甲状腺髄様癌の診断のための電気化学発光法を用いた針洗浄中のカルシトニン

調査的質問 日常診療において、電気化学発光法による針洗浄中のカルシトニンの値はどれくらいであれば、髄様癌が疑われる甲状腺結節を有する患者の髄様癌の診断と局在化を可能にしますか? 主な目的 髄様癌の診断と局在化のための甲状腺結節の穿刺吸引の細針洗浄 (CT ガイド下 FNA) におけるカルシトニンのカットオフ ポイントを決定すること。

予備研究 我々の知る限り、ECL を使用して洗浄液中のカルシトニンのカットオフ点を探す研究は現在発表されていません。 この研究の焦点は、一方では、高カルシトニン血症の他の原因が確定している、持続的な高カルシトニン血症によって髄様癌が疑われる患者、および確実に上昇傾向にある患者にこの方法を使用する際のカットオフポイントを探すことである。外。 私たちのチームは、甲状腺結節患者のアプローチにおいて血清カルシトニンの日常的な測定を行うアルタ・コンプレジダード・フォルモサ病院およびラス・ロマス療養所と共同で取り組んでいます。 サンプルサイズ 50 人の髄様癌患者と 105 人の対照が含まれます。 それぞれの場合において、年齢、性別、および非髄様結節性病変に応じて 2 つの対照が選択されます。

カルシトニンが +/- 2% の精度と 95% の信頼水準で日常的に測定されている研究対象集団の患者における髄様癌の有病率を推定するには、次の式に従って 105 人の患者を研究する必要があります。 : 研究デザイン 観察的症例対照研究 (髄様癌患者と髄様癌のない患者)。 この設計モデルの決定は、甲状腺結節を有する患者集団における髄様癌の有病率が低いためでした。 方法論 以下の研究は、疫学における観察研究の報告の強化（STROBE）ガイドライン（20）およびその他の参考文献（21）を含む観察研究に関する国際勧告に従って実施されます。 場所と期間 この多施設研究は、2018年3月1日から2022年5月31日までに得られた変数を含めてアルゼンチンで実施されます。

調整機関:

• オーストラル大学病院: カヴァロ・アンドレア博士。
• 他の研究センターも参加を呼びかけられています：Sanatorio Las Lomas San Isidro、Hospital Alta Complejidad Formosa。 アンドレア・カヴァッロ博士が 3 つのセンターの主任研究者となります。 患者 穿刺甲状腺結節を有し、添付文書として提示された添付文書に従って血清カルシトニンが測定された患者の前向きデータベースが実行される。

2018年3月1日から2022年5月31日までの18歳以上で、結節性または多結節性甲状腺腫を患っており、手術を受けており、血清カルシトニンが正常または上昇している患者、および/またはRET変異によるCMTが疑われる患者は、以下に従って選択されます。包含基準。 穿刺サンプルが残っていない患者、血清カルシトニンがない患者、手術に紹介されなかった患者、または追跡調査中に紛失した患者は除外される。 この研究は内分泌部門（ピラールのオーストラル大学病院、フォルモサ州のアルタ・コンプレジダード病院、サンイシドロのラス・ロマス療養所の内分泌分野）で実施される。 ケースとコントロールの選択基準

• 症例：上記の包含基準および除外基準を満たし、組織学的に髄様癌と診断された患者。
• 対照：上記の包含基準および除外基準を満たし、組織学的に髄様癌の診断を受けていない患者。 対照群としては、高カルシトニン血症がなく、外科的基準を備えた結節性または多結節性甲状腺腫を有する成人患者を1:2の比率でランダムに選択する。 FNA は、ATA の推奨に従って、カルシトニン用の FNA 洗浄液の残留サンプルを使用して実行されます。 対照群には 100 人の患者のサンプルが含まれると推定されます。

