KALSITONIINI NEULAPESESSÄ SÄHKÖKEMIOLUMISISTIMENETELMÄN KÄYTTÖÖN MEDULLAARINEN KIPIrauhasen karsinooman DIAGNOOSIN

Tutkintakysymys Mikä kalsitoniinin arvo sähkökemiluminesenssimenetelmällä tapahtuvassa neulanpesussa mahdollistaa arkipäivän käytännössä medullaarisen syövän diagnosoinnin ja lokalisoinnin potilailla, joilla on kilpirauhasen kyhmyjä, joilla epäillään medullaarista karsinoomaa? Ensisijainen tavoite Määrittää kalsitoniinin raja-arvo kilpirauhasen kyhmyjen (CT-ohjattu FNA) hienon neulan pesussa medullaarisen karsinooman diagnoosia ja paikallistamista varten.

Alustavat tutkimukset Tietojemme mukaan tällä hetkellä ei ole julkaistu tutkimusta, jossa etsittäisiin kalsitoniinin raja-arvoa huuhtelussa ECL:n avulla. Tämän tutkimuksen painopiste on toisaalta etsiä raja-arvoa käytettäessä tätä metodologiaa potilailla, joilla epäillään jatkuvan hyperkalsitoninemiasta johtuvaa medullaarista syöpää, sekä positiivisesti nousevalla tavalla, kun muut hyperkalsitoninemian syyt on todettu. ulos. Tiimimme työskentelee yhdessä Hospital Alta Complejidad Formosan ja Sanatorio Las Lomasin kanssa, jotka suorittavat rutiininomaisen seerumin kalsitoniinin määrityksen kilpirauhaskyhmyistä kärsivien potilaiden lähestyessä. Näytteen koko Mukaan otetaan 50 potilasta, joilla on medullaarinen karsinooma ja 105 kontrollia. Jokaiselle tapaukselle valitaan kaksi kontrollia, jotka vastaavat ikää, sukupuolta ja ei-medullaarista nodulaarista patologiaa.

Medullaarisen karsinooman esiintyvyyden arvioimiseksi tutkitun väestön potilailla, joille kalsitoniini määritetään rutiininomaisesti +/- 2 %:n tarkkuudella ja 95 %:n luottamustasolla, on tarpeen tutkia 105 potilasta kaavan mukaan. : Tutkimussuunnitelma Havainnollinen tapaus-verrokkitutkimus (potilaat, joilla on medullaarinen syöpä verrattuna potilaisiin, joilla ei ole medullaarista karsinoomaa). Tämän suunnittelumallin valinta johtui medullaarisen karsinooman alhaisesta esiintyvyydestä kilpirauhaskyhmyistä kärsivien potilaiden populaatiossa. Metodologia Seuraava tutkimus suoritetaan kansainvälisten havainnointitutkimuksia koskevien suositusten mukaisesti, mukaan lukien STROBE-ohjeistukset (20) ja muut viitetekstit (21). Sijainti ja ajanjakso Tämä monikeskustutkimus tehdään Argentiinassa, ja se sisältää muuttujat, jotka on saatu 01.03.2018 - 31.5.2022.

Koordinoiva instituutio:

• Hospital Universitario Austral: Dr. Cavallo Andrea.
• Muita osallistumaan kutsuttuja tutkimuskeskuksia: Sanatorio Las Lomas San Isidro ja Hospital Alta Complejidad Formosa. Tri Andrea Cavallo toimii päätutkijana näissä kolmessa keskuksessa. Potilaat Suoritetaan mahdollinen tietokanta potilaista, joilla on puhjenneet kilpirauhasen kyhmyt ja joilla on seerumin kalsitoniinimääritys liitteenä olevan liitteen mukaisesti.

