インフルエンザ A ウイルスとアテローム性動脈硬化性頸動脈プラークの不安定化 (VIRAL)

次のデータは医療記録から匿名で収集されます。

• 個人情報（年齢、性別）
• 併存疾患（心血管危険因子の存在：動脈性高血圧、喫煙、脂質異常症、虚血性心疾患、COPD、糖尿病、慢性腎不全、脳血管虚血性イベントの病歴）。
• インフルエンザワクチン接種歴;
• 臨床（体重、身長）。臨床実践に従って、患者は頸動脈内膜切除術を受けます。 手術室に入室すると、患者は研究に関係なく、外科手術のためにすでに配置されている末梢静脈アクセスから、特定の抗凝固剤（EDTA）を含む4本のチューブに4 mlの血液が採取されます。 これらの血液サンプルは、個別の分析のために適切に保管および処理されます。

手術中に除去されたアテローム性動脈硬化プラークのサンプルも、その後の調査のために適切に保管されます。

収集されたデータは専用のe-CRFに入力され、適切に分析されます。

血液サンプルの使用 末梢血単核球 (PBMC) は、パーコール勾配を使用して静脈血サンプルから分離および単離されます。 これらの細胞は、特定の市販キットを使用して、インフルエンザ A ウイルス抗原で適切に刺激されます。 このプロセスにより、脆弱性頸動脈プラークを有する患者のグループ（グループ A）と非脆弱性プラークを有する患者のグループ（グループ B）の両方において、ウイルスに対する免疫反応性を評価することが可能になります。 同じサンプルの血清について、炎症およびアテローム性動脈硬化プロセスに関与するいくつかのサイトカイン/ケモカイン (IL-6、IL-1β、TNF-α、IFN-γ、MCP-1) の定量的発現が ELISA を使用して評価されます。方法）。

急性 IV A 感染症を検査するために、適切な抗体評価も行われます。

血管サンプルの使用 アテローム性動脈硬化症プラークサンプルに対して組織学検査が実施され、患者の 2 つのグループ (A、脆弱性プラーク、B、非脆弱性プラーク) を定義するような方法で、プラークの脆弱性またはその他を決定することができます。 ) 分析する必要があります。 そして比較してください。

ウェスタンブロットアッセイおよび免疫組織化学分析も同じサンプルに対して実行され、いくつかの分子（V-CAM、I-CAM、E-セレクチン）およびスカベンジャーマクロファージ細胞を同定する受容体（CD36およびレクチン）の定量的および定性的発現を評価します。 Ox-LDL-Receptor 1 のように。

最後に、同じサンプルは、RT-PCR を介して血液サンプルで評価される同じサイトカイン/ケモカインの定量的研究のために ELISA 分析に供されます。 ウイルス RNA の存在の可能性は、ワンステップ RT-PCR によってアテローム性動脈硬化プラーク上で評価されます。また、同じ市販キットで刺激された適切な細胞培養物を調製した後、IV A ウイルスに対する T 特異的細胞反応性も評価されます。 Kellerらによって記載された方法に従って、末梢血のPMBCを刺激するために使用されます。 付随的に、プラーク中にウイルスまたは細菌の DNA が存在する可能性がチェックされます。 特に、ヒトポリオーマウイルスおよびヒトヘルペスウイルス（単純ヘルペスウイルス7および2、水痘帯状疱疹ウイルス、エプスタイン・バーウイルス、ヒトサイトメガロウイルス、ヒトヘルペスウイルス6）およびクラミジア由来のDNAの存在が、リアルタイムPCRによって分析されます。

ウイルス IV A に対する特異的な T 細胞反応性の評価 Keller らによって記載された方法を参考にして、刺激指数 (SI) を血液サンプルとアテローム性動脈硬化プラークの両方で 1 分あたりの平均カウントとして評価します (ウイルスを含む培養物のcpm)を、ウイルスを含まない並行培養物の平均cpmで割ったもの。

続いて、各患者のプラーク T 細胞の SI と末梢血 T 細胞の SI の比率に基づいて反応性が計算され、比率が > 2 の場合 (T 細胞の SI が T である患者) が反応性の患者と定義されます。比が 2 未満の場合は反応しません（後者の場合、末梢血の T 細胞の SI がプラークの T 細胞よりも大きい患者、またはプラークの SI が大きい患者）。 T 細胞プラーク T は末梢血のプラーク T よりも有意に高くありません）。