研究変数 主な結果 髄様癌の診断は、診断の基礎として病理学的解剖学サービスを使用する米国病理学者協会のガイドラインに従って定義されます。

データ収集と手順 データは、Excel (Microsoft) の観察記録シートを使用して、患者の医療記録から (データベース作成のために要求された許可に従って) 取得されます。 血清カルシトニン検査: 参加 3 施設で同じ市販の ECLIA 法を使用して CT を測定します。 カルシトニンの測定は、電気化学発光イムノアッセイ (ECLIA) である Elecsys® Calcitonin test (Roche Diagnostics) を備えた Cobas e601 自動分析装置で実施されました。この検査では、特にヒト カルシトニンに対して向けられたルテニウム キレートで標識されたマウス由来のモノクローナル抗体によるサンドイッチ技術を使用します。 メーカーの報告によると、この検査の検出限界は 0.5 pg/ml、参照範囲は女性で最大 9.8 pg/ml、男性で 14.3 pg/ml、測定範囲は 0.5 ～ 200,000 pg/ml です。

血清カルシトニンサンプリングと針洗浄の標準化（3施設）：

超音波による結節の評価：すべての結節は、サイズ、エコー源性、数、辺縁、構造（固形、混合、または嚢胞性）、微小石灰化の存在、および血管分布に関して定期的に分析されます。 米国甲状腺学会 (ATA) の臨床診療ガイドラインに従って、超音波特性に従​​って、結節は良性、非常に低リスク、低リスク、中リスク、および高リスクに分類されます。 細針吸引 (FNA) 結節生検: FNA は、ATA ガイドラインの基準が満たされている限り、各患者に対して実行されます。 髄様癌の疑いがある場合、結節または髄様病巣を探して、0.8 cm を超えるすべての非嚢胞性または海綿状結節に対して FNA が実行されます。 細胞学的分析: 細胞学的研究は、血清の値に基づいて、専門の病理学者によって実行されます。 日常の細針吸引細胞学 (FNAC) 手順: 超音波ガイド下で 23G ゲージの針が使用されます。 塗抹後、洗浄に使用した残りの注射器と針を生理食塩水 0.5 ml で洗い流します。 吸引液はカルシトニン測定を受け（すべての測定は FNA からの残留液体サンプルで行われます）、すぐに処理されます。 血清中の高カルシトニン血症の定義: カルシトニン レベル ≥ 9.8 pg/ml の女性患者およびカルシトニン レベル ≥ 14.3 pg/ml の男性患者。 高カルシトニン血症を確認するには、すべての患者が少なくとも 2 回の血清測定を受けなければなりません (臨床診療ガイドラインで推奨されているように、毎日の臨床診療で日常的に行われます)。 FNA における高カルシトニン血症の定義: カットオフ 以下の変数に注目します: 21pg/ml のレベル (19)

次の変数が検証されます。

1. 収録日
2. セックス
3. 年
4. プレゼンテーション（結節性または多結節性甲状腺腫）
5. 結節の数、位置
6. 甲状腺機能（甲状腺機能低下症、甲状腺機能亢進症、橋本甲状腺炎）
7. 甲状腺結節の説明（エコー源性、辺縁、硬さ、位置、石灰化の有無、大きさ）
8. 甲状腺癌の種類 (分化型、髄様癌、未分化型、およびその変異型)
9. 制酸剤の摂取
10. 腎機能
11. タバコの消費量
12. 肝機能
13. 副甲状腺機能亢進症（潜在性-臨床性、原発性、続発性）
14. 各穿刺結節の FNAC 結果 (ベセスダおよび細胞学的説明)
15. 病理解剖結果
16. TNMとステージ
17. 血清カルシトニン
18. 各穿刺結節の洗浄液中のカルシトニン
19. 生化学的測定: TSH、T4l、抗甲状腺抗体、カルシウム、ビタミンD、PTH、尿素、クレアチニン、クリアランス、ヘパトグラム、血球数、サイログロブリン
20. 最終訪問時の死亡率 解剖病理学的分析：標準化された基準に従って実施され、疑問や矛盾がある場合は、各施設の 3 人の病理学者によって内部で解決されます。 結節/脊髄病変を相関させるために、超音波相関関係（結節の番号付け、細胞学、洗浄液中のカルシトニンおよび組織学を伴う）がすべての患者で実行されます。