≥ 18-vuotiaat potilaat, joilla on nodulaarinen tai multinodulaarinen struuma, joille tehdään leikkaus, normaali tai kohonnut seerumin kalsitoniini ja/tai joiden CMT epäillään johtuvan RET-mutaatiosta 1.3.2018-31.5.2022, valitaan sisällyttämiskriteerit. Potilaat, joilla ei ole jäljellä pistonäytettä, ilman seerumin kalsitoniinia, joita ei ole lähetetty leikkaukseen tai jotka ovat kadonneet seurannassa, suljetaan pois. Tutkimus tehdään endokrinologiapalvelussa (Pilar Universitario Australin endokrinologian alue; Formosan sairaala Alta Complejidad ja San Isidro Sanatorio Las Lomas). Tapausten ja kontrollien valintakriteerit

• Tapaukset: Potilaat, jotka täyttävät edellä mainitut sisällyttämis- ja poissulkemiskriteerit ja joilla on histologinen diagnoosi medullaarisesta karsinoomasta.
• Kontrollit: Potilaat, jotka täyttävät edellä mainitut sisällyttämis- ja poissulkemiskriteerit ja joilla ei ole histologian perusteella diagnosoitua medullaarista karsinoomaa. Kontrolliryhmään valitaan satunnaisesti suhteessa 1:2 potilaat, aikuiset, joilla on nodulaarinen tai multinodulaarinen struuma ilman hyperkalsitoninemiaa ja joilla on kirurgiset kriteerit. FNA suoritetaan ATA:n suositusten mukaisesti ja kalsitoniinin FNA-pesunesteen jäännösnäytteellä. Sen arvioidaan sisältävän 100 potilaan otoksen kontrolliryhmään.

Tutkimusmuuttujat Ensisijaiset tulokset Medullaarisen karsinooman diagnoosi määritellään American Society of Pathologists -yhdistyksen ohjeiden mukaan, joka käyttää Patological Anatomy -palvelua diagnostisena perustana.

TIETOJEN KERÄÄMINEN JA TOIMENPITEET Tiedot saadaan potilaiden potilaskertomuksista (tietokannan luomiseen vaaditun valtuutuksen mukaan) Excelin (Microsoft) havainnointilomakkeilla. Seerumin kalsitoniinitesti: TT mitataan samalla kaupallisesti saatavilla olevalla ECLIA-menetelmällä kolmessa osallistuvassa laitoksessa. Kalsitoniinin määritys suoritettiin Cobas e601 -autoanalysaattorilla Elecsys® Calcitonin -testillä (Roche Diagnostics), elektrokemiluminesenssi-immunomäärityksellä (ECLIA), joka käyttää sandwich-tekniikkaa hiiren alkuperää olevilla monoklonaalisilla vasta-aineilla, jotka on leimattu ruteniumkalsitonilla, joka on erityisesti suunnattu ihmisen vastustamiseen. Kuten valmistaja on ilmoittanut, tämän testin havaitsemisraja on 0,5 pg/ml, vertailuväli jopa 9,8 pg/ml naisilla ja 14,3 pg/ml miehillä ja mittausalue 0,5 - 200 000 pg/ml.

Seerumin kalsitoniininäytteenoton ja neulojen pesun standardointi (kolmessa laitoksessa):

Kyhmyjen arviointi ultraäänellä: Kaikki kyhmyt analysoidaan rutiininomaisesti koon, kaikukyvyn, lukumäärän, marginaalin, rakenteen (kiinteä, sekoitettu tai kystinen), mikrokalsifikaatioiden esiintymisen ja verisuonisuuden suhteen. Ultraääniominaisuuksien mukaan kyhmyt luokitellaan hyvänlaatuisiksi, erittäin pieniriskisiksi, vähäriskisiksi, keskiriskiisiksi ja korkeariskisiksi American Thyroid Societyn (ATA) kliinisen käytännön ohjeiden mukaan. Fine needle aspiration (FNA) kyhmybiopsia: FNA suoritetaan jokaiselle potilaalle niin kauan kuin ATA-ohjekriteerit täyttyvät. Jos epäillään medullaarista karsinoomaa ja etsitään kyhmyä tai ydinkohtaa, FNA suoritetaan kaikille ei-kystisille tai spongiformisille kyhmyille, jotka ovat suurempia kuin 0,8 cm. Sytologinen analyysi: Ammattipatologit suorittavat sytologisen tutkimuksen seerumin arvoon. Rutiininomaisen hienoneula-aspiraatiosytologian (FNAC) menettely: 23G-neulaa käytetään ultraääniohjauksessa. Näytteenoton jälkeen jäljellä oleva pesuun käytetty ruisku ja neula huuhdellaan 0,5 ml:lla normaalia suolaliuosta. Aspiraatille tehdään kalsitoniinimittaus (kaikki määritykset tehdään FNA:n jäännösnestenäytteestä) ja se käsitellään välittömästi. Hyperkalsitoninemian määritelmä seerumissa: Naispotilaat, joiden kalsitoniinipitoisuus on ≥ 9,8 pg/ml ja miespotilaat, joiden kalsitoniinitasot ovat ≥ 14,3 pg/ml. Hyperkalsitoninemian vahvistamiseksi kaikilta potilailta on tehtävä vähintään kaksi seerumimääritystä (se tehdään rutiininomaisesti päivittäisessä kliinisessä käytännössä kliinisen käytännön ohjeiden mukaisesti). Hyperkalsitoninemian määritelmä FNA:ssa: cut-off Seuraavat muuttujat huomioidaan: taso 21 pg/ml (19)

