促炎细胞因子在原发磨牙活髓切断术中的功效

蛀牙是儿童常见的慢性传染病。 对于临床和影像学上无症状的深度腐烂病变的牙齿，通常首选冠状动脉活髓切断术治疗。 这种治疗方法的成功很大程度上取决于牙髓的炎症状态和所使用的材料。 在预测牙髓切断术治疗的临床成功时，还必须评估牙髓炎症的严重程度。 有助于临床区分可逆性牙髓炎和不可逆性牙髓炎的分子方法可以通过准确评估牙髓的炎症状态来提高活体牙髓治疗的成功率。 尽管在许多先前的研究中已经检查了多种介质在晚期牙髓炎症中的增加，但许多涉及牙髓炎症的生物分子的作用尚未确定。 由于炎症性牙髓病的复杂性，少数介质不太可能提供足够的信息来诊断晚期炎症性疾病。 因此，旨在识别新介质的研究在牙科中仍然具有重要意义。 Presepsin于2004年被发现，是一种具有高敏感性和特异性的生物标志物，在医学上对细菌性疾病的早期诊断非常重要。 回顾牙科文献时发现，presepsin 尚未被评估用于检测牙髓中的细菌炎症，并且相信该生物标志物可用于牙髓炎症的早期检测。 因此，通过使用患者试剂盒测量 Presepsin 水平，可以定量评估牙髓炎症，有助于提供准确的牙髓治疗。我们研究的目的是调查 Presepsin（一种可以在细菌中快速检测到的新生物标志物）是否有效感染，也可用作检测牙髓感染的介质，并评估牙髓炎症的可靠标志物 IL-8 和 IL-6 的水平，比较这些介质对治疗成功的影响活髓切断术治疗中使用的最成功的材料是 MTA、Neo MTA、Biodentine 和氧化锌丁香酚。

这项研究是根据阿塔图尔克大学医学院伦理委员会的批准（日期：2021 年 5 月/会议号：04/决定号：66）和赫尔辛基宣言的指导原则进行的。 治疗前还向儿童患者的父母详细介绍了治疗程序并获得了他们的书面同意。 最初，该研究共纳入了 75 名 4-9 岁儿童（36 名女孩和 39 名男孩），他们没有全身性疾病，并且至少有一颗需要进行活髓切断术的乳生第二磨牙，并使用了 4 种活髓切断术药物（MTA、Biodentine™、 NeoMTA™ 和 ZOE）被随机分为四个研究组，每组 30 颗牙齿，并对总共 120 颗牙齿进行活髓切断术。

为了随机分配研究组，使用来自 http://www.randomizer.org/ 的 Research Randomizer（版本 4.0）计算机软件 用于在开始活髓切断术之前生成一个列表，并相应地使用活髓切断术药剂。

处理和样品储存方案：

为了获得更好的可见度，在局部麻醉后将橡皮障放置在需要进行活髓切断术的牙齿上。 首先去除龋齿组织，用金刚石圆钻（编号：18）打开牙髓室的顶部，使用安装有低速弯手机的无菌碳化钨圆钻（编号：14）去除冠状组织，然后使用牙髓腔。用挖掘机清除剩余的牙髓组织。

在处理牙髓出血之前，将无菌棉球放置在牙髓组织上 30-45 秒。为了获得牙髓血样本，将样本收集到含有 1mg 盐水溶液的肝素涂层管（Vacutainer，BD，USA）中，并在 -20 oC（-4.0°F）下保存 6 个月，直到测试当天。

然后通过将 0.5% NaOCl 放置在根管口上 30 秒来实现牙髓止血。 牙髓出血得到控制的乳磨牙被随机分配到 4 个不同的研究组（分别为 ProRoot MTA、Biodentine™、NeoMTA™ 和 ZOE），并接受活髓切断术治疗。 玻璃离子水门汀应用于研究中使用的所有活髓切断术药物，并用不锈钢牙冠（SSC）修复了活髓切断术的牙齿。

解冻过程和评估：

样品在室温下解冻并以 4000 rpm 离心 15 分钟。 然后从试管中取出棉球，使用酶联免疫分析（ELISA）测定前蛋白酶、IL-6和IL-8的水平[人前蛋白酶ELISA试剂盒（货号：E3754Hu，BT LAB，中国），人IL-6 ELISA 试剂盒（货号：E0090Hu，BT LAB，中国）、人 IL-8 ELISA 试剂盒（货号：E0089Hu，BT LAB，中国）]按照制造商的说明进行检测。 前蛋白酶、IL-6 和 IL-8 的试剂盒测量范围分别为 5-1000ng/L、2-600ng/L 和 5-1000ng/L。 所有生物标志物的测定间 CV 均<10%。

临床和放射学评估方法：

在治疗后第 6 个月和第 12 个月对第二乳磨牙进行临床和放射学评估。

对自发性或刺激性疼痛、前庭沟肿胀、瘘管、病理活动性、对敲击和触诊的敏感性、与活髓切断牙相邻的区域淋巴结肿大进行临床评估，并且任何这些症状的存在都被视为活髓切断术失败。

对根尖周或分叉区域的射线可透性、内部和外部牙根吸收、钙化的根管、加宽的牙周韧带进行放射学评估，并且任何这些症状的存在也被视为失败。

此外，X光照片中根尖周或分叉区域存在病变也被视为失败，这些牙齿需要接受根管治疗或拔除。 此外，具有内根吸收的牙齿被视为放射线检查失败，并且仅对其进行随访，直到出现任何症状。

统计分析 描述性统计（计数、比率、平均值、标准差、最小和最大变量）用于总结本研究中的数据集。 采用 Fisher 精确检验来分析治疗前临床结果与治疗后第 12 个月病理变得更加明显时出现的牙齿病理之间的关系。 使用Mann-Whitney U检验分析牙髓炎症生物标志物平均水平与治疗后第12个月发生的牙齿病理之间的关系。 曼-惠特尼 U 检验还用于比较炎症生物标志物的平均水平和临床结果。 Kruskal Wallis 检验用于比较所用活髓切断术药物的炎症生物标志物平均评分之间的差异。

通过接受者操作特征 (ROC) 分析计算阈值，然后使用这些获得的值来确定活髓切断术材料组中的最高生物标志物评分。 所有研究分析均使用 IBM® SPSS® Statistics 25 进行，显着性水平为 0.05。