Werkzaamheid van pro-inflammatoire cytokines bij de primaire molaire pulpotomie

Tandbederf is een veel voorkomende chronische infectieziekte bij kinderen. Behandeling van coronaire pulpotomie heeft over het algemeen de voorkeur voor tanden met diepe cariëslaesies die klinisch en radiografisch asymptomatisch zijn. Het succes van deze behandelmethode is sterk afhankelijk van de ontstekingsstatus van de pulpa en de gebruikte materialen. Bij het voorspellen van het klinische succes van een pulpotomiebehandeling moet ook de ernst van de pulpa-ontsteking worden geëvalueerd. Een moleculaire benadering die helpt bij het klinische onderscheid tussen reversibele en onomkeerbare pulpitis kan het succespercentage van vitale pulpatherapie vergroten door de ontstekingsstatus van de pulpa nauwkeurig te beoordelen. Hoewel de toename van gevorderde pulpa-ontsteking door verschillende mediatoren in veel eerdere onderzoeken is onderzocht, is de rol van veel biomoleculen die betrokken zijn bij pulpa-ontsteking nog niet vastgesteld. Vanwege de complexe aard van inflammatoire pulpaziekte is het onwaarschijnlijk dat een klein aantal mediatoren voldoende informatie zou verschaffen om gevorderde ontstekingsziekte te diagnosticeren. Daarom blijven onderzoeken gericht op het identificeren van nieuwe mediatoren relevant in de tandheelkunde. Presepsin, ontdekt in 2004, is een biomarker met een hoge gevoeligheid en specificiteit die van groot belang is bij de vroege diagnose van bacteriële ziekten in de geneeskunde. Wanneer de tandheelkundige literatuur wordt bestudeerd, wordt opgemerkt dat presepsine niet is geëvalueerd voor de detectie van bacteriële ontstekingen in de pulpa, en er wordt aangenomen dat deze biomarker zou kunnen worden gebruikt voor de vroege detectie van pulpa-ontsteking. Dankzij de mogelijkheid om presepsineniveaus te meten met behulp van patiëntenkits, kan pulpa-ontsteking kwantitatief worden geëvalueerd, wat helpt bij het bieden van nauwkeurige pulpabehandelingen. Het doel van ons onderzoek is om te onderzoeken of presepsine, een nieuwe biomarker die snel kan worden gedetecteerd in bacteriële infecties, kan ook worden gebruikt als mediator bij de detectie van pulpa-infecties, en om de niveaus van de betrouwbare markers van pulpa-ontsteking, IL-8 en IL-6, te evalueren, waarbij het effect van deze mediatoren op het succes van de behandeling wordt vergeleken met de meest succesvolle materialen gebruikt bij pulpotomiebehandeling, MTA, Neo MTA, Biodentine en Zinkoxide eugenol.

Dit onderzoek werd uitgevoerd in overeenstemming met de goedkeuring van de ethische commissie van de Faculteit der Geneeskunde van de Universiteit van Atatürk (datum: 05.2021/sessie nr. 04/besluit nr. 66) en de richtlijnen van de Verklaring van Helsinki. Ook de ouders van kindpatiënten werden voorafgaand aan de behandeling uitgebreid geïnformeerd over de procedures en hun schriftelijke toestemming werd verkregen. Aanvankelijk werden in totaal 75 kinderen in de leeftijd van 4 tot 9 jaar oud (36 meisjes en 39 jongens) zonder systemische ziekte en met ten minste één primaire tweede molaar geïndiceerd voor pulpotomie, in het onderzoek opgenomen en werden 4 pulpotomiemiddelen (MTA, Biodentine™, NeoMTA™ en ZOE) werden willekeurig verdeeld in vier onderzoeksgroepen van 30 tanden en pulpotomie werd toegepast op in totaal 120 tanden.

Om de studiegroepen willekeurig te verdelen, is de computersoftware Research Randomizer (versie 4.0) van http://www.randomizer.org/ werd gebruikt om een ​​lijst te genereren voordat met pulpotomie werd begonnen en er werden dienovereenkomstig pulpotomiemiddelen gebruikt.

Protocollen voor behandeling en monsteropslag:

Voor een betere zichtbaarheid wordt er een rubberdam over de tand geplaatst, waarvoor een pulpotomie nodig is na plaatselijke verdoving. De endodontische holte werd bereikt door eerst het carieuze weefsel te verwijderen, de pulpakamer te ontmantelen met een ronde diamantboor (nr.:18), het coronale weefsel te verwijderen met behulp van een steriele ronde boor van wolfraamcarbide (nr.:14), gemonteerd op een langzaam draaiend hoekstuk en het resterende pulpaweefsel opruimen met een graafmachine.

