电化学发光法针洗中降钙素诊断甲状腺髓样癌

研究问题 在日常实践中，降钙素在电化学发光法洗针中的价值对于甲状腺结节疑似髓样癌患者的髓样癌的诊断和定位有何价值？ 主要目的 确定甲状腺结节穿刺抽吸细针冲洗（CT 引导下 FNA）中降钙素的临界点，以诊断和定位髓样癌。

初步研究 据我们所知，目前还没有发表的研究使用 ECL 来寻找灌洗液中降钙素的截止点。 本研究的重点是，一方面，在对因持续性高降钙素血症而疑似髓样癌的患者使用该方法时，寻找一个分界点，并以积极、上升的方式，其中已经排除了高降钙素血症的其他原因出去。 我们的团队正在与福尔摩沙阿尔塔综合医院和拉斯洛马斯疗养院合作，对甲状腺结节患者进行血清降钙素的常规测定。 样本量 将包括 50 名髓样癌患者和 105 名对照者。 对于每个病例，将选择两个对照，并根据年龄、性别和非髓质结节病理进行匹配。

为了估计研究人群中髓样癌的患病率，其中降钙素的常规测定准确度为 +/- 2%，置信度为 95%，有必要根据以下公式对 105 名患者进行研究：研究设计观察性病例对照研究（髓样癌患者与非髓样癌患者）。 做出该设计模型的决定是由于甲状腺结节患者群体中髓样癌的患病率较低。 方法 以下研究将根据观察性研究的国际建议进行，包括加强流行病学观察性研究报告 (STROBE) 指南 (20) 和其他参考文本 (21)。 地点和时间段这项多中心研究将在阿根廷进行，包括2018年3月1日至2022年5月31日期间获得的变量。

协调机构：

• 澳大利亚大学医院：Cavallo Andrea 博士。
• 其他受邀参加的研究中心：Sanatorio Las Lomas San Isidro 和 Hospital Alta Complejidad Formosa。 Andrea Cavallo 博士将担任这三个中心的首席研究员。 患者 将建立一个甲状腺结节穿刺患者的前瞻性数据库，并根据附件中的附件进行血清降钙素测定。

2018年3月1日至2022年5月31日期间，年龄≥18岁、患有结节性或多结节性甲状腺肿、正在接受手术、血清降钙素正常或升高和/或因RET突变而疑似CMT的患者将根据以下条件进行选择纳入标准。 没有剩余穿刺样本、没有血清降钙素、未转诊手术或随访中丢失的患者将被排除。 该研究将在内分泌科（皮拉尔南方大学医院内分泌科、福尔摩沙 Alta Complejidad 医院和圣伊西德罗拉斯洛马斯疗养院内分泌科）进行。 病例和对照的选择标准

• 病例：符合上述纳入和排除标准，经组织学诊断为髓样癌的患者。
• 对照：符合上述纳入和排除标准且组织学未诊断为髓样癌的患者。 对于对照组，将以 1:2 的比例随机选择患有结节性或多结节性甲状腺肿且无高降钙素血症且符合手术标准的成人患者。 FNA 将根据 ATA 建议进行，并使用 FNA 冲洗液的残留样品进行降钙素测定。 估计对照组包括 100 名患者样本。

研究变量 主要结果 髓样癌的诊断是根据美国病理学家协会的指南定义的，该指南使用病理解剖学服务作为诊断基础。

数据收集和程序 数据将通过 Excel (Microsoft) 中的观察记录表从患者的医疗记录中获取（根据创建数据库所需的授权）。 血清降钙素检测：CT是在三个参与机构采用相同的市售ECLIA方法进行测量。 降钙素的测定是在 Cobas e601 自动分析仪上使用 Elecsys® 降钙素测试（罗氏诊断）进行的，这是一种电化学发光免疫分析 (ECLIA)，采用夹心技术，采用鼠源单克隆抗体，并用专门针对人降钙素的钌螯合物标记。 据制造商介绍，该测试的检测限为 0.5 pg/ml，女性参考区间高达 9.8 pg/ml，男性参考区间高达 14.3 pg/ml，测量范围为 0.5 至 200,000 pg/ml。

血清降钙素采样和洗针标准化（三机构）：

通过超声评估结节：对所有结节的大小、回声性、数量、边缘、结构（实性、混合性或囊性）、微钙化的存在和血管分布进行常规分析。 根据美国甲状腺协会（ATA）的临床实践指南，根据超声特征，结节分为良性、极低风险、低风险、中风险和高风险。 细针抽吸 (FNA) 结节活检：只要符合 ATA 指南标准，就会对每位患者进行 FNA。 如果怀疑患有髓样癌，为了寻找结节或髓质病灶，将对所有大于 0.8 厘米的非囊性或海绵状结节进行 FNA。 细胞学分析：细胞学研究将由病理学家专家进行，偏向于血清常规细针抽吸细胞学 (FNAC) 程序的价值：在超声引导下使用 23G 规格的针。 涂片后，用0.5ml生理盐水冲洗剩余的用于清洗的注射器和针头。 抽吸物将进行降钙素测量（所有测定均在 FNA 的残留液体样本中进行）并立即进行处理。 血清高降钙素血症的定义：女性患者降钙素水平≥9.8 pg/ml，男性患者降钙素水平≥14.3 pg/ml。 为了确认高降钙素血症，所有患者必须至少进行两次血清测定（根据临床实践指南的建议，在日常临床实践中常规进行）。 FNA 中高降钙素血症的定义：截止值 将注意以下变量：21pg/ml 的水平 (19)

