Evaluering av klinisk effekt av autologt fettvevsavledet ADSCS i behandling av artrose (OA)

Artrose (OA) er en degenerativ sykdom som påvirker leddbrusken over tid og er ledsaget av endringer i synovium, subkondrale bein, leddbånd og menisker, samt hypertrofi av leddkapselen.

Behandlinger er typisk palliative og lindrer bare smerte på en symptomatisk måte, og klarer ikke å stoppe bruskdegenerasjon og påfølgende nedbrytning av andre leddstrukturer. Derfor er det avgjørende for forskere å takle utfordringen med å skape OA-modifiserende terapi. Potensialet til voksne mesenkymale stamceller (MSCs) og fettavledede stromalcellefraksjoner, også kjent som stromal vaskulær fraksjon, har nylig blitt evaluert for kondrobeskyttende effekt i knærne.

Denne studien ble tatt for å evaluere klinisk effektivitet uten tvil etter administrering av ikke-enzymatisk prosesserte fettavledede stromaceller sammen med blodplaterikt plasma i et stort antall (140 pasienter) med moderat til alvorlig kne (stadium 3 og 4) med objektiv MR-vurdering og 2 års oppfølging.

Metoder

Utvelgelseskriteriene inkluderte pasienter 50 år eller eldre med symptomatisk primær slitasjegikt i kneet som ble definert av daglig smerte i de foregående tre månedene, smertestillende bruk minst én gang per uke, mindre enn 30 minutter med morgenstivhet og en WOMAC-score. på 75 i målkneet. Grad 3 og 4 kellergen Radiographic Grading Scale of Osteoarthritis var en del av de radiografiske kvalifiseringskravene. Eksklusjonskriteriene inkluderte individer med klinisk signifikante systemiske sykdommer og pasienter med tegn på sekundær kneartrose eller alvorlig artrose (leddromsbredde-JSW 2 mm).

WOMAC-score, utviklet av Western Ontario og McMaster Universities, er en ofte brukt indikator på pasienters subjektive vurderinger av smerte, leddmobilitet og fysisk svekkelse. Med henholdsvis 5, 2 og 17 spørsmål vurderer den tre dimensjoner: smerte, stivhet og fysisk funksjon. Minste poengsum er 0, høyeste poengsum er 96. Maksimal poengsum for hver underskala er 20, 8 eller 68, tilsvarende.

For å måle seks minutters gangavstand (6MWD) ble det markert en avstand på 50 m i en intern gang, og deltakerne ble bedt om å gå så langt og så raskt de kunne i løpet av seks minutter. Hele avstanden ble regnet ut og notert.

Ved bruk av tidligere beskrevne prosedyrer ble det tatt antero-posterior røntgenbilder av kneleddene med pasienter som sto i en avstand på 1 m fra røntgenkilden, med kneet helt utstrakt. Fugerommets bredde ble målt på det smaleste punktet (minimum JSW). I følge en tidligere publikasjon ble denne trenden indikert av et JSW-tap på mer enn 0,50 mm i løpet av forsøket.

Antero-posterior røntgenbilder av kneleddene ble tatt ved bruk av de tidligere beskrevne teknikkene mens pasientene sto 1 m unna røntgenkilden med knærne helt utstrakt. På fugerommets smaleste punkt ble bredden målt (minimum JSW). Denne tendensen ble vist ved et JSW-tap på mer enn 0,50 mm under studien, i samsvar med en tidligere publikasjon.

Pasientene ble bedt om å ta etorikoksib i en dose på ikke mer enn 90 mg BD etter måltider hvis ubehaget deres var utålelig. De ble bedt om å ta 30 mg kodein etter behov hvis ubehaget vedvarte og rapportere neste dag. Bortsett fra eventuelle symptomer eller indikasjoner som pasienten rapporterte, ble laboratoriebaserte hematologiske og biokjemiske tester også utført som en del av toleranse- og sikkerhetsevalueringene.

En mikroskopisk undersøkelse av leddvæsken ble utført ved baseline og to år etter operasjonen for å sjekke for unormale celletall. I henhold til i hvilken grad de forstyrret forsøkspersonens daglige aktiviteter, ble uønskede hendelser klassifisert som isolerte, periodiske eller kroniske. Den mulige årsakssammenhengen mellom tillegget og utfallet ble kategorisert som Definitiv/Mulig/Sannsynlig/Ikke-vurderbar/Ingen. Institusjonsutvalget for stamcelleforskning og terapi ga sin tilslutning til prosjektet. Alle pasientene ga skriftlig samtykke til å delta i forsøket etter å ha mottatt nok informasjon.

SVF forberedelse:

Ved hjelp av en 3 mm aspirasjonskanyle og tumescerende løsning ble ca. 100 ml fett samlet fra hver pasients mage og lagt i sterile, engangs 250 ml koniske sentrifugerør. Fettvevet gjennomgikk to PBS-vasker før det ble sonisk kavitert ved ultralyd ved 10 mega hertz, 50 W i 30 minutter med 5-minutters intervaller med agitasjon. SVF ble deretter ekstrahert som en pellet ved å dele suspensjonen i fire 50 ml sentrifugerør og sentrifugere dem ved 500 g i fem minutter. For å kvitte seg med gjenværende enzym ble pelleten vasket to ganger med vanlig saltvann før den ble resuspendert i PBS. SVF-suspensjonen ble sentrifugert ved 500 g i 5 minutter etter å ha blitt filtrert ved bruk av en 100 m cellesil. Den ekstra væsken ble dumpet. Pelleten ble satt sammen igjen med vanlig saltvann og ført gjennom en 40 m cellesil. Det ble samlet inn prøver for å telle antall celler, vurdere deres vitalitet, og dyrke og definere stamcellene.

PRP-preparat: Den samme giveren som ga fettvevets perifere blod ga også det blodplaterike plasmaet. ACD-løsning A ble tilsatt til BD-vakuumrør med gul topp med 20 ml perifert blod, og rørene ble sentrifugert ved 800 g i 10 minutter. For å oppnå en blodplatepellet ble plasmafraksjonen samlet og sentrifugert ved 1000 g i 5 minutter. Etter det var det bare 3 ml plasma igjen, som ble brukt til å resuspendere blodplatene.