Sammenslutning af serum-eotaxinniveauer og markører for myokardieskade hos hæmodialysepatienter

Undersøgelsesdesign og patientpopulation Dette tværsnitsforsøg vil blive udført i overensstemmelse med Helsinki-erklæringen og gældende regler. Protokollen vil blive sendt til den institutionelle etiske komité, og patienternes skriftlige informerede samtykke vil blive indhentet. For at blive inkluderet i undersøgelsen skal patienter være mindst 20 år gamle og i ambulant HD i mindst 3 måneder. Alle patienter blev dialyseret tre gange om ugen med en højfluxmembran og bicarbonatdialysatopløsninger. Patienter vil blive udelukket, hvis de havde en akut infektion eller malignitet. I alt 400 langvarige HS-patienter er tilfældigt inviteret og indskrevet i undersøgelsen. Lægejournalerne bliver grundigt gennemgået for hvert emne af en samarbejdsvillig læge i undersøgelsen. Information såsom underliggende nyresygdom, hjertekarsygdomshistorie og andre komorbide sygdomme abstraheres. En forudeksisterende historie med CVD blev defineret som en historie med CAD (herunder en historie med myokardieinfarkt, koronararterieangioplastik/stenting/bypass-operation, carotis endarterektomi/stenting), cerebrovaskulær sygdom (CVD, f.eks. slagtilfælde), ikke-traumatisk amputation af underekstremiteter, og underekstremitetsarterie-bypass-operation/angioplastik/stenting

Målinger Prædialyseblodprøver udtages midt på ugen. Inden for 30 minutter efter prøvetagning centrifugeres det resterende blod ved 3.000 g i 10 minutter, uddeles straks i portioner og fryses ved -80 °C indtil videre analyse. Det totale serumkolesterol måles gennem reaktionen af ​​cholesterolesterase/cholesteroloxidase/peroxidase under anvendelse af Hitachi 747 (Hitachi, Bohemia, NY, USA). HDL-kolesterol kvantificeres efter udfældning med polyethylenglycol ved stuetemperatur. Serumglukosekoncentrationer måles ved hjælp af glucoseoxidasemetoden. Lavdensitetslipoproteinkolesterol blev beregnet ved anvendelse af Friedewald-formlen. Totale serumtriglycerider blev målt gennem reaktionen af ​​glycerol/phosphat/oxidase og peroxidase. Serumniveauerne af højfølsomt C-reaktivt protein (hsCRP) måles ved anvendelse af et Behring Nephelometer II (Dade Behring, Tokyo, Japan). Serumniveauer af IL-6 og MCP-1 måles med et kommercielt tilgængeligt enzymbundet immunosorbent-assay (Quantikine HS Immunoassaykit, R&D System, Minneapolis, MN, USA). Serum 8-isoprostan-koncentrationer blev målt ved hjælp af ELISA-assayet (Cayman Chemical, Ann Arbor, Michigan, USA) med en detektionsgrænse på 3 pg/ml ifølge producentens instruktioner.

Serum-eotaxin-niveauer vil blive bestemt ved hjælp af et kommercielt ELISA-kit (R&D-systemer, Minneapolis, MN, USA) i henhold til producentens protokol. Kort fortalt bruges muse-antihumant antistof mod eotaxin til at opfange eotaxin fra plasma. Indfanget eotaxin påvises med biotynileret gede-antihumant eotaxin-antistof. Efter vask inkuberes pladerne med streptavidin-HRP, udviklet med passende substrat, og OD450 bestemmes ved anvendelse af en ELISA-pladelæser. Målinger udføres i to eksemplarer i et assay, der kan påvise 10 pg eotaxin/ml. Intra- og inter-assay-variationskoefficienterne er henholdsvis <4 % og <6 %.

Siemens Atellica IM High Sensitivity Troponin I-assay (Siemens Healthineers) er en sandwich-immunanalyse med tre steder med en detektionsgrænse på 1,6 ng/L og en kvantificeringsgrænse på 2,5 ng/L. Den øvre referencegrænse 99. centil blev i 2007-prøver fra raske individer bestemt til 34 ng/L hos kvinder og 53 ng/L hos mænd med en enkelt tærskel på 45 ng/L. I referenceområdepopulationen havde 75 % af patienterne værdier, der var større end detektionsgrænsen. Alle målinger blev foretaget på et centralt laboratorium, som blev blindet for al klinisk information med resultater givet til forskerholdet og knyttet til forsøgsdatabasen til analyse.

Redoxtilstanden af ​​serumalbumin blev bestemt ved at fraktionere det til humant mercaptalbumin (HMA), humant nonmercaptalbumin-1 (HNA-1) og humant non-mercaptalbumin-2 (HNA-2) med højtydende væskekromatografi (HPLC).