Voordat de pulpabloeding werd aangepakt, werd een steriel wattenbolletje gedurende 30-45 seconden over het pulpaweefsel geplaatst. Om pulpale bloedmonsters en specimens te verkrijgen werden ze verzameld in met heparine gecoate buizen (Vacutainer, BD, VS) met 1 mg zoutoplossing en werden ze gedurende 6 maanden bij -20 oC (-4,0 °F) bewaard tot de dag van testen.

Vervolgens werd pulpale hemostase bereikt door gedurende 30 seconden 0,5% NaOCl over de kanaalopeningen te plaatsen. Primaire kiezen, waarbij de pulpabloeding onder controle was, werden willekeurig toegewezen aan 4 verschillende onderzoeksgroepen (respectievelijk ProRoot MTA, Biodentine™, NeoMTA™ en ZOE) en werden behandeld met pulpotomie. Glasionomeercement werd aangebracht op alle pulpotomiemedicijnen die in het onderzoek werden gebruikt en pulpotomie-tanden werden hersteld met roestvrijstalen kronen (SSC's).

Ontdooiproces en beoordeling:

Monsters werden bij kamertemperatuur ontdooid en gedurende 15 minuten bij 4000 rpm gecentrifugeerd. Vervolgens werden wattenpellets uit de reageerbuizen verwijderd en werden de niveaus van presepsine, IL-6 en IL-8 gemeten met behulp van enzymgekoppelde immunoassay (ELISA) [Human presepsin ELISA kit (Cat.No: E3754Hu, BT LAB, China), Human IL-6 ELISA Kit (Cat.nr:E0090Hu,BT LAB,China), Menselijke IL-8 ELISA Kit (Cat.nr:E0089Hu, BT LAB,China)] testen in overeenstemming met de instructies van de fabrikant. De meetbereiken van de kit voor presepsine, IL-6 en IL-8 waren respectievelijk 5-1000 ng/l, 2-600 ng/l en 5-1000 ng/l. De inter-assay-CV was <10% voor alle biomarkers.

Klinische en radiografische beoordelingsmethode:

De primaire tweede molaren werden klinisch en radiografisch beoordeeld in de 6e en 12e maand na de behandeling.

Spontane of gestimuleerde pijn, zwellingen in de vestibulaire sulcus, fistel, pathologische mobiliteit, gevoeligheid voor percussie en palpatie, regionale lymfadenopathie grenzend aan de pulpotomie werden klinisch beoordeeld en de aanwezigheid van een van deze symptomen werd beschouwd als een mislukte pulpotomie.

Radiolucentie in de periapicale of furcatiegebieden, interne en externe wortelresorpties, verkalkte wortelkanalen en verwijde parodontale ligamenten werden radiografisch beoordeeld en de aanwezigheid van een van deze symptomen werd ook als falen beschouwd.

Bovendien werd de aanwezigheid van laesies in periapicale of furcatiegebieden op röntgenfoto's ook als falen aanvaard en ondergingen deze tanden een wortelkanaalbehandeling of extractie. Bovendien werden tanden met interne wortelresorptie als radiografisch defect beschouwd en werden ze gewoon gevolgd totdat er enig symptoom optrad.

Statistische analyse Beschrijvende statistieken (aantal, verhouding, gemiddelde, standaarddeviatie, minimum- en maximumvariabelen) werden gebruikt om de reeks gegevens in het huidige onderzoek samen te vatten. De Fisher's exact-test werd gebruikt om de relatie te analyseren tussen klinische bevindingen vóór de behandeling en tandheelkundige pathologieën die zich ontwikkelden in de 12e maand na de behandeling, toen de pathologieën duidelijker werden. De relatie tussen de gemiddelde niveaus van pulpale inflammatoire biomarkers en tandheelkundige pathologieën die optraden in de 12e maand na de behandeling werd geanalyseerd met behulp van de Mann-Whitney U-test. De Mann-Whitney U-test werd ook gebruikt om de gemiddelde niveaus van inflammatoire biomarkers en klinische bevindingen te vergelijken. De Kruskal Wallis-test werd gebruikt om de verschillen tussen de gemiddelde scores van inflammatoire biomarkers door de gebruikte pulpotomiemiddelen te vergelijken.

Drempelwaarden werden berekend met behulp van Receiver Operating Characteristics (ROC)-analyse en vervolgens werden deze verkregen waarden gebruikt om de hoogste biomarkerscores in de pulpotomiemateriaalgroepen te bepalen. Alle onderzoeksanalyses werden uitgevoerd met IBM® SPSS® Statistics 25 op een significantieniveau van 0,05.