Association of Serum Eotaxin Levels and Markers of Myocardiac Injury in Hemodialysis Patients

Studiedesign och patientpopulation Detta tvärsnittsförsök kommer att genomföras i enlighet med Helsingforsdeklarationen och tillämpliga bestämmelser. Protokollet kommer att skickas till den institutionella etiska kommittén och patienternas skriftliga informerade samtycke kommer att erhållas. För att inkluderas i studien kommer patienterna att vara minst 20 år gamla och på poliklinisk HD i minst 3 månader. Alla patienter dialyserades tre gånger i veckan med ett högflödesmembran och bikarbonatdialysatlösningar. Patienter kommer att uteslutas om de hade en akut infektion eller malignitet. Totalt 400 långvariga HD-patienter är slumpmässigt inbjudna och inskrivna i studien. De medicinska journalerna kommer att granskas noggrant för varje ämne av en samarbetande läkare i studien. Information som underliggande njursjukdom, kardiovaskulär sjukdomshistoria och andra komorbida sjukdomar abstraheras. En redan existerande historia av CVD definierades som en historia av CAD (inklusive en historia av hjärtinfarkt, kranskärlsangioplastik/stenting/bypass-kirurgi, karotisendarterektomi/stenting), cerebrovaskulär sjukdom (CVD, t.ex. stroke), icke-traumatisk amputation av nedre extremiteter och bypass-operation av nedre extremiteter/angioplastik/stenting

Mätningar Predialysblodprover erhålls mitt i veckan. Inom 30 minuter efter provtagningen centrifugeras det återstående blodet vid 3 000 g under 10 minuter, delas omedelbart i alikvoter och fryses vid -80 °C tills vidare analys. Det totala serumkolesterolet mäts genom reaktionen av kolesterolesteras/kolesteroloxidas/peroxidas, med användning av Hitachi 747 (Hitachi, Bohemia, NY, USA). HDL-kolesterol kvantifieras efter utfällning med polyetylenglykol vid rumstemperatur. Serumglukoskoncentrationer mäts med glukosoxidasmetoden. Lågdensitetslipoproteinkolesterol beräknades med användning av Friedewald-formeln. Totalt antal serumtriglycerider mättes genom reaktionen av glycerol/fosfat/oxidas och peroxidas. Serumnivåerna av högkänsligt C-reaktivt protein (hsCRP) mäts med en Behring Nephelometer II (Dade Behring, Tokyo, Japan). Serumnivåer av IL-6 och MCP-1 mäts med en kommersiellt tillgänglig enzymkopplad immunosorbentanalys (Quantikine HS Immunoassaykit, R&D System, Minneapolis, MN, USA). Serum 8-isoprostankoncentrationer mättes med hjälp av ELISA-analysen (Cayman Chemical, Ann Arbor, Michigan, USA) med en detektionsgräns på 3 pg/ml, enligt tillverkarens instruktioner.

Nivåer av eotaxin i serum kommer att bestämmas med hjälp av ett kommersiellt ELISA-kit (R&D-system, Minneapolis, MN, USA) enligt tillverkarens protokoll. I korthet, mus antihuman antikropp mot eotaxin används för att fånga eotaxin från plasma. Infångat eotaxin detekteras med biotynilerad get-antihuman eotaxin-antikropp. Efter tvättning inkuberas plattorna med streptavidin-HRP, framkallade med lämpligt substrat, och OD450 bestäms med användning av en ELISA-plattläsare. Mätningar görs i duplikat i en analys som kan detektera 10 pg eotaxin/ml. Variationskoefficienterna inom och mellan analyser är <4 % respektive <6 %.

Siemens Atellica IM High Sensitivity Troponin I-analys (Siemens Healthineers) är en sandwich-immunanalys med tre ställen med en detektionsgräns på 1,6 ng/L och en kvantifieringsgräns på 2,5 ng/L. Den övre referensgränsen 99:e centilen bestämdes i 2007 prover från friska individer som 34 ng/L hos kvinnor och 53 ng/L hos män, med en enkel tröskel på 45 ng/L. I referensintervallspopulationen hade 75 % av patienterna värden högre än detektionsgränsen. Alla mätningar gjordes på ett centralt laboratorium, som blindades för all klinisk information med resultat som lämnades till forskargruppen och kopplade till prövningsdatabasen för analys.

Redoxtillståndet för serumalbumin bestämdes genom att fraktionera det till humant merkaptalbumin (HMA), humant nonmerkaptalbumin-1 (HNA-1) och humant icke-merkaptalbumin-2 (HNA-2) med högpresterande vätskekromatografi (HPLC).