Efficacité des cytokines proinflammatoires dans la pulpotomie molaire primaire

La carie dentaire est une maladie infectieuse chronique fréquemment rencontrée chez les enfants. Le traitement par pulpotomie coronaire est généralement préféré pour les dents présentant des lésions cariées profondes qui sont asymptomatiques cliniquement et radiographiquement. Le succès de cette méthode de traitement dépend fortement de l’état inflammatoire de la pulpe et des matériaux utilisés. Pour prédire le succès clinique du traitement par pulpotomie, la gravité de l'inflammation pulpaire doit également être évaluée. Une approche moléculaire qui facilite la distinction clinique entre pulpite réversible et irréversible peut augmenter le taux de réussite du traitement pulpaire vital en évaluant avec précision l’état inflammatoire de la pulpe. Bien que l'augmentation de divers médiateurs dans l'inflammation pulpaire avancée ait été examinée dans de nombreuses études antérieures, le rôle de nombreuses biomolécules impliquées dans l'inflammation pulpaire n'a pas encore été déterminé. En raison de la nature complexe de la maladie inflammatoire de la pulpe, il est peu probable qu’un petit nombre de médiateurs puissent fournir suffisamment d’informations pour diagnostiquer une maladie inflammatoire avancée. Les études visant à identifier de nouveaux médiateurs restent donc pertinentes en dentisterie. La presepsine, découverte en 2004, est un biomarqueur de haute sensibilité et spécificité très important dans le diagnostic précoce des maladies bactériennes en médecine. Lorsque l’on examine la littérature dentaire, on observe que la présepsine n’a pas été évaluée pour la détection de l’inflammation bactérienne dans la pulpe, et on pense que ce biomarqueur pourrait être utilisé pour la détection précoce de l’inflammation pulpaire. Ainsi, grâce à la possibilité de mesurer les niveaux de présepsine à l'aide de kits destinés aux patients, l'inflammation pulpaire peut être évaluée quantitativement, contribuant ainsi à fournir des traitements pulpaires précis. Le but de notre recherche est d'étudier si la présepsine, un nouveau biomarqueur pouvant être rapidement détecté dans les bactéries infections, peut également être utilisé comme médiateur dans la détection des infections pulpaires et pour évaluer les niveaux des marqueurs fiables de l'inflammation pulpaire, IL-8 et IL-6, en comparant l'effet de ces médiateurs sur le succès du traitement avec le matériaux les plus performants utilisés dans le traitement de pulpotomie, MTA, Neo MTA, Biodentine et Oxyde de zinc eugénol.

Cette étude a été menée conformément à l'approbation du comité d'éthique de la Faculté de médecine de l'Université Atatürk (Date : 05.2021/ Session n° 04/ Décision n° 66) et aux lignes directrices de la Déclaration d'Helsinki. Les parents des enfants patients ont également été pleinement informés des procédures avant le traitement et leurs consentements écrits ont été obtenus. Initialement, un total de 75 enfants âgés de 4 à 9 ans (36 filles et 39 garçons) sans maladie systémique et présentant au moins une deuxième molaire primaire indiquée pour une pulpotomie ont été inclus dans l'étude et 4 agents de pulpotomie (MTA, Biodentine™, NeoMTA™ et ZOE) ont été répartis au hasard en quatre groupes d'étude de 30 dents et une pulpotomie a été appliquée à un total de 120 dents.

Afin de répartir de manière aléatoire les groupes d'étude, le logiciel informatique Research Randomizer (version 4.0) de http://www.randomizer.org/ a été utilisé pour générer une liste avant de commencer la pulpotomie et des agents de pulpotomie ont été utilisés en conséquence.

Protocoles de traitement et de stockage des échantillons :

Pour une meilleure visibilité, une digue en caoutchouc est placée sur la dent nécessitant une pulpotomie après anesthésie locale. La cavité endodontique a été accessible en retirant d'abord le tissu carieux, en ouvrant le toit de la chambre pulpaire avec une fraise ronde diamantée (n° 18), en retirant le tissu coronaire à l'aide d'une fraise ronde stérile en carbure de tungstène (n° 14) montée sur un contre-angle à basse vitesse et nettoyer le tissu pulpaire restant avec une excavatrice.

