CALCITONIN I NÅLEVASK MED ELEKTROKEMIOLUMISCENT METODE TIL DIAGNOSE AF MEDULÆR skjoldbruskkirtelkarcinom

Undersøgelsesspørgsmål I daglig praksis, hvilken værdi af calcitonin i nålevaskning ved elektrokemiluminescerende metode tillader diagnosticering og lokalisering af medullært karcinom hos patienter med skjoldbruskkirtel med mistanke om medullært karcinom? Primært mål At bestemme afskæringspunktet for calcitonin i finnålsvask af punkturaspiration af thyroidea-knuder (CT-guidet FNA) til diagnosticering og lokalisering af medullært karcinom.

Foreløbige undersøgelser Så vidt vi ved, er der i øjeblikket ingen publiceret undersøgelse, der leder efter et afskæringspunkt for calcitonin ved skylning ved hjælp af ECL. Fokus for denne forskning er på den ene side at lede efter et afskæringspunkt ved brug af denne metodologi hos patienter med mistanke om medullært karcinom på grund af vedvarende hypercalcitoninæmi, og på en positiv, stigende måde, hvor andre årsager til hypercalcitoninæmi er blevet fastslået. ud. Vores team arbejder sammen med Hospitalet Alta Complejidad Formosa og Sanatorio Las Lomas, som udfører rutinebestemmelsen af ​​serumcalcitonin i behandlingen af ​​patienter med skjoldbruskkirtelknolder. Prøvestørrelse 50 patienter med marvkarcinom og 105 kontroller vil blive inkluderet. For hvert tilfælde vil der blive udvalgt to kontroller, matchet efter alder, køn og ikke-medullær nodulær patologi.

For at estimere prævalensen af ​​medullært karcinom hos patienter i den undersøgte population, hvor calcitonin rutinemæssigt bestemmes med en nøjagtighed på +/- 2 % og et konfidensniveau på 95 %, er det nødvendigt at undersøge 105 patienter i henhold til formlen : Undersøgelsesdesign Observationel case-kontrol undersøgelse (patienter med medullært karcinom versus patienter uden medullært karcinom). Beslutningen om denne designmodel skyldtes den lave prævalens af medullært karcinom i populationen af ​​patienter med skjoldbruskkirtelknolder. Metode Følgende undersøgelse vil blive udført i overensstemmelse med internationale anbefalinger for observationsstudier, herunder STROBE-retningslinjerne (20) og andre referencetekster (21). Sted og tidsperiode Denne multicenterundersøgelse vil blive udført i Argentina, inklusive variabler opnået fra 01.03.2018 til 31. maj 2022.

Koordinerende institution:

• Hospital Universitario Austral: Dr. Cavallo Andrea.
• Andre studiecentre inviteret til at deltage: Sanatorio Las Lomas San Isidro og Hospitalet Alta Complejidad Formosa. Dr. Andrea Cavallo vil være den primære efterforsker i de tre centre. Patienter Der vil blive udført en prospektiv database over patienter med punkterede skjoldbruskkirtelknolder og med serumbestemmelse af calcitonin i henhold til bilaget præsenteret som bilag.

Patienter ≥ 18 år, med nodulær eller multinodulær struma, som er under operation, med normalt eller forhøjet serumcalcitonin og/eller med mistanke om CMT på grund af RET-mutation fra 3/1/2018 til 31/5/2022 vil blive udvalgt iht. inklusionskriterier. Patienter, der ikke har en resterende punkturprøve, uden serumcalcitonin, ikke henvist til operation eller dem, der går tabt ved opfølgning, vil blive udelukket. Undersøgelsen vil blive udført i Endocrinology Service (Endokrinologisk område på Hospital Universitario Austral, Pilar; Hospital Alta Complejidad, Formosa; og Sanatorio Las Lomas, San Isidro). Udvælgelseskriterier for sager og kontroller

• Cases: Patienter, der opfylder ovenstående inklusions- og eksklusionskriterier og har en histologisk diagnose medullært karcinom.
• Kontroller: Patienter, der opfylder ovenstående inklusions- og eksklusionskriterier og ikke har en histologisk diagnose medullært karcinom. For kontrolgruppen vil patienter blive tilfældigt udvalgt i forholdet 1:2, voksne, med nodulær eller multinodulær struma uden hypercalcitoninæmi, som har kirurgiske kriterier. FNA vil blive udført i overensstemmelse med ATA-anbefalinger og med resterende prøve af FNA-vaskevæske for calcitonin. Det anslås at omfatte en stikprøve på 100 patienter i kontrolgruppen.

Undersøgelsesvariabler Primære resultater Diagnosen medullært karcinom er defineret i henhold til retningslinjer fra American Society of Pathologists, der bruger Pathological Anatomy-tjenesten som et diagnostisk grundlag.