Seuraavat muuttujat tarkistetaan:

1. Sisällön päivämäärä
2. seksiä
3. Ikä
4. Esitys (nodulaarinen tai multinodulaarinen struuma)
5. Kyhmyjen lukumäärä, sijainti
6. Kilpirauhasen toiminta (hypotyreoosi, hypertyreoosi, Hashimoton kilpirauhastulehdus)
7. Kilpirauhasen kyhmyn kuvaus (kaikukyky, reunat, konsistenssi, sijainti, kalkkeutumien esiintyminen, koko)
8. Kilpirauhasen karsinooman tyyppi (erilaistunut, medullaarinen, anaplastinen ja sen muunnelmat)
9. Antasidin saanti
10. Munuaisten toiminta
11. Tupakan kulutus
12. Maksan toiminta
13. Hyperparatyreoosi (subkliinis-kliininen, primaarinen, sekundaarinen)
14. FNAC-tulos (bethesda ja sytologinen kuvaus) jokaisesta puhkaistusta kyhmystä
15. Patologisen anatomian tulos
16. TNM ja näyttämö
17. Seerumin kalsitoniini
18. Kalsitoniini jokaisen puhkaisun kyhmyn huuhtelussa
19. Biokemialliset määritykset: TSH, T4l, kilpirauhasen vasta-aineet, kalsium, D-vitamiini, PTH, urea, kreatiniini, puhdistuma, hepatogrammi, verenkuva, tyroglobuliini
20. Kuolleisuus viimeisellä käynnillä Anatomopatologinen analyysi: Se suoritetaan standardisoitujen normien mukaisesti, jos epäilyksiä tai ristiriitoja ilmenee, ne ratkaisee sisäisesti kolme patologia kustakin laitoksesta. Kyhmy/selkärangan fokuksen korreloimiseksi kaikille potilaille suoritetaan ultraäänikorrelaatio (kyhmyjen numerointi, sytologia, kalsitoniini huuhtelussa ja histologia).

Mahdolliset poikkeamat ja hämmentävät muuttujat

• Valintaharha: Jotta vältetään tämä harha tapausten ja kontrollien valinnassa, koehenkilöitä seurataan ja niitä käsitellään samojen hoitostandardien mukaisesti.

  o Tapaukset ja kontrollit valitsee tutkimustutkimuksen tutkija (jo määritelty edellä).

• Biokemiallisen määritysharhan välttämiseksi: kaikki määritykset tehdään käyttäen samaa menettelyä ja samaa laitemerkkiä. Tilastollinen analyysisuunnitelma Kuvailevaa analyysiä varten jatkuvat muuttujat ilmaistaan ​​keskiarvona ja keskihajonnana tai mediaani- ja kvartiilialueena (IQR) havaitusta jakaumasta riippuen. Jatkuvia muuttujia verrattiin Studentin testillä riippumattomille näytteille, yksitekijä-ANOVA:lla tai Mann-Whitneyn testillä, mikäli ne eivät täytä normaalisuusoletuksia. Kvalitatiivisten muuttujien vertailuun käytetään riippumattomuustestiä (Chi-neliö). Kliinisesti merkityksellinen rajapiste valitaan herkkyyden, spesifisyyden, NPV:n ja PPV:n sekä niiden vastaavien 95 % CI:n laskemiseksi. Kaikissa tapauksissa hypoteesin hylkäämiseen sovelletuista tilastollisista testeistä käytetään alle 5 %:n merkitsevyystasoa. Näyte jaetaan kahteen ryhmään, hyperkalsitoninemiaa sairastaviin ja verrokkiryhmän muodostaviin potilaisiin, joilla ei ole hyperkalsitoninemiaa. EETTISET NÄKÖKOHDAT Protokolla lähetetään tutkimuseettiselle toimikunnalle (REC) tai opetus- ja tutkimuskomitealle tarkistettavaksi ja hyväksyttäväksi. Kliinisessä tutkimuksessa noudatetaan Maailman lääkäriliiton Helsingin julistuksessa, Kansainvälisten lääketieteellisten järjestöjen neuvoston kansainvälisessä biolääketieteellisen tutkimuksen eettisissä ohjeissa sekä Unescon bioetiikkaa ja ihmisoikeuksia koskevassa julistuksessa esitettyjä eettisiä ohjeita. Samoin niitä ohjataan Argentiinan tasavallan terveysministeriön oppaan hyvien käytäntöjen oppaan ihmisille kliiniseen tutkimukseen (Res 1490/2007) mukaisesti.

