Association of Serum Eotaxin Levels and Markers of Myocardiac Injury in Hemodialyse Patients

Studiedesign og pasientpopulasjon Denne tverrsnittsstudien, og vil bli utført i samsvar med Helsinki-erklæringen og gjeldende regelverk. Protokollen vil bli sendt til den institusjonelle etiske komiteen og pasientenes skriftlige informerte samtykke vil bli innhentet. For å bli inkludert i studien vil pasienter være minst 20 år gamle og på poliklinisk HD i minst 3 måneder. Alle pasientene ble dialysert tre ganger i uken med høyfluxmembran og bikarbonatdialysatløsninger. Pasienter vil ekskluderes dersom de hadde en akutt infeksjon eller malignitet. Totalt 400 langtids-HD-pasienter er tilfeldig invitert og registrert i studien. De medisinske journalene vil bli grundig gjennomgått for hvert emne av en samarbeidende lege i studien. Informasjon som underliggende nyresykdom, kardiovaskulær sykdomshistorie og andre komorbide sykdommer abstraheres. En tidligere historie med CVD ble definert som en historie med CAD (inkludert en historie med hjerteinfarkt, koronar arterieangioplastikk/stenting/bypass-kirurgi, carotis endarterektomi/stenting), cerebrovaskulær sykdom (CVD, f.eks. hjerneslag), ikke-traumatisk amputasjon av underekstremiteter og bypass-operasjon i underekstremiteter/angioplastikk/stenting

Målinger Predialyseblodprøver innhentes på en midtukedag. Innen 30 minutter etter prøvetaking sentrifugeres det gjenværende blodet ved 3000 g i 10 minutter, alikvoteres umiddelbart og fryses ved -80 °C inntil videre analyse. Det totale serumkolesterolet måles gjennom reaksjonen av kolesterolesterase/kolesteroloksidase/peroksidase ved bruk av Hitachi 747 (Hitachi, Bohemia, NY, USA). HDL-kolesterol kvantifiseres etter utfelling med polyetylenglykol ved romtemperatur. Serumglukosekonsentrasjoner måles ved glukoseoksidasemetoden. Lavdensitetslipoproteinkolesterol ble beregnet ved å bruke Friedewald-formelen. Totalt serum triglyserider ble målt gjennom reaksjonen av glyserol/fosfat/oksidase og peroksidase. Serumnivåene av høysensitivt C-reaktivt protein (hsCRP) måles ved å bruke et Behring Nephelometer II (Dade Behring, Tokyo, Japan). Serumnivåer av IL-6 og MCP-1 måles med en kommersielt tilgjengelig enzymkoblet immunosorbentanalyse (Quantikine HS Immunoassaykit, R&D System, Minneapolis, MN, USA). Serum 8-isoprostankonsentrasjoner ble målt ved bruk av ELISA-analysen (Cayman Chemical, Ann Arbor, Michigan, USA) med en deteksjonsgrense på 3 pg/ml, i henhold til produsentens instruksjoner.

Serum-eotaksinnivåer vil bli bestemt ved hjelp av et kommersielt ELISA-sett (R&D-systemer, Minneapolis, MN, USA) i henhold til produsentens protokoll. Kort sagt, muse-antihumant antistoff mot eotaxin brukes til å fange eotaxin fra plasma. Fanget eotaxin påvises med biotynilert geit-antihumant eotaxin-antistoff. Etter vasking inkuberes platene med streptavidin-HRP, fremkalt med passende substrat, og OD450 bestemmes ved bruk av en ELISA plateleser. Målinger gjøres i duplikat i en analyse som kan påvise 10 pg eotaxin/ml. Variasjonskoeffisientene for intra- og inter-analysen er <4 % og <6 %, henholdsvis.

Siemens Atellica IM High Sensitivity Troponin I-analyse (Siemens Healthineers) er en tre-steds sandwich-immunoanalyse med en deteksjonsgrense på 1,6 ng/L og grense for kvantifisering på 2,5 ng/L. Den øvre referansegrensen 99. centil ble bestemt i 2007 prøver fra friske individer som 34 ng/L hos kvinner og 53 ng/L hos menn, med en enkelt terskel på 45 ng/L. I referanseområdepopulasjonen hadde 75 % av pasientene verdier høyere enn deteksjonsgrensen. Alle målinger ble utført ved et sentrallaboratorium, som ble blindet for all klinisk informasjon med resultater gitt til forskerteamet og koblet til prøvedatabasen for analyse.

Redokstilstanden til serumalbumin ble bestemt ved å fraksjonere det til humant merkaptalbumin (HMA), humant nonmerkaptalbumin-1 (HNA-1) og humant ikke-merkaptalbumin-2 (HNA-2) med høyytelses væskekromatografi (HPLC).