Sperman fenotyyppi ja eri tavalla metyloidut alueet (Epigenetics)
Anogenitaalisen etäisyyden, siittiöiden fenotyypin ja epigenetiikan välinen yhteys hedelmättömillä miehillä.
Kivesten dysgeneesioireyhtymän (TDS) tiedetään aiheuttavan epigeneettisiä poikkeavuuksia siittiöissä. Anogenitaalisen etäisyyden (AGD) katsotaan olevan sopiva kliininen TDS:n markkeri, mutta suora yhteys AGD:n ja epigeneettisten poikkeavuuksien välillä puuttuu edelleen.
Hedelmättömiä miehiä (n=10), joilla on lyhentynyt AGD, ja kontrolliryhmää normaaleja siemennesteen luovuttajia (n=10), joilla on normaali AGD, pyydetään kullekin toimittamaan yksi siemennestenäyte. Virtaussytometrin ja lajittelijan (FACS) avulla heidän siittiösolunsa lajitellaan siittiöpopulaatioihin DNA-fragmentoinnin kanssa tai ilman tai kromatiinidekondensaatiolla tai ilman. Nämä lajitellut siittiöpopulaatiot tutkitaan sitten erojen suhteen epigeneettisten painaumien eroissa käyttämällä koko genomin ilmentymisanalyysiä. Kun siittiöiden lajittelu suoritetaan Baselissa, epigeneettinen analyysi tehdään Geneven yliopistossa.
Tutkimuksen yleiskatsaus
Tila
Ehdot
Interventio / Hoito
Yksityiskohtainen kuvaus
Kymmenen miehen, joilla on lyhennetty AGD, alaryhmää (yhdessä 10 hedelmällisen luovuttajan kontrolliryhmän kanssa, joilla on normaali AGD) pyydetään toimittamaan enintään kolme siemennestenäytettä, joista kukin lajitellaan sitten FACS:n avulla alapopulaatioihin, joissa on DNA-fragmentoituminen tai ilman sitä. alapopulaatioiksi kromatiinin dekondensaatiolla tai ilman.
Siittiöt, joissa on fragmentoitunut DNA, erotetaan FACS-lajittelulla ehjän DNA:n omaavista siittiöistä käyttämällä YoPro 1 -väriä, jonka on osoitettu korreloivan merkittävästi DNA:n fragmentoitumisasteen kanssa siittiöiden ytimistä.
Lisäksi siittiöt, joissa on epänormaalia kromatiinin uudelleenmuotoilua, erotetaan lajittelemalla siittiöistä kondensoituneella kromatiinilla käyttämällä fluorokromikromomysiini A3:a (CMA3), joka kilpailee protamiinista sitoutumisesta DNA:n pienempään uraan ja korreloi siten histonien pysyvyyden kanssa siittiöytimissä. . Pilottikokeet ovat osoittaneet CMA3:n erittäin merkittävän ja läheisen korrelaation aniliinisinisen värjäytymisen kanssa. Aniliinisininen värjäys ei sovellu lajittelukokeeseen, koska se vaatii siittiöiden kiinnittämistä. CMA3:een perustuva lajittelu voidaan suorittaa elävillä siittiöillä.
Lajitellut ja anonymisoidut näytteet lähetetään sitten pakastettuna kuivajäässä Geneven yliopiston laboratorioon arvioimaan eroja DNA:n epigeneettisessä jäljessä koko genomin ilmentymistutkimuksilla.
Opintotyyppi
Ilmoittautuminen (Todellinen)
Yhteystiedot ja paikat
Opiskelupaikat
-
-
-
Basel, Sveitsi, 4031
- Christian De Geyter
-
-
Osallistumiskriteerit
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Näytteenottomenetelmä
Tutkimusväestö
Kuvaus
Sisällyttämiskriteerit:
- hedelmättömiä miehiä, joilla on tiedossa anogenitaalinen etäisyys
Poissulkemiskriteerit:
- siittiöiden pitoisuuden on oltava yli 15 miljoonaa/ml, jotta se mahdollistaa asianmukaisen lajittelun virtaussytometrialla...
Opintosuunnitelma
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
- Havaintomallit: Case-Control
- Aikanäkymät: Tulevaisuuden
Kohortit ja interventiot
Ryhmä/Kohortti |
Interventio / Hoito |
|---|---|
|
hedelmättömät miehet
10 hedelmätöntä miestä, joilla on lyhentynyt AGD (< 40 mm)
|
siittiöiden lajittelu virtaussytometrialla.
Jos siittiöitä ei ole riittävästi lajittelun jälkeen (
Muut nimet:
|
|
hedelmälliset siemennesteen luovuttajat
10 hedelmällistä siemennesteen luovuttajaa, joilla on normaali AGD (>40 mm)
|
siittiöiden lajittelu virtaussytometrialla.
Jos siittiöitä ei ole riittävästi lajittelun jälkeen (
Muut nimet:
|
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
anogenitaalinen etäisyys ja epigenetiikka
Aikaikkuna: 6 kuukautta
|
differentiaalisesti metyloituneiden transposoituvien säätelysekvenssien lukumäärä lajiteltujen siittiöiden genomissa.
|
6 kuukautta
|
Toissijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
siittiöiden fenotyyppi 1
Aikaikkuna: 6 kuukautta
|
perustuu tavanomaiseen siemennesteanalyysiin: siittiöiden pitoisuus (milj./ml).
|
6 kuukautta
|
|
siittiöiden fenotyyppi 2
Aikaikkuna: 6 kuukautta
|
perustuu tavanomaiseen siemennesteanalyysiin: progressiivinen motiliteetti (%).
|
6 kuukautta
|
|
siittiöiden fenotyyppi 3
Aikaikkuna: 6 kuukautta
|
perustuu tavanomaiseen siemennesteanalyysiin: normaali morfologia (%), värjäys).
|
6 kuukautta
|
|
siittiöiden fenotyyppi 4
Aikaikkuna: 6 kuukautta
|
kromatiinin dekondensaatio (ilmaistuna prosentteina CMA3-värjäytymisestä).
|
6 kuukautta
|
|
siittiöiden fenotyyppi 5
Aikaikkuna: 6 kuukautta
|
DNA:n fragmentoituminen (% YoPro 1 -värjäytymisestä).
|
6 kuukautta
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Sponsori
Yhteistyökumppanit
Opintojen ennätyspäivät
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus (Todellinen)
Ensisijainen valmistuminen (Todellinen)
Opintojen valmistuminen (Todellinen)
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Ensimmäinen Lähetetty (Todellinen)
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (Todellinen)
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Viimeksi vahvistettu
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Muita asiaankuuluvia MeSH-ehtoja
Muut tutkimustunnusnumerot
- RME12072017
Yksittäisten osallistujien tietojen suunnitelma (IPD)
Aiotko jakaa yksittäisten osallistujien tietoja (IPD)?
Lääke- ja laitetiedot, tutkimusasiakirjat
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää lääkevalmistetta
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää laitetuotetta
Yhdysvalloissa valmistettu ja sieltä viety tuote
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .