Efficacia delle citochine proinfiammatorie nella pulpotomia molare primaria

La carie dentaria è una malattia infettiva cronica comunemente riscontrata nei bambini. Il trattamento di pulpotomia coronarica è generalmente preferito per i denti con lesioni carie profonde che sono clinicamente e radiograficamente asintomatiche. Il successo di questo metodo di trattamento dipende fortemente dallo stato infiammatorio della polpa e dai materiali utilizzati. Nel prevedere il successo clinico del trattamento pulpotomico, deve essere valutata anche la gravità dell’infiammazione della polpa. Un approccio molecolare che aiuti nella distinzione clinica tra pulpite reversibile e irreversibile può aumentare il tasso di successo della terapia della polpa vitale valutando accuratamente lo stato di infiammazione della polpa. Sebbene in molti studi precedenti siano stati esaminati gli aumenti di vari mediatori nell'infiammazione avanzata della polpa, il ruolo di molte biomolecole coinvolte nell'infiammazione della polpa non è stato ancora determinato. A causa della natura complessa della malattia infiammatoria della polpa, è improbabile che un piccolo numero di mediatori possa fornire informazioni sufficienti per diagnosticare una malattia infiammatoria avanzata. Pertanto, gli studi volti a identificare nuovi mediatori rimangono rilevanti in odontoiatria. La presepsina, scoperta nel 2004, è un biomarcatore ad alta sensibilità e specificità molto importante nella diagnosi precoce delle malattie batteriche in medicina. Quando si esamina la letteratura dentale, si osserva che la presepsina non è stata valutata per l'individuazione dell'infiammazione batterica nella polpa e si ritiene che questo biomarcatore potrebbe essere utilizzato per l'individuazione precoce dell'infiammazione della polpa. Pertanto, con la capacità di misurare i livelli di presepsina utilizzando kit per pazienti, l'infiammazione della polpa può essere valutata quantitativamente, aiutando nella fornitura di trattamenti accurati della polpa. Lo scopo della nostra ricerca è indagare se la presepsina, un nuovo biomarcatore che può essere rapidamente rilevato nei batteri infezioni, può essere utilizzato anche come mediatore nell’individuazione delle infezioni pulpari e per valutare i livelli dei marcatori affidabili di infiammazione pulpare, IL-8 e IL-6, confrontando l’effetto di questi mediatori sul successo del trattamento con il materiali di maggior successo utilizzati nel trattamento della pulpotomia, MTA, Neo MTA, Biodentina e ossido di zinco eugenolo.

Questo studio è stato condotto in conformità con l'approvazione del Comitato Etico della Facoltà di Medicina dell'Università di Ataturk (Data: 05.2021/ Sessione n.:04/ Decisione n.:66) e le linee guida della Dichiarazione di Helsinki. Anche i genitori dei bambini pazienti sono stati esaurientemente informati sulle procedure prima del trattamento ed è stato ottenuto il loro consenso scritto. Inizialmente, sono stati inclusi nello studio un totale di 75 bambini di età compresa tra 4 e 9 anni (36 ragazze e 39 ragazzi) senza malattia sistemica e che presentavano almeno un secondo molare primario indicato per la pulpotomia e 4 agenti per la pulpotomia (MTA, Biodentine™, NeoMTA™ e ZOE) sono stati divisi in modo casuale in quattro gruppi di studio di 30 denti e la pulpotomia è stata applicata a un totale di 120 denti.

Per distribuire in modo casuale i gruppi di studio, è stato utilizzato il software per computer Research Randomizer (versione 4.0) da http://www.randomizer.org/ è stato utilizzato per generare un elenco prima di iniziare la pulpotomia e gli agenti per pulpotomia sono stati utilizzati di conseguenza.

Protocolli per il trattamento e la conservazione dei campioni:

Per una migliore visibilità viene posizionata una diga di gomma sul dente da sottoporre a pulpotomia dopo anestesia locale. Si accedeva alla cavità endodontica rimuovendo prima il tessuto cariato, scoperchiando la camera pulpare con una fresa rotonda diamantata (n.:18), rimuovendo il tessuto coronale utilizzando una fresa rotonda sterile in carburo di tungsteno (n.:14) montata su un manipolo contrangolo a bassa velocità e rimozione del tessuto pulpare rimanente con un escavatore.

