Influensa A-virus og destabilisering av aterosklerotiske carotisplakk (VIRAL)

Følgende data vil bli samlet inn anonymt fra medisinske journaler:

• personlige detaljer (alder, kjønn);
• komorbiditet (tilstedeværelse av kardiovaskulære risikofaktorer: arteriell hypertensjon, røyking, dyslipidemi, iskemisk hjertesykdom, KOLS, diabetes mellitus; kronisk nyresvikt, historie med cerebrovaskulære iskemiske hendelser);
• historie med influensavaksinasjon;
• klinisk (vekt, høyde); I henhold til klinisk praksis vil pasienter gjennomgå carotis-endarterektomi. Ved innreise på operasjonssalen vil pasientene bli tatt 4 ml blod i 4 rør med et spesifikt antikoagulant (EDTA), fra en perifer venøs tilgang som allerede er plassert for den kirurgiske prosedyren uavhengig av studien. Disse blodprøvene vil bli lagret og behandlet hensiktsmessig for individuelle analyser.

Prøver av aterosklerotisk plakk fjernet under operasjonen vil også bli lagret hensiktsmessig for senere undersøkelser.

Dataene som samles inn vil bli lagt inn i den dedikerte e-CRF og analysert på riktig måte.

Bruk av blodprøver Perifere blodmononukleære celler (PBMC) vil bli separert og isolert fra den venøse blodprøven ved hjelp av en Percoll-gradient. Disse cellene vil bli hensiktsmessig stimulert med influensa A-virusantigener ved bruk av spesifikke kommersielle sett. Denne prosessen vil tillate evaluering av immunreaktivitet mot viruset, både i gruppen av pasienter med sårbart karotisplakk (gruppe A) og hos de med ikke-sårbar plakk (gruppe B). På serumet til de samme prøvene vil det kvantitative uttrykket av enkelte cytokiner/kjemokiner involvert i betennelse og den aterosklerotiske prosessen (IL-6, IL-1β, TNF-α, IFN-γ, MCP-1) bli evaluert ved bruk av ELISA metode).

Den passende antistoffevalueringen vil også bli utført for å teste for eventuelle akutte IV A-infeksjoner.

Bruk av vaskulære prøver Histologiske undersøkelser vil bli utført på aterosklerotiske plakkprøver som vil gjøre det mulig å bestemme sårbarheten eller ikke til plakket, på en slik måte at de to gruppene av pasienter defineres (A, sårbar plakk; B, ikke-sårbar plakk) ) som skal analyseres. og sammenligne.

Western-Blot-analyser og immunhistokjemiske analyser vil også bli utført på de samme prøvene for å evaluere det kvantitative og kvalitative uttrykket av noen molekyler (V-CAM, I-CAM, E-Selectins) og reseptorer som identifiserer scavenger makrofagceller (CD36 og Lektiner - Som Ox-LDL-reseptor 1.

Til slutt vil de samme prøvene bli utsatt for ELISA-analyse for kvantitativ forskning av de samme cytokinene/kjemokinene som er evaluert på blodprøven via RT-PCR. Den mulige tilstedeværelsen av viralt RNA vil bli evaluert på de aterosklerotiske plakkene ved ett-trinns RT-PCR, så vel som den T-spesifikke cellereaktiviteten til IV A-viruset etter klargjøring av passende cellekulturer som vil bli stimulert med det samme kommersielle settet brukes til å stimulere PMBC av perifert blod, i henhold til metoden beskrevet av Keller et al. I tillegg vil den mulige tilstedeværelsen av viralt eller bakterielt DNA i plakkene bli sjekket. Spesielt vil tilstedeværelsen av DNA fra humant polyomavirus og humant herpesvirus (herpes simplex-virus 7 og 2, varicella zoster-virus, Epstein-Barr-virus, humant cytomegalovirus, humant herpesvirus 6) og klamydia analyseres gjennom sanntids-PCR.

Evaluering av spesifikk T-celle-reaktivitet mot virus IV A Ved å ta som referanse metoden beskrevet av Keller et al, vil stimuleringsindeksen (SI) bli evaluert, både på blodprøven og på aterosklerotisk plakk, som gjennomsnittlig antall per minutt ( cpm) av kulturer med viruset, delt på gjennomsnittlig cpm for parallelle kulturer uten virus.

Deretter vil reaktiviteten beregnes basert på forholdet mellom SI av plakk T-cellene og SI av de perifere blod-T-cellene for hver pasient, og definere responsive pasienter hvis forholdet er > 2 (pasienter med SI av T-cellene T av plakket betydelig høyere enn det i det perifere blodet), og reagerer ikke hvis forholdet er < 2 (i det siste tilfellet, pasienter med SI av T-cellene i det perifere blodet større enn plakkets, eller med SI på T-cellene Plaque T ikke signifikant høyere enn de i perifert blod).