KALSITONIN I NÅLEVASK MED ELEKTROKJEMIOLUMISCENT METODE FOR DIAGNOSTISERING AV MEDULÆRE TYROIDEKARSINOMA

Undersøkelsesspørsmål I daglig praksis, hvilken verdi av kalsitonin i nålevasking ved elektrokjemiluminescerende metode tillater diagnostisering og lokalisering av medullært karsinom hos pasienter med skjoldbruskknuter med mistenkt medullært karsinom? Primært mål Å bestemme avskjæringspunktet for kalsitonin i finnålsvasking av punkteringsaspirasjon av skjoldbruskknuter (CT-veiledet FNA) for diagnose og lokalisering av medullært karsinom.

Foreløpige studier Så vidt vi vet er det foreløpig ingen publisert studie som ser etter et grensepunkt for kalsitonin ved skylling ved bruk av ECL. Fokuset for denne forskningen er på den ene siden å se etter et grensepunkt ved bruk av denne metodikken hos pasienter med mistanke om medullært karsinom på grunn av vedvarende hyperkalsitoninemi, og på en positiv, stigende måte, der andre årsaker til hyperkalsitoninemi har blitt avklart. ute. Teamet vårt jobber sammen med sykehuset Alta Complejidad Formosa og Sanatorio Las Lomas som utfører rutinebestemmelsen av serumkalsitonin i tilnærmingen til pasienter med skjoldbruskknuter. Prøvestørrelse Femti pasienter med medullært karsinom og 105 kontroller vil bli inkludert. For hvert tilfelle vil to kontroller bli valgt, matchet etter alder, kjønn og ikke-medullær nodulær patologi.

For å estimere prevalensen av medullært karsinom hos pasienter i den studerte populasjonen, hvor kalsitonin rutinemessig bestemmes med en nøyaktighet på +/- 2 % og et konfidensnivå på 95 %, er det nødvendig å studere 105 pasienter i henhold til formelen : Studiedesign Observasjonscase-kontrollstudie (pasienter med medullært karsinom versus pasienter uten medullært karsinom). Beslutningen om denne designmodellen skyldtes den lave prevalensen av medullært karsinom i populasjonen av pasienter med skjoldbruskknuter. Metodikk Følgende studie vil bli utført i samsvar med internasjonale anbefalinger for observasjonsstudier, inkludert retningslinjene for styrket rapportering av observasjonsstudier i epidemiologi (STROBE) (20) og andre referansetekster (21). Sted og tidsperiode Denne multisenterstudien vil bli utført i Argentina, inkludert variabler innhentet fra 01.03.2018 til 31. mai 2022.

Koordinerende institusjon:

• Hospital Universitario Austral: Dr. Cavallo Andrea.
• Andre studiesentre invitert til å delta: Sanatorio Las Lomas San Isidro og sykehuset Alta Complejidad Formosa. Dr. Andrea Cavallo vil være hovedetterforsker i de tre sentrene. Pasienter En prospektiv database over pasienter med punkterte thyreoideaknuter og med serumbestemmelse av kalsitonin i henhold til vedlegget presentert, som vedlegg, vil bli utført.

Pasienter ≥ 18 år, med nodulær eller multinodulær struma som skal opereres, med normalt eller forhøyet serumkalsitonin og/eller med mistanke om CMT på grunn av RET-mutasjon fra 1.3.2018 til 31.05.2022 vil bli valgt iht. inklusjonskriterier. Pasienter som ikke har gjenværende punkteringsprøve, uten serumkalsitonin, ikke henvist til operasjon eller de som går tapt ved oppfølging, vil bli ekskludert. Studien vil bli utført i Endocrinology Service (Endokrinologisk område ved Hospital Universitario Austral, Pilar; Hospital Alta Complejidad, Formosa; og Sanatorio Las Lomas, San Isidro). Utvalgskriterier for saker og kontroller

• Tilfeller: Pasienter som oppfyller ovennevnte inklusjons- og eksklusjonskriterier og har histologisk diagnose medullært karsinom.
• Kontroller: Pasienter som oppfyller ovennevnte inklusjons- og eksklusjonskriterier og ikke har en histologisk diagnose medullært karsinom. For kontrollgruppen vil pasienter bli tilfeldig selektert i forholdet 1:2, voksne, med nodulær eller multinodulær struma uten hyperkalsitoninemi, som har kirurgiske kriterier. FNA vil bli utført i henhold til ATA-anbefalinger og med gjenværende prøve av FNA-vaskevæske for kalsitonin. Det er anslått å inkludere et utvalg på 100 pasienter i kontrollgruppen.

Studievariabler Primære resultater Diagnosen medullært karsinom er definert i henhold til retningslinjer fra American Society of Pathologists som bruker tjenesten Pathological Anatomy som et diagnostisk grunnlag.