DATAINDSAMLING OG PROCEDURER Dataene vil blive indhentet fra patienternes journaler (i henhold til den tilladelse, der er anmodet om til oprettelse af databasen) gennem observationsjournaler i Excel (Microsoft). Serum calcitonin test: CT måles med den samme kommercielt tilgængelige ECLIA metode på de tre deltagende institutioner. Bestemmelsen af ​​calcitonin blev udført på en Cobas e601 autoanalyzer med Elecsys® Calcitonin-testen (Roche Diagnostics), en elektrokemiluminescerende immunoassay (ECLIA), der anvender en sandwichteknik med monoklonale antistoffer af murin oprindelse mærket med rutheniumchelat specifikt rettet mod humant calcitonin. Som rapporteret af producenten har denne test en detektionsgrænse på 0,5 pg/ml, et referenceinterval på op til 9,8 pg/ml for kvinder og 14,3 pg/ml for mænd og et måleområde fra 0,5 til 200.000 pg/ml.

Standardisering af serum calcitoninprøvetagning og nålevask (i de tre institutioner):

Evaluering af knuder ved ultralyd: Alle knuder analyseres rutinemæssigt med hensyn til størrelse, ekkogenicitet, antal, margin, struktur (fast, blandet eller cystisk), tilstedeværelse af mikrokalcifikationer og vaskularitet. Ifølge ultralydskarakteristikaene er knuderne klassificeret som benigne, meget lav risiko, lav risiko, mellemrisiko og høj risiko i henhold til de kliniske retningslinjer fra American Thyroid Society (ATA). Finnålsaspiration (FNA) nodulebiopsi: FNA udføres på hver patient, så længe ATA retningslinjernes kriterier er opfyldt. Ved mistanke om medullært karcinom vil der i søgen efter knude eller medullært fokus blive udført FNA på alle ikke-cystiske eller spongiforme knuder større end 0,8 cm. Cytologisk analyse: Den cytologiske undersøgelse vil blive udført af ekspertpatologer, der er forudindtaget i forhold til værdien af ​​serum Rutine Fine Needle Aspiration Cytology (FNAC) procedure: En 23G gauge nål bruges under ultralydsvejledning. Efter udstrygningen vil den resterende sprøjte og kanyle, der bruges til vask, blive skyllet med 0,5 ml normalt saltvand. Aspiratet vil blive udsat for calcitoninmåling (alle bestemmelser er foretaget i resterende væskeprøve fra FNA) og vil blive behandlet med det samme. Definition af hypercalcitoninæmi i serum: Kvindelige patienter med calcitoninniveauer ≥ 9,8 pg/ml og mandlige patienter med calcitoninniveauer ≥ 14,3 pg/ml. For at bekræfte hypercalcitoninæmi skal alle patienter have mindst to serumbestemmelser (det udføres rutinemæssigt i daglig klinisk praksis som anbefalet af kliniske retningslinjer). Definition af hypercalcitoninæmi i FNA: cut-off Følgende variabler vil blive noteret: niveau på 21pg/ml (19)

Følgende variabler vil blive verificeret:

1. Optagelsesdato
2. Køn
3. Alder
4. Præsentation (nodulær eller multinodulær struma)
5. Antal knuder, placering
6. Skjoldbruskkirtelfunktion (hypothyroidisme, hyperthyroidisme, Hashimotos thyroiditis)
7. Beskrivelse af skjoldbruskkirtelknold (ekkogenicitet, marginer, konsistens, placering, tilstedeværelse af forkalkninger, størrelse)
8. Type af skjoldbruskkirtelcarcinom (differentieret, medullær, anaplastisk og dens varianter)
9. Antacida indtag
10. Nyrefunktion
11. Tobaksforbrug
12. Leverfunktion
13. Hyperparathyroidisme (subklinisk-klinisk, primær, sekundær)
14. FNAC-resultat (bethesda og cytologisk beskrivelse), for hver punkteret knude
15. Resultat af patologisk anatomi
16. TNM og scene
17. Serum calcitonin
18. Calcitonin i skylning af hver punkteret knude
19. Biokemiske bestemmelser: TSH, T4l, antithyroidantistoffer, calcium, D-vitamin, PTH, urinstof, kreatinin, clearance, hepatogram, blodtal, thyroglobulin
20. Dødelighed ved sidste besøg Anatomopatologisk analyse: Den vil blive udført efter standardiserede normer, i tilfælde af tvivl eller uoverensstemmelser vil de blive løst internt af tre patologer fra hver institution. For at korrelere knude/spinal fokus vil der blive udført en ultralydskorrelation (med knudenummerering, cytologi, calcitonin i skylning og histologi) hos alle patienter.

Mulige skævheder og konfunderende variabler

• Udvælgelsesbias: For at undgå denne skævhed i udvælgelsen af ​​tilfælde og kontroller, følges og behandles forsøgspersoner under de samme plejestandarder.

  o Cases og kontroller vil blive udvalgt af investigatoren af ​​forskningsstudiet (allerede defineret ovenfor).

