Effekten av proinflammatoriska cytokiner i den primära molarpulpotomien

Karies är en vanlig kronisk infektionssjukdom hos barn. Behandling med kranskärlspulpotomi är generellt att föredra för tänder med djupa rötskador som är kliniskt och radiografiskt asymtomatiska. Framgången för denna behandlingsmetod är starkt beroende av pulpans inflammatoriska status och de material som används. För att förutsäga den kliniska framgången för behandling av pulpotomi måste också svårighetsgraden av pulpanflammation utvärderas. Ett molekylärt tillvägagångssätt som hjälper till med den kliniska skillnaden mellan reversibel och irreversibel pulpit kan öka framgångsfrekvensen för vital pulpaterapi genom att noggrant bedöma pulpans inflammationsstatus. Även om olika mediatorers ökningar av avancerad pulpainflammation har undersökts i många tidigare studier, har rollen för många biomolekyler involverade i pulpainflammation ännu inte fastställts. På grund av den komplexa karaktären hos inflammatorisk pulpasjukdom är det osannolikt att ett litet antal mediatorer skulle ge tillräcklig information för att diagnostisera avancerad inflammatorisk sjukdom. Därför är studier som syftar till att identifiera nya mediatorer fortfarande relevanta inom tandvården. Presepsin, upptäckt 2004, är en biomarkör med hög känslighet och specificitet som är mycket viktig för tidig diagnos av bakteriella sjukdomar inom medicin. När dentallitteratur granskas, observeras det att presepsin inte har utvärderats för detektion av bakteriell inflammation i pulpan, och man tror att denna biomarkör skulle kunna användas för tidig upptäckt av pulpainflammation. Med möjligheten att mäta presepsinnivåer med hjälp av patientkit kan därför pulpainflammation utvärderas kvantitativt, vilket underlättar tillhandahållandet av korrekta pulpabehandlingar. Syftet med vår forskning är att undersöka om presepsin, en ny biomarkör som snabbt kan detekteras i bakterier infektioner, kan också användas som en mediator vid upptäckt av pulpainfektioner och för att utvärdera nivåerna av de tillförlitliga markörerna för pulpainflammation, IL-8 och IL-6, genom att jämföra effekten av dessa mediatorer på framgången för behandling med mest framgångsrika material som används vid behandling av pulpotomi, MTA, Neo MTA, Biodentine och zinkoxid eugenol.

Denna studie genomfördes i enlighet med Ataturks universitets medicinska etiska kommittés godkännande (datum: 05.2021/ session nr:04/beslut nr:66) och riktlinjerna i Helsingforsdeklarationen. Även föräldrar till barnpatienter informerades utförligt om procedurerna innan behandlingen och deras skriftliga samtycke erhölls. Inledningsvis inkluderades totalt 75 barn i åldrarna 4-9 år (36 flickor och 39 pojkar) utan systemisk sjukdom och med minst en primär sekundär molar indikerad för pulpotomi i studien och 4 pulpotomimedel (MTA, Biodentine™, NeoMTA™ och ZOE) delades slumpmässigt in i fyra studiegrupper med 30 tänder och pulpotomi applicerades på totalt 120 tänder.

För att slumpmässigt distribuera studiegrupperna, Research Randomizer (version 4.0) datorprogramvara från http://www.randomizer.org/ användes för att generera en lista innan pulpotomi påbörjades och pulpotomimedel användes i enlighet därmed.

Protokoll för behandling och provförvaring:

För bättre synlighet placeras en kofferdam över tanden som kräver pulpotomi efter lokalbedövning. Endodontisk hålighet nåddes genom att först ta bort den kariösa vävnaden, ta av taket på massakammaren med rund diamantborr (nr:18), avlägsna koronalvävnaden med hjälp av en steril rund borr av volframkarbid (nr:14) monterat låghastighets vinkelrät handstycke och rensa den återstående pulpavävnaden med en grävmaskin.