DATAINNSAMLING OG PROSEDYRER Dataene vil bli hentet fra pasientjournalene (i henhold til autorisasjon forespurt for opprettelse av databasen) gjennom observasjonsjournaler i Excel (Microsoft). Serumkalsitonintest: CT måles med samme kommersielt tilgjengelige ECLIA-metode ved de tre deltakende institusjonene. Bestemmelsen av kalsitonin ble utført på en Cobas e601-autoanalyzer med Elecsys® Calcitonin-testen (Roche Diagnostics), en elektrokjemiluminescerende immunoassay (ECLIA) som bruker en sandwichteknikk med monoklonale antistoffer av murin opprinnelse merket med rutheniumchelat spesifikt rettet mot humant Calcitonin. Som rapportert av produsenten har denne testen en deteksjonsgrense på 0,5 pg/ml, et referanseintervall på opptil 9,8 pg/ml for kvinner og 14,3 pg/ml for menn, og et måleområde fra 0,5 til 200 000 pg/ml.

Standardisering av serumkalsitoninprøvetaking og nålevasking (i de tre institusjonene):

Evaluering av knuter ved ultralyd: Alle knuter analyseres rutinemessig med hensyn til størrelse, ekkogenisitet, antall, margin, struktur (fast, blandet eller cystisk), tilstedeværelse av mikroforkalkninger og vaskularitet. I henhold til ultralydkarakteristikkene er knutene klassifisert som benigne, svært lav risiko, lav risiko, middels risiko og høy risiko i henhold til retningslinjene for klinisk praksis fra American Thyroid Society (ATA). Finnålaspirasjon (FNA) nodulebiopsi: FNA utføres på hver pasient så lenge ATA-retningslinjekriteriene er oppfylt. Ved mistanke om medullært karsinom, på jakt etter knute eller medullært fokus, vil det bli utført FNA på alle ikke-cystiske eller spongiforme knuter større enn 0,8 cm. Cytologisk analyse: Den cytologiske studien vil bli utført av ekspertpatologer, basert på verdien av serum Rutine Fine Needle Aspiration Cytology (FNAC) prosedyre: En 23G gauge nål brukes under ultralydveiledning. Etter utstryket vil den gjenværende sprøyten og kanylen som brukes til vask skylles med 0,5 ml vanlig saltvann. Aspiratet vil bli utsatt for kalsitoninmåling (alle bestemmelser gjøres i gjenværende væskeprøve fra FNA) og vil bli behandlet umiddelbart. Definisjon av hyperkalsitoninemi i serum: Kvinnelige pasienter med kalsitoninnivåer ≥ 9,8 pg/ml og mannlige pasienter med kalsitoninnivåer ≥ 14,3 pg/ml. For å bekrefte hyperkalsitoninemi må alle pasienter ha minst to serumbestemmelser (det utføres rutinemessig i daglig klinisk praksis som anbefalt av kliniske retningslinjer). Definisjon av hypercalcitoninemi i FNA: cut-off Følgende variabler vil bli notert: nivå på 21pg/ml (19)

Følgende variabler vil bli verifisert:

1. Inkluderingsdato
2. Kjønn
3. Alder
4. Presentasjon (nodulær eller multinodulær struma)
5. Antall knuter, plassering
6. Skjoldbruskfunksjon (hypotyreose, hypertyreose, Hashimotos tyreoiditt)
7. Beskrivelse av skjoldbruskkjertelen (ekogenisitet, marginer, konsistens, plassering, tilstedeværelse av forkalkninger, størrelse)
8. Type skjoldbruskkjertelkarsinom (differensiert, medullær, anaplastisk og dens varianter)
9. Syrenøytraliserende inntak
10. Nyrefunksjon
11. Tobakksforbruk
12. Leverfunksjon
13. Hyperparatyreose (subklinisk-klinisk, primær, sekundær)
14. FNAC-resultat (bethesda og cytologisk beskrivelse), for hver punktert knute
15. Resultat av patologisk anatomi
16. TNM og scene
17. Serum kalsitonin
18. Kalsitonin i skylling av hver punktert knute
19. Biokjemiske bestemmelser: TSH, T4l, antithyroidantistoffer, kalsium, D-vitamin, PTH, urea, kreatinin, clearance, hepatogram, blodtelling, tyroglobulin
20. Dødelighet ved siste besøk Anatomopatologisk analyse: Det vil bli utført i henhold til standardiserte normer, ved tvil eller uoverensstemmelser vil de bli løst internt av tre patologer fra hver institusjon. For å korrelere knute/ryggmargsfokus vil det utføres en ultralydkorrelasjon (med knutenummerering, cytologi, kalsitonin ved skylling og histologi) hos alle pasienter.

Mulige skjevheter og konfunderende variabler

• Seleksjonsskjevhet: For å unngå denne skjevheten i utvelgelsen av tilfeller og kontroller, blir forsøkspersoner fulgt og behandlet under samme omsorgsstandarder.

  o Tilfeller og kontroller vil bli valgt av etterforskeren av forskningsstudien (allerede definert ovenfor).