Avant de gérer l'hémorragie pulpaire, une pastille de coton stérile a été placée sur le tissu pulpaire pendant 30 à 45 secondes. Afin d'obtenir des échantillons de sang pulpaire, les échantillons ont été collectés dans des tubes enduits d'héparine (Vacutainer, BD, USA) avec 1 mg de solution saline et ils ont été conservés à -20 °C (-4,0 °F) pendant 6 mois jusqu'au jour du test.

Ensuite, l'hémostase pulpaire a été obtenue en plaçant du NaOCl à 0,5 % sur les orifices des canaux pendant 30 secondes. Les molaires primaires, dans lesquelles l'hémorragie pulpaire était contrôlée, ont été assignées au hasard à 4 groupes d'étude différents (ProRoot MTA, Biodentine™, NeoMTA™ et ZOE respectivement) et ont été traitées par pulpotomie. Du ciment verre ionomère a été appliqué sur tous les médicaments pour pulpotomie utilisés dans l'étude et les dents pulpotomisées ont été restaurées avec des couronnes en acier inoxydable (SSC).

Processus de décongélation et évaluation :

Les échantillons ont été décongelés à température ambiante et centrifugés à 4 000 tr/min pendant 15 min. Ensuite, les boulettes de coton ont été retirées des tubes à essai et les niveaux de présepsine, d'IL-6 et d'IL-8 ont été mesurés à l'aide d'un test immuno-enzymatique (ELISA) [kit ELISA de présepsine humaine (Cat.No: E3754Hu, BT LAB, Chine), Human Kit ELISA IL-6 (Cat.No: E0090Hu, BT LAB, Chine), Kit ELISA IL-8 humain (Cat.No: E0089Hu, BT LAB, Chine)] test conformément aux instructions du fabricant. Les plages de mesure du kit pour la présepsine, l'IL-6 et l'IL-8 étaient respectivement de 5 à 1 000 ng/L, 2 à 600 ng/L et 5 à 1 000 ng/L. Le CV inter-essais était <10 % pour tous les biomarqueurs.

Méthode d'évaluation clinique et radiographique :

Les secondes molaires primaires ont été évaluées cliniquement et radiographiquement aux 6e et 12e mois post-traitement.

Des douleurs spontanées ou stimulées, des gonflements du sillon vestibulaire, de la fistule, une mobilité pathologique, une sensibilité à la percussion et à la palpation, une lymphadénopathie régionale adjacente aux dents pulpotomisées ont été cliniquement évaluées et la présence de l'un de ces symptômes a été considérée comme un échec de pulpotomie.

Les radioclartés dans les zones périapicales ou de furcation, les résorptions radiculaires internes et externes, les canaux radiculaires calcifiés, l'élargissement du ligament parodontal ont été évalués radiographiquement et la présence de l'un de ces symptômes a également été considérée comme un échec.

De plus, la présence de lésions dans les zones périapicales ou de furcation sur les radiographies a également été acceptée comme un échec et ces dents ont subi un traitement de canal ou une extraction. De plus, les dents présentant une résorption radiculaire interne étaient considérées comme défaillantes radiographiquement et elles étaient simplement suivies jusqu'à l'apparition de tout symptôme.

Analyse statistique Des statistiques descriptives (nombre, ratio, moyenne, écart type, variables minimales et maximales) ont été utilisées pour résumer l'ensemble des données de la présente étude. Le test exact de Fisher a été utilisé pour analyser la relation entre les résultats cliniques avant le traitement et les pathologies dentaires développées au 12e mois après le traitement, lorsque les pathologies sont devenues plus apparentes. La relation entre les niveaux moyens de biomarqueurs inflammatoires pulpaires et les pathologies dentaires survenues au 12ème mois après le traitement a été analysée à l'aide du test U de Mann-Whitney. Le test Mann-Whitney U a également été utilisé pour comparer les niveaux moyens de biomarqueurs inflammatoires et les résultats cliniques. Le test de Kruskal Wallis a été utilisé pour comparer les différences entre les scores moyens des biomarqueurs inflammatoires selon les agents de pulpotomie utilisés.

Les valeurs seuils ont été calculées avec l'analyse des caractéristiques de fonctionnement du récepteur (ROC), puis ces valeurs obtenues ont été utilisées pour déterminer les scores de biomarqueurs les plus élevés dans les groupes de matériaux de pulpotomie. Toutes les analyses de l'étude ont été effectuées avec IBM® SPSS® Statistics 25 à un niveau de signification de 0,05.