Spermienkonzentration muss mehr als 15 Millionen/ml betragen, um eine angemessene Sortierung mit Durchflusszytometrie zu ermöglichen ...
Studienplan
Wie ist die Studie aufgebaut?
Designdetails
- Beobachtungsmodelle: Fallkontrolle
- Zeitperspektiven: Interessent
Kohorten und Interventionen
Gruppe / Kohorte |
Intervention / Behandlung |
|---|---|
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unfruchtbare Männer
10 unfruchtbare Männer mit verkürzter AGD (< 40 mm)
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Sortierung von Spermien mit Durchflusszytometrie.
Bei ungenügender Spermienanzahl nach Sortierung (
Andere Namen:
|
|
fruchtbare Samenspender
10 fruchtbare Samenspender mit normaler AGD (>40 mm)
|
Sortierung von Spermien mit Durchflusszytometrie.
Bei ungenügender Spermienanzahl nach Sortierung (
Andere Namen:
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Was misst die Studie?
Primäre Ergebnismessungen
Ergebnis Maßnahme |
Maßnahmenbeschreibung |
Zeitfenster |
|---|---|---|
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Anogenitale Distanz und Epigenetik
Zeitfenster: 6 Monate
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Anzahl unterschiedlich methylierter transponierbarer regulatorischer Sequenzen im Genom sortierter Spermien.
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6 Monate
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Sekundäre Ergebnismessungen
Ergebnis Maßnahme |
Maßnahmenbeschreibung |
Zeitfenster |
|---|---|---|
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Spermienphänotyp 1
Zeitfenster: 6 Monate
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basierend auf konventioneller Spermienanalyse: Konzentration der Spermien (in m/ml).
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6 Monate
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Spermienphänotyp 2
Zeitfenster: 6 Monate
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basierend auf konventioneller Samenanalyse: progressive Motilität (in %).
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6 Monate
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Spermienphänotyp 3
Zeitfenster: 6 Monate
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basierend auf konventioneller Samenanalyse: normale Morphologie (in %), Färbung).
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6 Monate
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Spermienphänotyp 4
Zeitfenster: 6 Monate
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Chromatin-Dekondensation (als % der CMA3-Färbung angegeben).
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6 Monate
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Spermienphänotyp 5
Zeitfenster: 6 Monate
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DNA-Fragmentierung (% der YoPro 1-Färbung).
|
6 Monate
|
Mitarbeiter und Ermittler
Sponsor
Mitarbeiter
Studienaufzeichnungsdaten
Haupttermine studieren
Studienbeginn (Tatsächlich)
Primärer Abschluss (Tatsächlich)
Studienabschluss (Tatsächlich)
Studienanmeldedaten
Zuerst eingereicht
Zuerst eingereicht, das die QC-Kriterien erfüllt hat
Zuerst gepostet (Tatsächlich)
Studienaufzeichnungsaktualisierungen
Letztes Update gepostet (Tatsächlich)
Letztes eingereichtes Update, das die QC-Kriterien erfüllt
Zuletzt verifiziert
Mehr Informationen
Begriffe im Zusammenhang mit dieser Studie
Zusätzliche relevante MeSH-Bedingungen
Andere Studien-ID-Nummern
- RME12072017
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Arzneimittel- und Geräteinformationen, Studienunterlagen
Studiert ein von der US-amerikanischen FDA reguliertes Arzneimittelprodukt
Studiert ein von der US-amerikanischen FDA reguliertes Geräteprodukt
Produkt, das in den USA hergestellt und aus den USA exportiert wird
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