第一大臼歯抜髄における炎症誘発性サイトカインの有効性

虫歯は小児によく見られる慢性感染症です。 冠状動脈髄液切開治療は、臨床的にも放射線写真的にも無症候性の深い虫歯病変のある歯に一般的に好まれます。 この治療法の成功は、歯髄の炎症状態と使用される材料に大きく依存します。 歯髄切除治療の臨床的成功を予測するには、歯髄炎症の重症度も評価する必要があります。 可逆性歯髄炎と不可逆性歯髄炎の臨床的区別を助ける分子的アプローチは、歯髄の炎症状態を正確に評価することにより、重要な歯髄治療の成功率を高めることができる。 進行した歯髄炎症におけるさまざまなメディエーターの増加は多くのこれまでの研究で調べられてきたが、歯髄炎症に関与する多くの生体分子の役割はまだ解明されていない。 炎症性歯髄疾患は複雑な性質を持っているため、少数のメディエーターだけでは進行した炎症性疾患を診断するのに十分な情報を提供できる可能性は低いです。 したがって、新しいメディエーターを特定することを目的とした研究は、依然として歯科分野で重要です。 2004 年に発見されたプレセプシンは、医学における細菌性疾患の早期診断において非常に重要な、高い感度と特異性を備えたバイオマーカーです。 歯科文献を検討すると、歯髄内の細菌性炎症の検出に関してプレセプシンが評価されていないことが観察され、このバイオマーカーは歯髄炎症の早期検出に使用できると考えられています。 したがって、患者キットを使用してプレセプシンのレベルを測定する機能により、歯髄の炎症を定量的に評価でき、正確な歯髄治療の提供に役立ちます。私たちの研究の目的は、細菌で迅速に検出できる新しいバイオマーカーであるプレセプシンが存在するかどうかを調査することです。また、歯髄感染症の検出におけるメディエーターとしても使用でき、歯髄炎症の信頼できるマーカーである IL-8 および IL-6 のレベルを評価し、治療の成功に対するこれらのメディエーターの効果を比較することもできます。歯髄切開治療で使用される最も成功した材料、MTA、Neo MTA、Biodentine、酸化亜鉛オイゲノール。

この研究は、アタテュルク大学医学部倫理委員会の承認（日付：2021年5月/セッション番号：04/決定番号：66）およびヘルシンキ宣言のガイドラインに従って実施されました。 また、小児患者の保護者には治療前に手順について十分な説明を受け、書面による同意を得ました。 当初は、全身疾患がなく、歯髄切除の適応となる第一第二大臼歯を少なくとも1本有する4～9歳の合計75人の小児（女子36人、男子39人）が研究に含まれ、4つの歯髄切除用薬剤（MTA、Biodentine™、 NeoMTA™ および ZOE) は、30 歯からなる 4 つの研究グループにランダムに分けられ、合計 120 歯に抜髄が適用されました。

研究グループをランダムに分散するには、http://www.randomizer.org/ の Research Randomizer (バージョン 4.0) コンピュータ ソフトウェアを使用します。 を使用して抜歯を開始する前にリストを作成し、それに応じて抜歯薬剤を使用しました。

治療およびサンプル保管のプロトコール:

視認性を高めるために、局所麻酔後に抜歯が必要な歯の上にラバーダムが配置されます。 歯内腔にアクセスするには、まず齲蝕組織を除去し、ダイヤモンド丸型バー (番号:18) で歯髄室の屋根を外し、滅菌タングステンカーバイド丸型バー (番号:14) を取り付けた低速コントラアングルハンドピースを使用して冠状組織を除去し、残った歯髄組織を掘削機で除去します。

歯髄出血を管理する前に、滅菌綿ペレットを歯髄組織の上に 30 ～ 45 秒間置きました。歯髄血液サンプルを採取するために、1mg の生理食塩水を含むヘパリンコートチューブ (Vacutainer、BD、USA) に検体を採取し、試験日まで 6 か月間 -20℃ (-4.0°F) で保存しました。

次いで、０．５％ＮａＯＣｌを管の開口部上に３０秒間配置することによって歯髄の止血を達成した。 歯髄出血がコントロールされていた第一大臼歯を 4 つの異なる研究グループ (それぞれ ProRoot MTA、Biodentine™、NeoMTA™、ZOE) にランダムに割り当て、歯髄切除術で治療しました。 研究で使用されたすべての歯髄切開薬の上にグラスアイオノマーセメントが塗布され、歯髄切開された歯はステンレススチールクラウン（SSC）で修復されました。

解凍プロセスと評価:

サンプルを室温で解凍し、4000 rpmで15分間遠心分離しました。 次に、綿ペレットを試験管から取り出し、酵素結合免疫測定法 (ELISA) [ヒト プレセプシン ELISA キット (カタログ番号:E3754Hu、BT LAB、中国)、ヒトIL-6 ELISA キット (カタログ番号:E0090Hu、BT LAB、中国)、ヒト IL-8 ELISA キット (カタログ番号:E0089Hu、BT LAB、中国)] はメーカーの指示に従ってテストします。 プレセプシン、IL-6、および IL-8 のキット測定範囲は、それぞれ 5 ～ 1000 ng/L、2 ～ 600 ng/L、および 5 ～ 1000 ng/L でした。 アッセイ間 CV は、すべてのバイオマーカーについて 10% 未満でした。

臨床および放射線検査による評価方法:

第一第二大臼歯は、治療後 6 か月目と 12 か月目に臨床的および X 線写真的に評価されました。

自然痛または刺激痛、前庭溝の腫れ、瘻孔、病理学的可動性、打診および触診に対する過敏症、歯髄切除した歯に隣接する局所リンパ節腫脹が臨床的に評価され、これらの症状のいずれかの存在が歯髄切除の失敗とみなされました。

根尖周囲または分岐部領域の X 線透過性、内部および外部の歯根吸収、石灰化した根管、拡大した歯根膜を X 線撮影で評価し、これらの症状のいずれかの存在も失敗とみなされます。

さらに、X線写真での根尖周囲または分岐部領域の病変の存在も失敗として認められ、これらの歯は根管治療または抜歯を受けました。 さらに、歯根内部吸収を起こした歯はX線撮影では失敗とみなされ、何らかの症状が現れるまで経過観察が行われました。

統計分析 本研究では、記述統計 (数、比、平均、標準偏差、最小および最大変数) を使用して一連のデータを要約しました。 フィッシャーの直接確率検定を使用して、治療前の臨床所見と、病状がより明らかになる治療後 12 か月目に発症した歯の病状との関係を分析しました。 歯髄炎症性バイオマーカーの平均レベルと治療後 12 か月目に発生した歯の病状との関係を、マンホイットニー U 検定を使用して分析しました。 マンホイットニー U 検定も、炎症性バイオマーカーの平均レベルと臨床所見を比較するために使用されました。 クラスカル ウォリス テストを使用して、使用した抜歯薬剤による炎症性バイオマーカーの平均スコア間の差異を比較しました。

受信者動作特性 (ROC) 分析を使用して閾値を計算し、得られたこれらの値を使用して、歯髄切除材料グループの最高のバイオマーカー スコアを決定しました。 すべての研究分析は、IBM® SPSS® Statistics 25 を使用して、有意水準 0.05 で実行されました。