将验证以下变量：

1. 纳入日期
2. 性别
3. 年龄
4. 表现（结节性或多结节性甲状腺肿）
5. 结节的数量、位置
6. 甲状腺功能（甲状腺功能减退症、甲状腺功能亢进症、桥本甲状腺炎）
7. 甲状腺结节的描述（回声、边缘、一致性、位置、钙化存在、大小）
8. 甲状腺癌的类型（分化型、髓样型、未分化型及其变异型）
9. 抗酸剂摄入量
10. 肾功能
11. 烟草消费
12. 肝功能
13. 甲状旁腺功能亢进症（亚临床-临床、原发性、继发性）
14. 每个穿刺结节的 FNAC 结果（贝塞斯达和细胞学描述）
15. 病理解剖结果
16. TNM 和分期
17. 血清降钙素
18. 每个穿刺结节灌洗液中的降钙素
19. 生化测定：TSH、T4l、抗甲状腺抗体、钙、维生素 D、PTH、尿素、肌酐、清除率、肝图、血细胞计数、甲状腺球蛋白
20. 最后一次就诊时的死亡率解剖病理分析：将根据标准化规范进行，如有疑问或差异，将由每个机构的三名病理学家在内部解决。 为了关联结节/脊柱病灶，将对所有患者进行超声关联（结节编号、细胞学、灌洗中的降钙素和组织学）。

可能的偏差和混杂变量

• 选择偏倚：为了避免在选择病例和对照时出现这种偏倚，对受试者进行跟踪并在相同的护理标准下进行治疗。

  o 病例和对照将由研究研究者选择（已在上文定义）。

• 为了避免生化测定偏差：所有测定都将使用相同的程序并使用相同品牌的设备进行。 统计分析计划 对于描述性分析，连续变量将表示为平均值和标准差或中位数和四分位数范围 (IQR)，具体取决于观察到的分布。 在不符合正态性假设的情况下，通过独立样本的学生检验、单因素方差分析或曼-惠特尼检验来比较连续变量。 为了比较定性变量，将使用独立性检验（卡方）。 将选择临床相关的截止点来计算敏感性、特异性、NPV 和 PPV 及其各自的 95% CI。 在所有情况下，将使用统计检验中小于 5% 的显着性水平来拒绝假设。 将样本分为两组，即患有高降钙素血症的患者和无高降钙素血症的患者，这将构成对照组。 伦理方面 该方案将送交研究伦理委员会 (REC) 或教学和研究委员会审查和批准。 临床研究将遵守世界医学协会赫尔辛基宣言、国际医学科学组织理事会生物医学研究国际伦理准则以及联合国教科文组织生物伦理与人权宣言中规定的伦理准则。 同样，它们将根据阿根廷共和国卫生部《人类临床研究良好实践指南》（Res 1490/2007）进行管理。

对研究中收集的信息的访问将受到保护该信息的道德和法律标准规定的预防措施（关于保护个人数据的第 25326 号国家法和关于保护个人数据的第 1845 号法，CABA，阿根廷）。 所获得的数据不得用于其获取目的以外的目的，并且研​​究人员将通过分离机制保留数据所有者的身份（除科学原因外，该信息不能与特定的人或个人关联） 。 可确定）。

从研究中获得的所有数据都将保密处理，并可根据 REC 参与者的要求进行监测。 如果在研究开发过程中需要对方案中的内容进行修改，将向 REC 请求新的批准。 REC 可以积极监督研究，确保遵守法律和研究伦理原则。 除了根据常规做法在医疗程序中获得的知情同意之外，预计参与患者将放弃知情同意，因为将在大于 0.8 厘米的结节中进行穿刺，以寻找高降钙素血症患者的脊柱病灶，此外，数据将被根据附件中提出的批准创建数据库的请求，从他们的医疗记录中收集。

这项研究没有外部资助。 本项目不同阶段的机构选择和纳入、数据分析和结果将由上述研究团队进行。 预期结果 确定普通人群甲状腺结节患者针洗中降钙素临界点用于诊断髓样癌是临床相关数据。

由于结节性病理患者群体中髓样癌的发生率较低，因此很少研究该人群中髓样癌的测定；确定它将有助于改善日常临床实践中的患者管理。 因此，研究结果预计对世界各地的医学科学极为重要。 如上所述，世界文献中还没有确定一般甲状腺结节患者灌洗液中降钙素诊断髓样癌的临界点。 洗针液中降钙素的测定方法简单、无创、成本低、结果非常精确；通过使用截止点对其进行调节有可能指导哪些患者会从外科手术中受益或不会受益。 我们相信这个研究问题将通过这项多中心病例对照研究得到解答