考えられるバイアスと交絡変数

• 選択バイアス: 症例と対照の選択におけるこのバイアスを回避するために、被験者は同じ標準治療の下で追跡および治療されます。

  o 症例と対照は、調査研究の研究者によって選択されます (すでに上で定義されています)。

• 生化学的判定の偏りを避けるため、すべての判定は同じ手順と同じブランドの装置を使用して行われます。 統計分析計画 記述分析の場合、連続変数は、観察された分布に応じて、平均と標準偏差、または中央値と四分位範囲 (IQR) として表されます。 連続変数は、独立サンプルのスチューデント検定、一因子分散分析、または正規性の仮定に従わない場合のマンホイットニー検定によって比較されました。 質的変数を比較するには、独立性検定 (カイ二乗) が使用されます。 感度、特異度、NPV、PPV、およびそれぞれの 95% CI を計算するために、臨床的に関連するカットオフ ポイントが選択されます。 すべての場合において、仮説を棄却するために適用される統計検定から 5% 未満の有意水準が使用されます。 サンプルは、高カルシトニン血症のある患者と、対照群を構成する高カルシトニン血症のない患者の 2 つのグループに分けられます。 倫理的側面 プロトコールは、審査と承認のために研究倫理委員会 (REC) または教育研究委員会に送られます。 臨床研究は、世界医師会のヘルシンキ宣言、国際医学機関評議会の生物医学研究に関する国際倫理ガイドライン、およびユネスコの生命倫理と人権に関する宣言に示されている倫理ガイドラインに準拠します。 同様に、それらはアルゼンチン共和国保健省の「人間の臨床研究のための適正な実践ガイド」(Res 1490/2007) に従って管理されます。

研究で収集された情報へのアクセスには、それを保護する倫理的および法的基準（個人データの保護に関する国内法 25326 および個人データの保護に関する法律 1845、CABA、アルゼンチン）によって確立された予防措置が講じられます。 取得されたデータは、取得された目的以外に使用することはできず、研究者は分離メカニズムを通じてデータ所有者の身元を保持します（情報は、科学的理由以外に、特定の個人または個人と関連付けることはできません） 。 決定可能）。

研究から得られたすべてのデータは機密として取り扱われ、REC 参加者からの要求があればモニタリングに利用できます。 研究の進行中に計画書に記載された内容を変更する必要がある場合は、REC に新たな承認を求めます。 REC は研究を積極的に監視し、法律と研究倫理原則の遵守を確保できます。 高カルシトニン血症患者の脊椎病巣を探すために0.8cmを超える小結節に穿刺が行われるため、参加患者に対しては、日常診療に従って医療処置中にすでに得られている以上のインフォームド・コンセントの免除が期待され、さらにデータが収集されるためである。附属書として提示されたデータベース作成の承認要請に従って、患者の医療記録から収集された。

この研究には外部からの資金提供はありません。 機関の選択と参加、データ分析、およびこのプロジェクトのさまざまな段階の結果は、上記の研究チームによって実行されます。 期待される結果 髄様癌の診断のための一般集団の甲状腺結節患者の針洗浄におけるカルシトニン カットオフ ポイントの決定は、臨床的に関連のあるデータです。

結節性病状の患者集団では髄様癌の発生率が低いため、この集団におけるその決定はほとんど研究されていません。それを決定することで、日常の臨床診療における患者の管理を改善できるようになります。 したがって、この結果は世界中の医学にとって非常に重要であると予想されます。 上述したように、髄様癌の診断において、甲状腺結節を有する一般集団における洗浄液中のカルシトニンのカットオフ点を決定した研究は世界の文献に存在しない。 ニードルウォッシュでのカルシトニンの測定は、シンプルで非侵襲的、低コストの方法であり、結果は非常に正確です。そして、カットオフポイントの使用によるその調整は、どの患者が外科的処置から恩恵を受けるか、あるいはそうでないかをガイドする可能性を秘めています。 私たちは、この研究上の疑問は、この多施設共同症例対照研究を通じて解決されると信じています。