黒色腫患者における自己樹状細胞および腫瘍溶解物による免疫化

同種異系黒色腫抽出物を負荷したDCを使用した黒色腫患者のワクチン接種。

チリにおけるこの研究は、低用量のrIL-2を補充または補充しない同種腫瘍抽出物をロードした樹状細胞ワクチンを使用して進行性悪性黒色腫を治療するための最初の第I相臨床試験を構成する。 化学療法と放射線療法は進行性黒色腫に対してのみ緩和効果をもたらし、これらの患者の予後は不良であるため、この試験ではチリの現実に適応し、高度な技術と低コストの組み合わせを可能にするプロトコルを開発する予定です。

チリ大学のヒト研究倫理委員会の承認を得た後、86 人の患者が募集され、これらの患者にはこれらのプロトコルの範囲と現実的な成功の見通しについて正式に説明を受けます。 その後、参加者は総合的な健康診断を受けて、全体的な健康状態を評価します。 参加者はチリ大学臨床病院の血液バンクで白血球除去療法を受けることになります。 末梢血単核球 (PBMC) は、チリ大学医学部生物医学研究所の抗腫瘍免疫学の研究室で Ficoll-Hypaque 勾配を使用して分離されます。 細胞の一部は将来の使用に備えて液体窒素中で凍結保存される予定だ。 約 1.8x108 個の PBMC を 6 ウェル培養プレートに置き、37℃、7% CO2 で 2 時間インキュベートします。 浮遊細胞である末梢血リンパ球 (PBL) は取り出され、後で使用するために凍結されます。 プラスチックに付着した単球は、500 U/mlのIL-4および800 U/mlのGM-CSFの存在下、無血清培地（AIM-V治療薬、GIBCO、BRL）中で7日間インキュベートされます。 。 6日目に、事前に無菌性をチェックした同種異系黒色腫細胞株からの腫瘍抽出物をDCにパルスし、37℃および7% CO2で6時間インキュベートした後、TNF-αで12〜18時間成熟刺激します。時間。 成熟した DC はフローサイトメトリーによって特徴付けられます。 約 10 ～ 20 x 106 個のパルス DC が皮下注射されます。 このルーチンは毎週、少なくとも 4 回、最大 6 回繰り返されます。 4回目の投与後、参加者の全身状態、臨床的退行の可能性、有害な副作用、および免疫系に対する治療の効果が評価されます。 この評価は、黒色腫抽出物とそれぞれの対照を使用した in vivo 遅延型過敏症 (DTH) アッセイを通じて行われます。 免疫応答測定用に計画されている in vitro アッセイには、ELISPOT による抗メラノーマ CTL 前駆体の検出、サイトカイン産生、増殖アッセイ、フローサイトメトリーによる CD4/CD8 比の定量などが含まれます。