Évaluation de l'efficacité clinique des ADSCS dérivés du tissu adipeux autologue dans le traitement de l'arthrose (OA)

L'arthrose (OA) est une maladie dégénérative qui affecte le cartilage articulaire au fil du temps et s'accompagne d'altérations de la synoviale, de l'os sous-chondral, des ligaments et des ménisques, ainsi que d'une hypertrophie de la capsule articulaire.

Les thérapies sont généralement palliatives et ne soulagent la douleur que de manière symptomatique, n'arrêtant pas la dégénérescence du cartilage et la dégradation consécutive d'autres structures articulaires. Par conséquent, il est crucial pour les chercheurs de relever le défi de créer des thérapies modifiant l'arthrose. Le potentiel des cellules souches mésenchymateuses adultes (CSM) et de la fraction de cellules stromales dérivées du tissu adipeux, également connue sous le nom de fraction vasculaire stromale, a récemment été évalué pour son efficacité chondroprotectrice dans les genoux arthrosiques.

La présente étude a été prise pour évaluer l'efficacité clinique sans aucun doute après l'administration de cellules stromales dérivées d'adipeux non traitées par voie enzymatique ainsi que de plasma riche en plaquettes en grand nombre (140 patients) ayant un genou modéré à sévère (stade 3 et 4) avec évaluation IRM objective et Suivi de 2 ans.

Méthodes

Les critères de sélection incluaient les patients de 50 ans ou plus atteints d'arthrose primaire symptomatique du genou définie par des douleurs quotidiennes au cours des trois mois précédents, l'utilisation d'analgésiques au moins une fois par semaine, moins de 30 minutes de raideur matinale et un score WOMAC. de 75 dans le genou cible. Les grades 3 et 4 Kellergen Radiographic Grading Scale of Osteoarthritis faisaient partie des exigences de qualification radiographique. Les critères d'exclusion comprenaient les personnes atteintes de maladies systémiques cliniquement significatives et les patients présentant des signes d'arthrose secondaire du genou ou d'arthrose sévère (largeur de l'espace articulaire - JSW 2 mm).

Le score WOMAC, développé par les universités Western Ontario et McMaster, est un indicateur couramment utilisé des évaluations subjectives des patients concernant la douleur, la mobilité articulaire et la déficience physique. Avec respectivement 5, 2 et 17 questions, il évalue trois dimensions : la douleur, la raideur et la fonction physique. Un score minimum est de 0, le score le plus élevé est de 96. Le score maximum pour chaque sous-échelle est de 20, 8 ou 68, selon le cas .

Afin de mesurer la distance de marche de six minutes (6MWD), une distance de 50 m a été marquée dans un couloir interne, et les participants ont été invités à marcher aussi loin et aussi rapidement qu'ils le pouvaient pendant six minutes. Toute la distance a été calculée et notée.

En utilisant les procédures décrites précédemment, des radiographies antéro-postérieures des articulations du genou ont été prises avec des patients debout à une distance de 1 m de la source de rayons X, avec le genou complètement étendu. La largeur de l'espace articulaire a été mesurée à son point le plus étroit (minimal JSW). Selon une publication antérieure, cette tendance était indiquée par une perte de JSW de plus de 0,50 mm au cours de l'essai.

Des radiographies antéro-postérieures des articulations du genou ont été acquises en utilisant les techniques décrites précédemment tandis que les patients se tenaient à 1 m de la source de rayons X avec leurs genoux complètement étendus. Au point le plus étroit de l'espace articulaire, la largeur a été mesurée (minimale JSW). Cette tendance s'est manifestée par une perte de JSW de plus de 0,50 mm au cours de l'étude, conformément à une précédente publication.

Les patients ont été invités à prendre de l'étoricoxib à une dose maximale de 90 mg BD après les repas si leur inconfort était intolérable. On leur a demandé de prendre 30 mg de codéine au besoin si l'inconfort persistait et de se présenter le lendemain. Outre les symptômes ou indications signalés par le patient, des tests hématologiques et biochimiques en laboratoire ont également été effectués dans le cadre des évaluations de tolérance et de sécurité.

Un examen microscopique du liquide synovial a été effectué au départ et deux ans après la chirurgie pour vérifier les numérations cellulaires anormales. Selon le degré d'interférence avec les activités quotidiennes du sujet, les événements indésirables ont été classés comme isolés, intermittents ou chroniques. L'association causale possible entre le supplément et le résultat a été classée comme étant définie/possible/probable/non évaluable/aucune. Le comité institutionnel pour la recherche et la thérapie sur les cellules souches a donné son accord au projet. Tous les patients ont donné leur consentement écrit pour participer à l'essai après avoir reçu suffisamment d'informations.

Préparation SVF :

A l'aide d'une canule d'aspiration de 3 mm et d'une solution tumescente, environ 100 ml de graisse ont été prélevés du ventre de chaque patient et placés dans des tubes à centrifuger coniques stériles jetables de 250 ml. Le tissu adipeux a subi deux lavages au PBS avant d'être soumis à une cavitation sonique par ultrasons à 10 mégahertz, 50 W pendant 30 minutes avec des intervalles d'agitation de 5 minutes. Le SVF a ensuite été extrait sous forme de culot en divisant la suspension dans quatre tubes à centrifuger de 50 ml et en les centrifugant à 500 g pendant cinq minutes. Pour se débarrasser de toute enzyme restante, le culot a été lavé deux fois avec une solution saline ordinaire avant d'être remis en suspension dans du PBS. La suspension de SVF a été centrifugée à 500 g pendant 5 min après avoir été filtrée à l'aide d'un tamis cellulaire de 100 m. Le surplus de liquide a été vidé. Le culot a été reconstitué avec une solution saline ordinaire et passé à travers un tamis cellulaire de 40 m. Des échantillons ont été prélevés afin de compter le nombre de cellules, d'évaluer leur vitalité, de cultiver et de définir les cellules souches.

Préparation du PRP : Le même donneur qui a fourni le sang périphérique du tissu adipeux a également fourni le plasma riche en plaquettes. La solution ACD A a été ajoutée à des tubes à vide à bouchon jaune BD avec 20 ml de sang périphérique, et les tubes ont été centrifugés à 800 g pendant 10 min. Pour obtenir un culot plaquettaire, la fraction plasmatique a été collectée et centrifugée à 1000 g pendant 5 min. Après cela, il ne restait plus que 3 ml de plasma, qui ont été utilisés pour remettre en suspension les plaquettes.