Association des taux sériques d'éotaxine et des marqueurs des lésions myocardiques chez les patients hémodialysés

Conception de l'étude et population de patients Cet essai transversal sera réalisé conformément à la Déclaration d'Helsinki et aux réglementations applicables. Le protocole sera envoyé au comité d'éthique institutionnel et le consentement éclairé écrit des patients sera obtenu. Pour être inclus dans l'étude, les patients seront âgés d'au moins 20 ans et sous HD ambulatoire pendant au moins 3 mois. Tous les patients ont été dialysés trois fois par semaine avec une membrane à haut flux et des solutions de dialysat bicarbonate. Les patients seront exclus s'ils avaient une infection aiguë ou une tumeur maligne. Au total, 400 patients MH de longue durée sont invités au hasard et inscrits dans l'étude. Les dossiers médicaux seront soigneusement examinés pour chaque sujet par un médecin collaborateur à l'étude. Des informations telles que la maladie rénale sous-jacente, les antécédents de maladies cardiovasculaires et d'autres maladies comorbides sont extraites. Des antécédents préexistants de MCV étaient définis comme des antécédents de coronaropathie (incluant des antécédents d'infarctus du myocarde, d'angioplastie/stenting/pontage coronarien, d'endartériectomie/stenting carotidienne), de maladie cérébrovasculaire (MCV, par exemple, accident vasculaire cérébral), non traumatique. amputation des membres inférieurs et pontage artériel des membres inférieurs/angioplastie/stenting

Mesures Des échantillons de sang de prédialyse sont obtenus un jour en milieu de semaine. Dans les 30 minutes suivant le prélèvement, le sang restant est centrifugé à 3 000 g pendant 10 minutes, immédiatement aliquoté et congelé à -80 °C jusqu'à une analyse plus approfondie. Le cholestérol sérique total est mesuré par la réaction cholestérol estérase/cholestérol oxydase/peroxydase, en utilisant Hitachi 747 (Hitachi, Bohemia, NY, USA). Le cholestérol HDL est quantifié après précipitation au polyéthylène glycol à température ambiante. Les concentrations sériques de glucose sont mesurées par la méthode de la glucose oxydase. Le cholestérol des lipoprotéines de basse densité a été calculé à l'aide de la formule de Friedewald. Les triglycérides sériques totaux ont été mesurés par la réaction glycérol/phosphate/oxydase et peroxydase. Les taux sériques de protéine C-réactive de haute sensibilité (hsCRP) sont mesurés à l'aide d'un néphélomètre Behring II (Dade Behring, Tokyo, Japon). Les taux sériques d'IL-6 et de MCP-1 sont mesurés par un test immuno-enzymatique disponible dans le commerce (Quantikine HS Immunoassaykit, R&D System, Minneapolis, MN, USA). Les concentrations sériques de 8-isoprostane ont été mesurées à l'aide du test ELISA (Cayman Chemical, Ann Arbor, Michigan, USA) avec une limite de détection de 3 pg/mL, conformément aux instructions du fabricant.

Les niveaux sériques d'éotaxine seront déterminés à l'aide d'un kit ELISA commercial (systèmes R&D, Minneapolis, MN, USA) selon le protocole du fabricant. En bref, l’anticorps antihumain de souris contre l’éotaxine est utilisé pour capturer l’éotaxine du plasma. L'éotaxine capturée est détectée avec un anticorps anti-éotaxine humaine de chèvre biotynilé. Après lavage, les plaques sont incubées avec de la streptavidine-HRP, développée avec un substrat approprié, et la DO450 est déterminée à l'aide d'un lecteur de plaques ELISA. Les mesures sont effectuées en double dans un test capable de détecter 10 pg d'éotaxine/ml. Les coefficients de variation intra et inter-essais sont respectivement <4 % et <6 %.

Le test Siemens Atellica IM High Sensitivity Troponin I (Siemens Healthineers) est un test immunologique sandwich à trois sites avec une limite de détection de 1,6 ng/L et une limite de quantification de 2,5 ng/L. La limite supérieure de référence du 99e centile a été déterminée dans des échantillons de 2007 provenant d'individus en bonne santé à 34 ng/L chez les femmes et à 53 ng/L chez les hommes, avec un seuil unique de 45 ng/L. Dans la population de référence, 75 % des patients présentaient des valeurs supérieures à la limite de détection. Toutes les mesures ont été effectuées dans un laboratoire central, qui ne connaissait pas toutes les informations cliniques et les résultats fournis à l'équipe de recherche et liés à la base de données de l'essai pour analyse.

L'état rédox de l'albumine sérique a été déterminé en la fractionnant en mercaptalbumine humaine (HMA), non mercaptalbumine humaine-1 (HNA-1) et non mercaptalbumine humaine-2 (HNA-2) par chromatographie liquide haute performance (HPLC).