Innan man hanterade pulpablödningen placerades en steril bomullspellet över pulpavävnaden i 30-45 sekunder. för att erhålla pulpablodprover och prover samlades in i heparinbelagda rör (Vacutainer, BD, USA) med 1 mg koksaltlösning och de förvarades vid -20 oC (-4,0 °F) i 6 månader fram till testdagen.

Därefter uppnåddes pulpal hemostas genom att placera 0,5 % NaOCl över kanalöppningarna under 30 sekunder. Primära molarer, där pulpablödning kontrollerades, fördelades slumpmässigt till 4 olika studiegrupper (ProRoot MTA, Biodentine™, NeoMTA™ respektive ZOE) och de behandlades med pulpotomi. Glasjonomercement applicerades över alla pulpotomimediciner som användes i studien och pulpotomiserade tänder återställdes med rostfria stålkronor (SSC).

Upptiningsprocessen och bedömning:

Prover tinades vid rumstemperatur och centrifugerades vid 4000 rpm under 15 min. Sedan togs bomullspellets bort från provrören och nivåerna av presepsin, IL-6 och IL-8 mättes med hjälp av enzymkopplad immunanalys (ELISA) [Humant presepsin ELISA-kit (kat.nr: E3754Hu, BT LAB, Kina), Human IL-6 ELISA Kit (Kat.nr:E0090Hu,BT LAB,Kina), Human IL-8 ELISA Kit (Kat.Nr:E0089Hu, BT LAB,Kina)] test i enlighet med tillverkarens instruktioner. Kit-mätintervallen för presepsin, IL-6 och IL-8 var 5-1000 ng/L, 2-600 ng/L respektive 5-1000 ng/L. Inter-assay CV var <10% för alla biomarkörer.

Metod för klinisk och radiografisk bedömning:

Primära andra molarer utvärderades kliniskt och röntgenologiskt vid den 6:e och 12:e månaden efter behandlingen.

Spontan eller stimulerad smärta, svullnad i vestibulär sulcus, fistel, patologisk rörlighet, känslighet för slag och palpation, regional lymfadenopati intill de pulpotomiserade tänderna bedömdes kliniskt och närvaron av något av dessa symtom ansågs vara misslyckad pulpotomi.

Radiolucens i de periapikala områdena eller furkationsområdena, inre och yttre rotresorptioner, förkalkade rotkanaler, vidgat parodontala ligament utvärderades röntgengrafiskt och närvaron av något av dessa symtom betraktades också som misslyckande.

Dessutom accepterades förekomst av lesioner i periapikala eller furkationsområden i röntgenbilder också som misslyckande och dessa tänder genomgick rotbehandling eller extraktion. Vidare ansågs tänder med inre rotresorption vara radiografiskt misslyckade och de följdes bara upp tills något symptom uppstod.

Statistisk analys Beskrivande statistik (antal, kvot, medelvärde, standardavvikelse, minimi- och maximivariabler) användes för att sammanfatta datauppsättningen i denna studie. Fishers exakta test användes för att analysera sambandet mellan kliniska fynd före behandling och tandpatologier som utvecklades under den 12:e månaden efter behandlingen när patologier blev mer uppenbara. Förhållandet mellan medelnivåerna av pulpalinflammatoriska biomarkörer och dentala patologier som inträffade under den 12:e månaden efter behandlingen analyserades med Mann-Whitney U-test. Mann-Whitney U-test användes också för att jämföra medelnivåerna av inflammatoriska biomarkörer och kliniska fynd. Kruskal Wallis-testet användes för att jämföra skillnaderna mellan medelpoängen för inflammatoriska biomarkörer med de använda pulpotomimedlen.

Tröskelvärden beräknades med Receiver Operating Characteristics (ROC) analys och sedan användes dessa erhållna värden för att bestämma de högsta biomarkörpoängen i pulpotomimaterialgrupperna. All studieanalys utfördes med IBM® SPSS® Statistics 25 vid en signifikansnivå av 0,05.