血液透析患者における血清エオタキシンレベルと心筋損傷マーカーの関連性

研究デザインと患者集団 この横断的試験は、ヘルシンキ宣言および適用される規制に従って実施されます。 プロトコールは施設の倫理委員会に送られ、患者の書面によるインフォームドコンセントが得られます。 研究に参加するには、患者は少なくとも20歳で、少なくとも3か月間外来でHDを受けている必要があります。 すべての患者は、高流束膜と重炭酸塩透析液を使用して週に 3 回透析を受けました。 急性感染症または悪性腫瘍に罹患した患者は除外されます。 合計 400 人の長期 HD 患者が無作為に招待され、研究に登録されます。 医療記録は、研究に協力する医師によって被験者ごとに徹底的に検査されます。 基礎となる腎臓病、心血管疾患の病歴、その他の併存疾患などの情報は抽象化されます。 CVDの既往歴は、CADの病歴（心筋梗塞、冠動脈血管形成術/ステント留置術/バイパス手術、頸動脈内膜切除術/ステント留置術の病歴を含む）、脳血管疾患（CVD、例えば脳卒中）、非外傷性の病歴として定義された。下肢切断および下肢動脈バイパス手術/血管形成術/ステント留置術

測定 透析前の血液サンプルは平日の半ばに採取されます。採取後 30 分以内に、残りの血液を 3,000 g で 10 分間遠心分離し、直ちに小分けし、さらなる分析まで -80 °C で凍結します。 総血清コレステロールは、Hitachi 747 (Hitachi、Bohemia、NY、USA) を使用して、コレステロール エステラーゼ/コレステロール オキシダーゼ/ペルオキシダーゼの反応によって測定されます。 HDL コレステロールは、室温でポリエチレングリコールで沈殿させた後に定量されます。 血清グルコース濃度はグルコースオキシダーゼ法により測定されます。 低密度リポタンパク質コレステロールは、Friedewald 式を使用して計算されました。 総血清トリグリセリドは、グリセロール/リン酸/オキシダーゼおよびペルオキシダーゼの反応を通じて測定されました。 高感度 C 反応性タンパク質 (hsCRP) の血清レベルは、ベーリング比濁計 II (Dade Behring、東京、日本) を使用して測定されます。 IL-6 および MCP-1 の血清レベルは、市販の酵素結合免疫吸着アッセイ (Quantikine HS Immunoassaykit、R&D System、ミネアポリス、ミネソタ州、米国) によって測定されます。 血清 8-イソプロスタン濃度は、メーカーの指示に従い、検出限界 3 pg/mL の ELISA アッセイ (Cayman Chemical、米国ミシガン州アナーバー) を使用して測定しました。

血清エオタキシンレベルは、市販のELISAキット(R&D Systems、ミネアポリス、ミネソタ州、米国)を製造業者のプロトコールに従って使用して測定する。 簡単に説明すると、エオタキシンに対するマウス抗ヒト抗体は、血漿からエオタキシンを捕捉するために使用されます。 捕捉されたエオタキシンは、ビオチン化ヤギ抗ヒトエオタキシン抗体で検出されます。 洗浄後、プレートをストレプトアビジン-HRPとともにインキュベートし、適切な基質で発色させ、ELISAプレートリーダーを使用してOD450を測定します。 測定は、10 pg/ml のエオタキシンを検出できるアッセイで二重に行われます。 アッセイ内およびアッセイ間の変動係数の値は、それぞれ <4% および <6% です。

Siemens Atellica IM 高感度トロポニン I アッセイ (Siemens Healthineers) は、検出限界 1.6 ng/L、定量限界 2.5 ng/L の 3 部位サンドイッチ イムノアッセイです。 基準値の上限である 99 百分位は、2007 年の健康な個人のサンプルで女性では 34 ng/L、男性では 53 ng/L と決定され、単一閾値は 45 ng/L でした。 基準範囲の母集団では、患者の 75% が検出限界を超える値を示しました。 すべての測定は中央検査室で行われ、検査結果はすべての臨床情報を知らされずに研究チームに提供され、分析のために試験データベースにリンクされました。

血清アルブミンの酸化還元状態は、高速液体クロマトグラフィー (HPLC) でヒトメルカプトアルブミン (HMA)、ヒト非メルカプトアルブミン-1 (HNA-1)、およびヒト非メルカプトアルブミン-2 (HNA-2) に分画することによって決定されました。