Spermfenotype og differensielt metylerte regioner (Epigenetics)
Sammenheng mellom anogenital avstand, spermfenotype og epigenetikk hos infertile menn.
Testikkeldysgenesesyndrom (TDS) er kjent for å forårsake epigenetiske abnormiteter i sædceller. Anogenital avstand (AGD) anses å være en passende klinisk markør for TDS, men den direkte koblingen mellom AGD og epigenetiske abnormiteter mangler fortsatt.
Infertile menn (n=10) med forkortet AGD og en kontrollgruppe med normale sæddonorer (n=10) med normal AGD vil da bli bedt om å gi en sædprøve hver. Ved å bruke et flowcytometer og sorterer (FACS) vil spermatozoene deres sorteres i populasjoner av spermatozoer med/uten DNA-fragmentering eller med/uten kromatindekondensering. Disse sorterte populasjonene av sædceller vil deretter bli undersøkt for forskjeller i epigenetiske avtrykksforskjeller ved bruk av hele genomekspresjonsanalyse. Mens sorteringen av sædceller vil bli utført i Basel, vil den epigenetiske analysen bli utført ved Universitetet i Genève.
Studieoversikt
Status
Forhold
Intervensjon / Behandling
Detaljert beskrivelse
En undergruppe på 10 menn med forkortet AGD (sammen med en kontrollgruppe på 10 fertile donorer med normal AGD) vil bli bedt om å gi opptil tre sædprøver, som hver deretter vil bli sortert med FACS i underpopulasjoner med/uten DNA-fragmentering og inn i underpopulasjoner med/uten kromatindekondensering.
Spermatozoer med fragmentert DNA vil bli separert gjennom FACS-sortering av sædceller med intakt DNA ved bruk av YoPro 1-fargestoffet, som har vist seg å korrelere signifikant med graden av DNA-fragmentering i spermkjernene.
I tillegg vil sædceller med unormal kromatinremodellering separeres gjennom sortering fra sædceller med kondensert kromatin ved bruk av fluorokrom-kromomycin A3 (CMA3), som konkurrerer om protamin for å binde seg til den mindre rillen i DNA og dermed korrelere med persistensen av histoner i sperma. . Piloteksperimenter har vist den svært signifikante og nære korrelasjonen mellom CMA3 og anilinblåttfarging. Anilinblåfarging er ikke egnet for sorteringseksperimentet, fordi det krever fiksering av sædceller. Sortering basert på CMA3 kan utføres med levende sædceller.
De sorterte og anonymiserte prøvene vil deretter bli sendt frosset i tørris til et laboratorium ved Universitetet i Genève for vurdering av forskjeller i den epigenetiske pregingen av DNA ved bruk av hele genomekspresjonsstudier.
Studietype
Registrering (Faktiske)
Kontakter og plasseringer
Studiesteder
-
-
-
Basel, Sveits, 4031
- Christian De Geyter
-
-
Deltakelseskriterier
Kvalifikasjonskriterier
Alder som er kvalifisert for studier
Tar imot friske frivillige
Prøvetakingsmetode
Studiepopulasjon
Beskrivelse
Inklusjonskriterier:
- infertile menn med kjent anogenital avstand
Ekskluderingskriterier:
- sædkonsentrasjonen må være mer enn 15 millioner/ml for å tillate passende sortering med flowcytometri...
Studieplan
Hvordan er studiet utformet?
Designdetaljer
- Observasjonsmodeller: Case-Control
- Tidsperspektiver: Potensielle
Kohorter og intervensjoner
Gruppe / Kohort |
Intervensjon / Behandling |
|---|---|
|
subfertile menn
10 infertile menn med forkortet AGD (< 40 mm)
|
sortering av spermatozoer med flowcytometri.
I nærvær av utilstrekkelig antall sædceller etter sortering (
Andre navn:
|
|
fertile sædgivere
10 fertile sædgivere med normal AGD (>40 mm)
|
sortering av spermatozoer med flowcytometri.
I nærvær av utilstrekkelig antall sædceller etter sortering (
Andre navn:
|
Hva måler studien?
Primære resultatmål
Resultatmål |
Tiltaksbeskrivelse |
Tidsramme |
|---|---|---|
|
anogenital avstand og epigenetikk
Tidsramme: 6 måneder
|
antall differensielt metylerte transposerbare regulatoriske sekvenser i genomet til sorterte spermatozoer.
|
6 måneder
|
Sekundære resultatmål
Resultatmål |
Tiltaksbeskrivelse |
Tidsramme |
|---|---|---|
|
sperm fenotype 1
Tidsramme: 6 måneder
|
basert på konvensjonell sædanalyse: konsentrasjon av sædceller (i mill/ml).
|
6 måneder
|
|
sperm fenotype 2
Tidsramme: 6 måneder
|
basert på konvensjonell sædanalyse: progressiv motilitet (i %).
|
6 måneder
|
|
sperm fenotype 3
Tidsramme: 6 måneder
|
basert på konvensjonell sædanalyse: normal morfologi (i %), farging).
|
6 måneder
|
|
sperm fenotype 4
Tidsramme: 6 måneder
|
kromatindekondensasjon (som gitt ved % av CMA3-farging).
|
6 måneder
|
|
sperm fenotype 5
Tidsramme: 6 måneder
|
DNA-fragmentering (% av YoPro 1-farging).
|
6 måneder
|
Samarbeidspartnere og etterforskere
Sponsor
Samarbeidspartnere
Studierekorddatoer
Studer hoveddatoer
Studiestart (Faktiske)
Primær fullføring (Faktiske)
Studiet fullført (Faktiske)
Datoer for studieregistrering
Først innsendt
Først innsendt som oppfylte QC-kriteriene
Først lagt ut (Faktiske)
Oppdateringer av studieposter
Sist oppdatering lagt ut (Faktiske)
Siste oppdatering sendt inn som oppfylte QC-kriteriene
Sist bekreftet
Mer informasjon
Begreper knyttet til denne studien
Ytterligere relevante MeSH-vilkår
Andre studie-ID-numre
- RME12072017
Plan for individuelle deltakerdata (IPD)
Planlegger du å dele individuelle deltakerdata (IPD)?
Legemiddel- og utstyrsinformasjon, studiedokumenter
Studerer et amerikansk FDA-regulert medikamentprodukt
Studerer et amerikansk FDA-regulert enhetsprodukt
produkt produsert i og eksportert fra USA
Denne informasjonen ble hentet direkte fra nettstedet clinicaltrials.gov uten noen endringer. Hvis du har noen forespørsler om å endre, fjerne eller oppdatere studiedetaljene dine, vennligst kontakt register@clinicaltrials.gov. Så snart en endring er implementert på clinicaltrials.gov, vil denne også bli oppdatert automatisk på nettstedet vårt. .