Pääsy tutkimuksessa kerättyihin tietoihin edellyttää niitä suojaavien eettisten ja oikeudellisten standardien (kansallinen laki 25326 henkilötietojen suojaamisesta ja laki 1845 henkilötietojen suojaamisesta, CABA, Argentiina) asettamia varotoimia. Saatuja tietoja ei saa käyttää muihin tarkoituksiin kuin mihin ne on hankittu, ja tutkijat säilyttävät tietojen omistajien henkilöllisyyden dissosiaatiomekanismien avulla (tietoja ei voida tieteellisten syiden ulkopuolella yhdistää tiettyyn henkilöön tai henkilöön . määritettävissä).

Kaikkia tutkimuksesta saatuja tietoja käsitellään luottamuksellisesti ja ne ovat seurannassa REC:n osallistujien pyynnöstä. Jos tutkimusta kehitettäessä on tarpeen tehdä muutoksia pöytäkirjaan kirjoitettuun, pyydetään uusi hyväksyntä REC:ltä. REC voi aktiivisesti valvoa tutkimusta varmistaen lakien ja tutkimuseettisten periaatteiden noudattamisen. Osallistuvien potilaiden tietoisesta suostumuksesta odotetaan luopumista sen lisäksi, mikä on jo saatu lääketieteellisissä toimenpiteissä rutiinikäytännön mukaan, koska pistokset tehdään yli 0,8 cm:n kyhmyihin etsimään selkärangan fokusta hyperkalsitoninemiaa sairastavilla potilailla ja lisäksi tiedot kerätään. kerätyt potilaskertomuksistaan ​​liitteenä esitetyn tietokannan luomisen hyväksymispyynnön mukaisesti.

Tällä tutkimuksella ei ole ulkopuolista rahoitusta. Instituutioiden valinnasta ja sisällyttämisestä, data-analyysistä ja tämän projektin eri vaiheiden tuloksista vastaa edellä kuvattu tutkimusryhmä. Odotetut tulokset Kalsitoniinin raja-arvon määrittäminen neulanhuuhtelussa potilailla, joilla on kilpirauhasen kyhmyjä yleisväestöstä medullaarisen karsinooman diagnosoimiseksi, on kliinisesti merkityksellistä tietoa.

Sen määrittämistä tässä populaatiossa tutkitaan harvoin johtuen medullaarisen karsinooman alhaisesta esiintyvyydestä potilailla, joilla on nodulaarinen patologia; sen määrittäminen mahdollistaa potilaiden hoidon parantamisen päivittäisessä kliinisessä käytännössä. Siksi tulosten odotetaan olevan erittäin tärkeitä lääketieteelle kaikkialla maailmassa. Kuten edellä mainittiin, maailman kirjallisuudessa ei ole työtä, joka määrittää huuhtelussa käytettävän kalsitoniinin raja-arvon yleisessä kilpirauhaskyhmyistä kärsivien potilaiden medullaarisen karsinooman diagnosoimiseksi. Kalsitoniinin määritys neulanpesussa on yksinkertainen, ei-invasiivinen, edullinen menetelmä ja tulokset ovat erittäin tarkkoja; ja sen modulaatio käyttämällä raja-arvoa voi ohjata, ketkä potilaat hyötyisivät ja mitkä eivät hyötyisi kirurgisesta toimenpiteestä. Uskomme, että tähän tutkimuskysymykseen vastataan tämän monikeskuksen tapauskontrollitutkimuksen kautta