変形性関節症（OA）の治療における自己脂肪組織由来ADSCSの臨床効果の評価

変形性関節症 (OA) は、経時的に関節軟骨に影響を与える変性疾患であり、滑膜、軟骨下骨、靭帯、および半月板の変化、ならびに関節包の肥大を伴います。

治療は通常緩和的であり、対症的な方法で痛みを緩和するだけであり、軟骨変性とそれに続く他の関節構造の破壊を止めることができません。 成体間葉系幹細胞 (MSC) および間質血管分画としても知られる脂肪由来間質細胞分画の可能性は、膝関節における軟骨保護効果について最近評価されています。

本研究は、中等度から重度の膝 (ステージ 3 および 4) を有する多数 (140 人の患者) の多血小板血漿とともに酵素処理されていない脂肪由来間質細胞を客観的 MRI 評価および2年間のフォローアップ。

メソッド

選択基準には、50 歳以上の患者で、過去 3 か月間の毎日の痛み、週 1 回以上の鎮痛薬の使用、朝のこわばりが 30 分未満、および WOMAC スコアによって定義される症候性原発性変形性膝関節症の患者が含まれていました。ターゲット膝の75の。 変形性関節症のグレード 3 および 4 の kellergen X 線検査評価尺度は、X 線検査の資格要件の一部でした。 除外基準には、臨床的に重要な全身性疾患を有する個人、および二次性変形性膝関節症または重度の変形性関節症（関節腔幅-JSW 2 mm）の証拠を有する患者が含まれていました。

Western Ontario 大学と McMaster 大学によって開発された WOMAC スコアは、痛み、関節可動性、および身体障害の患者の主観的評価の一般的に使用される指標です。 それぞれ 5、2、17 の質問で、痛み、こわばり、身体機能の 3 つの側面を評価します。 最小スコアは 0 で、最高スコアは 96 です。 各サブスケールの最大スコアは、それぞれ 20、8、または 68 です。

6 分間の歩行距離 (6MWD) を測定するために、内部の廊下に 50 m の距離がマークされ、参加者は 6 分間でできるだけ速く、できるだけ遠くまで歩くように指示されました。 全体の距離が計算され、記録されました。

前述の手順を使用して、患者が X 線源から 1 m の距離に立ち、膝を完全に伸ばした状態で、膝関節の前後方向の X 線写真を撮影しました。 関節腔の幅は、最も狭い点 (最小 JSW) で測定されました。 以前の出版物によると、この傾向は、試験中に 0.50 mm を超える JSW 損失によって示されました。

膝関節の前後のレントゲン写真は、患者が膝を完全に伸ばした状態で X 線源から 1 m 離れて立っている間に、前述の技術を使用して取得されました。 関節腔の最も狭い点で、幅を測定しました (最小 JSW)。 この傾向は、以前の出版物によると、調査中に 0.50 mm を超える JSW 損失によって示されました。

患者は、不快感が耐えられない場合、食後に 90 mg BD を超えない用量でエトリコキシブを服用するように指示されました。 不快感が続く場合は、必要に応じてコデインを 30 mg 服用し、翌日報告するように指示されました。 患者が報告した症状や徴候とは別に、実験室ベースの血液学的および生化学的検査も、耐性および安全性評価の一環として実施されました。

滑液の顕微鏡検査は、ベースライン時と手術の 2 年後に行われ、異常な細胞数をチェックしました。 それらが被験者の日常活動を妨げた程度に応じて、有害事象は孤立性、断続的、または慢性に分類されました. サプリメントと結果の間の因果関係の可能性は、明確/可能性/可能性/評価不可能/なしに分類されました. 幹細胞の研究と治療のための機関委員会は、プロジェクトに承認を与えました。 すべての患者は、十分な情報を受け取った後、試験に参加することに書面で同意しました。

SVF の準備 :

3 mm の吸引カニューレと tumescent 溶液を使用して、各患者の腹部から約 100 ml の脂肪を採取し、滅菌した使い捨ての 250 ml コニカル遠心管に入れました。 脂肪組織をＰＢＳで２回洗浄した後、５分間隔で攪拌しながら１０メガヘルツ、５０Ｗで３０分間超音波によりキャビテーションした。 次いで、ＳＶＦを、懸濁液を４本の５０ｍｌ遠心管に分割し、それらを５００ｇで５分間遠心分離することによってペレットとして抽出した。 残りの酵素を取り除くために、ペレットを通常の生理食塩水で 2 回洗浄した後、PBS に再懸濁しました。 SVF 懸濁液は、100 μm セルストレーナーを使用してろ過した後、500 g で 5 分間回転させました。 余分な液体が捨てられました。 ペレットを通常の生理食塩水で元に戻し、40 μm セルストレーナーに通しました。 細胞の数を数え、それらの活力を評価し、培養し、幹細胞を定義するために、サンプルを収集しました。

PRP の準備: 脂肪組織の末梢血を提供した同じドナーは、多血小板血漿も提供しました。 ACD 溶液 A を 20 ml の末梢血が入った BD 黄色の上部真空チューブに加え、チューブを 800 g で 10 分間遠心分離しました。 血小板ペレットを得るために、血漿画分を収集し、1000 g で 5 分間遠心分離しました。 その後、わずか 3 ml の血漿が残ったので、これを使用して血小板を再懸濁しました。