Evaluación de la eficacia clínica de los ADSCS derivados de tejido adiposo autólogo en el tratamiento de la osteoartritis (OA)

La artrosis (OA) es una enfermedad degenerativa que afecta al cartílago articular a lo largo del tiempo y se acompaña de alteraciones de la membrana sinovial, hueso subcondral, ligamentos y meniscos, así como de hipertrofia de la cápsula articular.

Las terapias suelen ser paliativas y solo alivian el dolor de manera sintomática, sin poder detener la degeneración del cartílago y la posterior ruptura de otras estructuras articulares. Por lo tanto, es crucial que los investigadores aborden el desafío de crear terapias que modifiquen la OA. El potencial de las células madre mesenquimales adultas (MSC) y la fracción de células estromales derivadas de tejido adiposo, también conocida como fracción vascular estromal, se ha evaluado recientemente para determinar la eficacia condroprotectora en las rodillas oa.

El presente estudio se tomó para evaluar la efectividad clínica sin ninguna duda después de la administración de células estromales derivadas de tejido adiposo no procesadas enzimáticamente junto con plasma rico en plaquetas en un gran número (140 pacientes) con rodilla de moderada a grave (estadios 3 y 4) con evaluación objetiva de resonancia magnética y Seguimiento de 2 años.

Métodos

Los criterios de selección incluyeron pacientes de 50 años o más con osteoartritis primaria sintomática de la rodilla que se definió por dolor diario durante los últimos tres meses, uso de analgésicos al menos una vez por semana, menos de 30 minutos de rigidez matutina y una puntuación WOMAC de 75 en la rodilla diana. Los grados 3 y 4 de la escala de clasificación radiográfica de osteoartritis de kellergen formaban parte de los requisitos de calificación radiográficos. Los criterios de exclusión incluyeron personas con enfermedades sistémicas clínicamente significativas y pacientes con evidencia de osteoartritis secundaria de rodilla u osteoartritis severa (ancho del espacio articular-JSW 2 mm).

La puntuación WOMAC, desarrollada por las universidades de Western Ontario y McMaster, es un indicador de uso común de las calificaciones subjetivas de dolor, movilidad articular y deterioro físico de los pacientes. Con 5, 2 y 17 preguntas, respectivamente, evalúa tres dimensiones: dolor, rigidez y función física. Un puntaje mínimo es 0, el puntaje más alto es 96. La puntuación máxima para cada subescala es 20, 8 o 68, según corresponda.

Para medir la distancia de caminata de seis minutos (6MWD), se marcó una distancia de 50 m en un pasillo interno y se instruyó a los participantes para que caminaran lo más lejos y lo más rápido que pudieran durante el transcurso de seis minutos. Se calculó y anotó toda la distancia.

Utilizando los procedimientos descritos anteriormente, se tomaron radiografías anteroposteriores de las articulaciones de la rodilla con pacientes de pie a una distancia de 1 m de la fuente de rayos X, con la rodilla completamente extendida. El ancho del espacio articular se midió en su punto más estrecho (JSW mínimo). De acuerdo con una publicación anterior, esta tendencia fue indicada por una pérdida de JSW de más de 0,50 mm durante la prueba.

Se adquirieron radiografías anteroposteriores de las articulaciones de la rodilla utilizando las técnicas descritas anteriormente mientras los pacientes permanecían a 1 m de distancia de la fuente de rayos X con las rodillas completamente extendidas. En el punto más estrecho del espacio articular, se midió el ancho (JSW mínimo). Esta tendencia fue mostrada por una pérdida de JSW de más de 0,50 mm durante el estudio, de acuerdo con una publicación anterior.

Se indicó a los pacientes que tomaran etoricoxib en una dosis de no más de 90 mg BD después de las comidas si su malestar era intolerable. Se les indicó que tomaran 30 mg de codeína según fuera necesario si persistía el malestar y que informaran al día siguiente. Además de los síntomas o indicaciones que el paciente informó, también se realizaron pruebas hematológicas y bioquímicas de laboratorio como parte de las evaluaciones de tolerancia y seguridad.

Se realizó un examen microscópico del líquido sinovial al inicio del estudio y dos años después de la cirugía para comprobar si había recuentos de células anormales. Según el grado en que interfirieron con las actividades cotidianas del sujeto, los eventos adversos se clasificaron como aislados, intermitentes o crónicos. La posible asociación causal entre el suplemento y el resultado se clasificó como Definitiva/Posible/Probable/No evaluable/Ninguna. El comité institucional de investigación y terapia con células madre dio su visto bueno al proyecto. Todos los pacientes dieron su consentimiento por escrito para participar en el ensayo después de recibir suficiente información.

Preparación SVF:

Con la ayuda de una cánula de aspiración de 3 mm y una solución tumescente, se recogieron aproximadamente 100 ml de grasa del vientre de cada paciente y se colocaron en tubos de centrífuga cónicos desechables estériles de 250 ml. El tejido adiposo se sometió a dos lavados con PBS antes de ser cavitado sónicamente por ultrasonido a 10 megahercios, 50 W durante 30 minutos con intervalos de agitación de 5 minutos. A continuación, se extrajo el SVF como un sedimento dividiendo la suspensión en cuatro tubos de centrífuga de 50 ml y centrifugándolos a 500 g durante cinco minutos. Para eliminar cualquier resto de enzima, el sedimento se lavó dos veces con solución salina normal antes de resuspenderlo en PBS. La suspensión de SVF se centrifugó a 500 g durante 5 min después de filtrarla con un filtro de células de 100 µm. El líquido extra fue arrojado. El sedimento se volvió a juntar con solución salina regular y se pasó a través de un filtro celular de 40 µm. Se recolectaron muestras para contar el número de células, evaluar su vitalidad y cultivar y definir las células madre.

Preparación de PRP: El mismo donante que aportó la sangre periférica del tejido adiposo también aportó el plasma rico en plaquetas. Se añadió la Solución A de ACD a tubos de vacío BD con tapa amarilla con 20 ml de sangre periférica y los tubos se centrifugaron a 800 g durante 10 min. Para obtener un sedimento de plaquetas, se recogió la fracción de plasma y se centrifugó a 1000 g durante 5 min. Después de eso, solo quedaron 3 ml de plasma, que se utilizaron para resuspender las plaquetas.