• For å unngå skjevhet i biokjemisk bestemmelse: alle bestemmelser vil bli gjort ved hjelp av samme prosedyre og med samme merke av utstyr. Statistisk analyseplan For deskriptiv analyse vil kontinuerlige variabler uttrykkes som gjennomsnitt og standardavvik eller median og interkvartilt område (IQR), avhengig av den observerte fordelingen. De kontinuerlige variablene ble sammenlignet med Student's Test for uavhengige prøver, en-faktor ANOVA eller Mann-Whitney-testen i tilfelle ikke samsvar med forutsetningene om normalitet. For å sammenligne kvalitative variabler vil uavhengighetstesten (Chi-squared) brukes. Et klinisk relevant grensepunkt vil bli valgt for å beregne sensitivitet, spesifisitet, NPV og PPV og deres respektive 95 % CI. I alle tilfeller vil et signifikansnivå på mindre enn 5 % bli brukt fra de statistiske testene som er brukt for å forkaste hypotesen. Prøven vil bli delt inn i to grupper, de med hyperkalsitoninemi, og pasienter uten hyperkalsitoninemi som vil utgjøre kontrollgruppen. ETISKE ASPEKTER Protokollen vil bli sendt til Forskningsetisk komité (REC) eller undervisnings- og forskningskomité for gjennomgang og godkjenning. Klinisk forskning vil være i samsvar med de etiske retningslinjene angitt i Helsinki-erklæringen fra World Medical Association, i International Ethical Guidelines for Biomedical Research fra Council for International Organizations of Medical Sciences og i UNESCO-erklæringen om bioetikk og menneskerettigheter. På samme måte vil de bli styrt i samsvar med veiledningen til god praksis for klinisk forskning på mennesker fra Helsedepartementet i Republikken Argentina (Res 1490/2007).

Tilgang til informasjonen som samles inn i studien vil ha forholdsreglene fastsatt av de etiske og juridiske standardene som beskytter den (nasjonal lov 25326 om beskyttelse av personopplysninger og lov 1845 om beskyttelse av personopplysninger, CABA, Argentina). Dataene som innhentes kan ikke brukes til andre formål enn de de ble innhentet for, og forskerne vil bevare identiteten til dataeierne gjennom dissosiasjonsmekanismer (informasjonen kan ikke assosieres, utenom vitenskapelige grunner, med en bestemt person eller person . bestemmes).

Alle data innhentet fra studien vil bli behandlet konfidensielt og vil være tilgjengelig for overvåking dersom REC-deltakere ber om det. Dersom det er nødvendig å gjøre endringer i det som er skrevet i protokollen under utviklingen av forskningen, vil det bli bedt om ny godkjenning fra REC. REC kan aktivt overvåke studien, og sikre overholdelse av lover og forskningsetiske prinsipper. En fraskrivelse av informert samtykke forventes for deltakende pasienter utover det som allerede er oppnådd under medisinske prosedyrer i henhold til rutinepraksis, siden punkteringer vil bli utført i knuter større enn 0,8 cm i jakten på spinal fokus hos de med hyperkalsitonemi, og i tillegg vil data bli utført samlet inn fra deres medisinske journaler, i henhold til forespørselen om godkjenning av opprettelsen av databasen presentert som et vedlegg.

Denne studien har ingen ekstern finansiering. Utvelgelse og inkludering av institusjoner, dataanalyse og resultatene fra de ulike stadiene i dette prosjektet vil bli utført av forskergruppen beskrevet ovenfor. Forventede resultater Bestemmelsen av kalsitoninavskjæringspunktet ved nåleskylling hos pasienter med skjoldbruskknuter fra den generelle befolkningen for diagnostisering av medullært karsinom er klinisk relevante data.

Dets bestemmelse i denne populasjonen er sjelden studert, på grunn av lav forekomst av medullært karsinom i populasjonen av pasienter med nodulær patologi; å bestemme det vil tillate forbedring av behandling av pasienter i daglig klinisk praksis. Derfor forventes resultatene å være ekstremt viktige for medisinsk vitenskap over hele verden. Som nevnt ovenfor er det ikke noe arbeid i verdenslitteraturen som bestemmer grensepunktet for kalsitonin ved skylling i den generelle populasjonen av pasienter med skjoldbruskknuter for diagnostisering av medullært karsinom. Bestemmelsen av kalsitonin i nålevask er en enkel, ikke-invasiv, rimelig metode og resultatene er svært presise; og dens modulering gjennom bruk av et grensepunkt har potensial til å veilede hvilke pasienter som vil og ikke vil ha nytte av en kirurgisk prosedyre. Vi tror at dette forskningsspørsmålet vil bli besvart gjennom denne multisenter, casecontrol-studien