急速に進行するアテローム性動脈硬化の個別化されたリスク (RPA)

研究デザイン: 並行群法による継続的なレトロスペクティブおよび前向き研究を開きます。

論文作業では 3 つのコントロール ポイントが定義されました。 2 番目は研究に参加した日でした。 3 つ目は、登録後 12 か月でした。

レトロスペクティブ ポイントは、研究に患者が含まれた日から 2 年間 (2019 年 1 月から 2021 年 1 月までの期間) をカバーし、アテローム性動脈硬化症の出現と進行に影響を与える可能性のある臨床的、機器的、実験室的性質の広範なパラメーターの決定を行いました (文献分析）。 前述の検査は 2 つの時点で実施および評価されました。最初の検査は 2 年間の遡及期間中の最初の前の冠動脈イベントの時点で、2 番目の検査は患者が本研究に含まれた時点で行われました。 202人の患者が2つのグループに分けられました。

研究方法。 研究に組み入れた時点で（1ポイント）、すべての患者は、苦情および臨床状態の評価を伴う一般的な臨床検査、一般的および生化学的血液検査を伴う臨床検査を受け、高感度のレベルを決定するための血清の特別な生化学的検査を含む総コレステロール (GC、mmol/L)、低密度リポタンパク質 (LDL、mmol/L)、高密度リポタンパク質 (HDL、mmol/L)、トリグリセリド (TG、mmol/L);尿検査および機器検査: 心電図検査 (ECG)、心エコー検査 (Echo-CG)、胸部臓器の R 造影、選択的冠動脈造影 標準的な研究方法に加えて、すべての患者の分子遺伝パラメータが決定されます。 標準的な調査方法は、1 年後に繰り返されます (2 ポイント)。

DNA の準備の準備。 血液からのDNA抽出は、フェノール-クロロホルム抽出によって行った。 5 ～ 6 容の緩衝液 A (10 mM Tris-HCl、pH = 7.5; 10 mM NaCl; 3 mM MgCl2) を 1 容の血液サンプルに加え、血塊をホモジナイザーで擦りました。 2500g で 15 分間遠心分離した後、沈殿物をバッファー A で 3 回洗浄し、1 ml のバッファー B (10 mM EDTA; 100 mM NaCl; 50 mM Tris-HCl、pH = 8.5) に再懸濁しました。 ＳＤＳを０．５％、プロテイナーゼＥを２００μｇ／ｍＬになるように添加した後、混合物を５６℃で１２時間インキュベートした。 除タンパクは、フェノール - クロロホルム混合物 (1:1)、水飽和フェノール、フェノール - クロロホルム混合物 (1:1)、およびクロロホルムを用いて順次行った。 ＮａＣｌ溶液を１Ｍおよび１Ｖのイソプロピルアルコールに添加することにより、ＤＮＡを沈殿させた。 その後、溶液を-20℃で1時間冷却した。 エッペンドルフ微量遠心機で１２０００ｇで１５分間遠心分離して得られた沈殿物を７５％エタノールで３回洗浄し、続いて５分間遠心分離した。 12000g を 56 °C で乾燥させた後、DNA 濃度が 0.5 µg/μl になるように脱塩水に溶解しました。 StepOnePlus 機器。 これらは、アテローム性動脈硬化の進行に重要な役割を果たす炎症過程である冠状動脈性心臓病（CHD）とこれらの SNP との関連性を確認した国際全ゲノム関連研究（GWAS）の結果に従って選択されました。

統計分析の方法。 SPSS 22.0 ソフトウェア パッケージは、分子遺伝学的データの統計解析に使用されます。 最初の段階は、心臓特異的マーカーの値が上昇した心筋梗塞患者のグループと、心臓特異的マーカーが正常範囲内にある比較グループで、研究されたSNPの遺伝子型と対立遺伝子の頻度を決定することです。次に、対照群における遺伝子型頻度のハーディ・ワインバーグ平衡への適合性を評価します (カイ二乗基準を使用)。 年齢などの指標のレベルが比較されます。クレアチニンレベル;心筋壊死のバイオマーカーの診断レベル：MBクレアチンキナーゼおよびトロポニン、脂肪酸結合タンパク質（FABP）。ボディ・マス・インデックス;胴囲;血清Cペプチド濃度;入院時および退院時の血糖値;入院時および退院時の血中ヘモグロビン値;入院時の収縮期および拡張期血圧;入院時の心拍数;心エコー検査による左室駆出率の値。血清HCMP濃度;リピドグラム：低密度リポタンパク質（LDL）、高密度リポタンパク質（HDL）、総コレステロール、トリグリセリドの血清濃度。コルモゴロフ-スミルノフ検定によってこれらの特徴の分布の正規性をチェックした後、異なる遺伝子型の保因者の身長、体重、体格指数を実行しました。 特性が正規分布の基準を満たす場合は、単一因子分散分析が使用されます。 2つの遺伝子型クラス間の違いの重要性は、2つの独立したサンプルのt検定を使用してさらにチェックされます。 研究中の形質が正規分布の基準を満たさない場合、異なる遺伝子型の保因者におけるこの形質のレベルの比較は、クラスカル・ウォリス検定を使用して実行されます。 2 つの遺伝子型クラス間の違いの信頼性は、2 つの独立したサンプルのマンホイットニー検定を使用してさらにチェックされます。 SNP とカテゴリ変数に関連する危険因子との関連性は、ピアソンのカイ 2 乗検定を使用して共役表で検定されます。 4 フィールド テーブルの場合、遺伝子型および対立遺伝子頻度によるサンプルの比較では、Fisher の正確な両側基準が使用されます。 特定の対立遺伝子または遺伝子型の疾患転帰/危険因子の存在の相対リスク (OR - オッズ比) は、オッズ比として計算されます。

長期予後に対する臨床的、人口統計学的、機能的、代謝的、炎症性パラメーター、および心筋壊死マーカーの影響は、オッズ比 (0.95 信頼区間) によって評価されます。