• For at undgå biokemiske bestemmelsesbias: alle bestemmelser vil blive foretaget ved hjælp af den samme procedure og med det samme mærke af enhed. Statistisk analyseplan Til deskriptiv analyse vil kontinuerte variable blive udtrykt som middelværdi og standardafvigelse eller median og interkvartilområde (IQR), afhængigt af den observerede fordeling. De kontinuerte variabler blev sammenlignet med Student's Test for uafhængige prøver, en-faktor ANOVA eller Mann-Whitney testen i tilfælde af ikke at overholde antagelserne om normalitet. For at sammenligne kvalitative variabler vil uafhængighedstesten (Chi-squared) blive brugt. Et klinisk relevant afskæringspunkt vil blive valgt til at beregne sensitivitet, specificitet, NPV og PPV og deres respektive 95 % CI'er. I alle tilfælde vil der blive brugt et signifikansniveau på mindre end 5% fra de statistiske test, der er anvendt til at forkaste hypotesen. Prøven vil blive opdelt i to grupper, dem med hypercalcitoninæmi og patienter uden hypercalcitoninæmi, der vil udgøre kontrolgruppen. ETISKE ASPEKTER Protokollen vil blive sendt til den forskningsetiske komité (REC) eller undervisnings- og forskningsudvalget til gennemgang og godkendelse. Klinisk forskning vil overholde de etiske retningslinjer, der er angivet i Helsinki-erklæringen fra World Medical Association, i de internationale etiske retningslinjer for biomedicinsk forskning fra Rådet for Internationale Organisationer for Medicinske Videnskaber og i UNESCO-erklæringen om bioetik og menneskerettigheder. Ligeledes vil de blive styret i overensstemmelse med vejledningen til god praksis for klinisk forskning i mennesker fra sundhedsministeriet i Republikken Argentina (Res 1490/2007).

Adgang til de oplysninger, der indsamles i undersøgelsen, vil have de forholdsregler, der er fastsat af de etiske og juridiske standarder, der beskytter dem (national lov 25326 om beskyttelse af personoplysninger og lov 1845 om beskyttelse af personoplysninger, CABA, Argentina). De indhentede data må ikke bruges til andre formål end dem, de er indhentet til, og forskerne vil bevare dataejernes identitet gennem dissociationsmekanismer (informationen kan ikke uden for videnskabelige årsager associeres med en bestemt person eller person . bestemmes).

Alle data opnået fra undersøgelsen vil blive behandlet fortroligt og vil være tilgængelige for overvågning, hvis REC-deltagere anmoder om det. Hvis det er nødvendigt at foretage ændringer i det, der er skrevet i protokollen under udviklingen af ​​forskningen, vil der blive anmodet om ny godkendelse fra REC. REC kan aktivt overvåge undersøgelsen og sikre overholdelse af love og forskningsetiske principper. Et afkald på informeret samtykke forventes for deltagende patienter ud over det, der allerede er opnået under medicinske procedurer i henhold til rutinepraksis, da punkteringer vil blive udført i knuder større end 0,8 cm i søgen efter spinal fokus hos dem med hypercalcitoninæmi, og derudover vil data blive udført. indsamlet fra deres lægejournaler i henhold til anmodningen om godkendelse af oprettelsen af ​​databasen præsenteret som et bilag.

Denne undersøgelse har ingen ekstern finansiering. Udvælgelsen og inddragelsen af ​​institutioner, dataanalyse og resultaterne af de forskellige faser af dette projekt vil blive udført af forskerholdet beskrevet ovenfor. Forventede resultater Bestemmelsen af ​​calcitonin-afskæringspunktet ved nåleskylning hos patienter med skjoldbruskkirtelknuder fra den generelle befolkning til diagnosticering af medullært karcinom er klinisk relevante data.

Dets bestemmelse i denne population er sjældent undersøgt på grund af den lave forekomst af medullært karcinom i populationen af ​​patienter med nodulær patologi; fastlæggelse af det vil muliggøre forbedring af håndteringen af ​​patienter i den daglige kliniske praksis. Derfor forventes resultaterne at være ekstremt vigtige for lægevidenskaben rundt om i verden. Som nævnt ovenfor er der intet arbejde i verdenslitteraturen, der bestemmer afskæringspunktet for calcitonin ved skylning i den generelle population af patienter med skjoldbruskkirtelknuder til diagnosticering af medullært karcinom. Bestemmelsen af ​​calcitonin i nålevask er en enkel, ikke-invasiv, billig metode, og resultaterne er meget præcise; og dets modulering ved brug af et afskæringspunkt har potentialet til at vejlede, hvilke patienter der ville og ikke ville have gavn af en kirurgisk procedure. Vi tror på, at dette forskningsspørgsmål vil blive besvaret gennem dette multicenter, casecontrol-studie