골관절염(OA) 치료에서 자가 지방 조직 유래 ADSCS의 임상적 효능 평가

골관절염(OA)은 시간이 지남에 따라 관절 연골에 영향을 미치고 윤활막, 연골하골, 인대 및 반월판의 변화와 관절낭의 비대를 동반하는 퇴행성 질환입니다.

치료법은 일반적으로 완화적이며 증상적 방식으로만 통증을 완화하므로 연골 퇴화 및 기타 관절 구조의 붕괴를 막지 못합니다. 성체 중간엽 줄기 세포(MSC) 및 간질 혈관 분획으로도 알려진 지방 유래 간질 세포 분획의 가능성은 최근 무릎에서 연골 보호 효능에 대해 평가되고 있습니다.

본 연구는 객관적인 MRI 평가와 함께 중등도에서 중증 무릎(3기 및 4기)을 가진 많은 수(140명의 환자)에서 혈소판 풍부 혈장과 함께 비효소 처리된 지방 유래 간질 세포를 투여한 후 의심의 여지 없이 임상적 유효성을 평가하기 위해 수행되었습니다. 2년 추적.

행동 양식

선정 기준은 지난 3개월 동안 일상적인 통증, 주 1회 이상의 진통제 사용, 조조 강직 30분 미만, WOMAC 점수로 정의되는 증상이 있는 원발성 무릎 골관절염을 가진 50세 이상의 환자를 포함했습니다. 목표 무릎에서 75의. 골관절염의 등급 3 및 4 Kellergen 방사선 사진 등급 척도는 방사선 사진 자격 요건의 일부였습니다. 제외 기준에는 임상적으로 유의한 전신 질환이 있는 개인과 속발성 무릎 골관절염 또는 중증 골관절염(관절 공간 폭-JSW 2mm)의 증거가 있는 환자가 포함되었습니다.

Western Ontario와 McMaster Universities에서 개발한 WOMAC 점수는 통증, 관절 이동성 및 신체 장애에 대한 환자의 주관적 평가를 나타내는 일반적으로 사용되는 지표입니다. 각각 5개, 2개 및 17개의 질문으로 통증, 경직 및 신체 기능의 세 가지 차원을 평가합니다. 최소 점수는 0이고 최고 점수는 96입니다. 각 하위 척도의 최대 점수는 20, 8 또는 68이며 이에 따라 .

6분 도보 거리(6MWD)를 측정하기 위해 내부 복도에 50m 거리를 표시하고 6분 동안 최대한 빨리, 최대한 멀리 걷도록 지시하였다. 전체 거리를 계산하고 기록했습니다.

이전에 설명한 절차를 사용하여 환자가 무릎을 완전히 펴고 X-Ray 소스에서 1m 거리에 서서 무릎 관절의 전후방 방사선 사진을 찍었습니다. 관절 공간 폭은 가장 좁은 지점(최소 JSW)에서 측정되었습니다. 이전 간행물에 따르면 이러한 경향은 시험 기간 동안 0.50mm 이상의 JSW 손실로 표시되었습니다.

무릎 관절의 전후방 방사선 사진은 환자가 무릎을 완전히 펴고 X-Ray 소스에서 1m 떨어져 서 있는 동안 이전에 설명한 기술을 사용하여 획득했습니다. 관절강의 가장 좁은 지점에서 폭을 측정하였다(minimal JSW). 이러한 경향은 이전 간행물에 따라 연구 중에 0.50mm 이상의 JSW 손실로 나타났습니다.

환자들은 불편함을 참을 수 없을 경우 식후에 에토리콕시브를 90mg 이하의 용량으로 복용하도록 지시받았다. 불편함이 지속되면 필요에 따라 코데인 30mg을 복용하고 다음날 보고하도록 지시받았다. 환자가 보고한 증상이나 적응증 외에도 내약성 및 안전성 평가의 일환으로 실험실 기반 혈액학적 및 생화학적 검사도 수행되었습니다.

비정상적인 세포 수를 확인하기 위해 기준선과 수술 후 2년에 윤활액의 현미경 검사를 수행했습니다. 피험자의 일상 활동에 지장을 주는 정도에 따라 부작용을 단독, 간헐, 만성으로 분류하였다. 보충제와 결과 사이의 가능한 인과 관계는 확정/가능/개연성/평가 불가능/없음으로 분류되었습니다. 줄기 세포 연구 및 치료를 위한 기관 위원회는 프로젝트를 승인했습니다. 모든 환자는 충분한 정보를 받은 후 시험 참여에 대한 서면 동의를 제공했습니다.

SVF 준비:

3mm 흡인 캐뉼라와 튜메슨트 용액의 도움으로 각 환자의 배에서 약 100ml의 지방을 채취하여 멸균된 일회용 250ml 원추형 원심분리 튜브에 넣었습니다. 지방 조직은 5분 간격의 교반과 함께 30분 동안 10메가 헤르츠, 50W에서 초음파에 의해 음파 공동화되기 전에 두 번의 PBS 세척을 거쳤습니다. SVF는 현탁액을 4개의 50ml 원심분리 튜브로 나누고 500g에서 5분 동안 원심분리하여 펠릿으로 추출했습니다. 남아있는 효소를 제거하기 위해 펠릿을 일반 식염수로 두 번 세척한 후 PBS에 재현탁했습니다. SVF 현탁액을 100m 셀 스트레이너를 사용하여 여과한 후 500g에서 5분 동안 회전시켰다. 여분의 유체가 버려졌습니다. 펠릿을 일반 식염수와 함께 다시 넣고 40m 셀 스트레이너를 통과했습니다. 세포 수를 세고 활력을 평가하고 줄기 세포를 배양하고 정의하기 위해 샘플을 수집했습니다.

PRP 준비: 지방 조직의 말초 혈액을 제공한 동일한 기증자가 혈소판이 풍부한 혈장도 제공했습니다. ACD Solution A를 BD yellow top 진공관에 20ml의 말초혈액을 넣고 800g에서 10분간 원심분리하였다. 혈소판 펠릿을 얻기 위해 혈장 분획을 수집하고 1000g에서 5분 동안 원심분리하였다. 그 후, 혈소판을 재현탁하는 데 사용된 혈장 3ml만 남았습니다.