Prima di gestire l'emorragia pulpare, un pellet di cotone sterile è stato posizionato sul tessuto pulpare per 30-45 secondi. per ottenere campioni di sangue pulpare, i campioni sono stati raccolti in provette rivestite di eparina (Vacutainer, BD,USA) con 1 mg di soluzione salina e sono stati conservati a -20 oC (-4,0°F) per 6 mesi fino al giorno del test.

Successivamente è stata ottenuta l'emostasi pulpare posizionando NaOCl allo 0,5% sugli orifizi del canale per 30 secondi. I molari primari, in cui l'emorragia pulpare era controllata, sono stati assegnati in modo casuale a 4 diversi gruppi di studio (rispettivamente ProRoot MTA, Biodentine™, NeoMTA™ e ZOE) e sono stati trattati con pulpotomia. Il cemento vetroionomerico è stato applicato su tutti i farmaci per pulpotomia utilizzati nello studio e i denti pulpotomizzati sono stati restaurati con corone in acciaio inossidabile (SSC).

Processo di scongelamento e valutazione:

I campioni sono stati scongelati a temperatura ambiente e centrifugati a 4000 giri/min per 15 minuti. Quindi i pellet di cotone sono stati rimossi dalle provette e i livelli di presepsina, IL-6 e IL-8 sono stati misurati utilizzando un test immunoenzimatico (ELISA) [Kit ELISA della presepsina umana (Cat.No:E3754Hu, BT LAB, Cina),Human Kit ELISA IL-6 (Cat.No:E0090Hu,BT LAB,Cina), Kit ELISA IL-8 umano (Cat.No:E0089Hu, BT LAB,Cina)] in conformità con le istruzioni del produttore. Gli intervalli di misurazione del kit per presepsina, IL-6 e IL-8 erano rispettivamente 5-1000 ng/L, 2-600 ng/L e 5-1000 ng/L. Il CV inter-test era <10% per tutti i biomarcatori.

Metodo di valutazione clinica e radiografica:

I secondi molari primari sono stati valutati clinicamente e radiograficamente al 6° e 12° mese post-trattamento.

Dolore spontaneo o stimolato, gonfiore nel solco vestibolare, fistola, mobilità patologica, sensibilità alla percussione e alla palpazione, linfoadenopatia regionale adiacente ai denti pulpotomizzati sono stati valutati clinicamente e la presenza di uno qualsiasi di questi sintomi è stata considerata come pulpotomia fallita.

La radiolucenza nelle aree periapicali o delle forcazioni, i riassorbimenti radicolari interni ed esterni, i canali radicolari calcificati, il legamento parodontale allargato sono stati valutati radiograficamente e anche la presenza di uno qualsiasi di questi sintomi è stata considerata come fallimento.

Inoltre, anche la presenza di lesioni nelle aree periapicali o nelle forcazioni nelle radiografie è stata accettata come fallimento e questi denti sono stati sottoposti a trattamento canalare o estrazione. Inoltre, i denti con riassorbimento della radice interna sono stati considerati radiograficamente falliti e sono stati semplicemente seguiti fino alla comparsa di qualsiasi sintomo.

Analisi statistica Le statistiche descrittive (conteggio, rapporto, media, deviazione standard, variabili minime e massime) sono state utilizzate per riassumere l'insieme di dati nel presente studio. Il test esatto di Fisher è stato utilizzato per analizzare la relazione tra i risultati clinici pre-trattamento e le patologie dentali sviluppatesi al 12° mese post-trattamento, quando le patologie diventavano più evidenti. La relazione tra i livelli medi dei biomarcatori infiammatori della polpa e le patologie dentali verificatesi al 12° mese post-trattamento è stata analizzata utilizzando il test U di Mann-Whitney. Il test U di Mann-Whitney è stato utilizzato anche per confrontare i livelli medi dei biomarcatori infiammatori e i risultati clinici. Il test Kruskal Wallis è stato utilizzato per confrontare le differenze tra i punteggi medi dei biomarcatori infiammatori degli agenti pulpotomici utilizzati.

I valori di soglia sono stati calcolati con l'analisi delle caratteristiche operative del ricevitore (ROC) e quindi questi valori ottenuti sono stati utilizzati per determinare i punteggi più alti dei biomarcatori nei gruppi di materiali della pulpotomia. Tutte le analisi dello studio sono state eseguite con IBM® SPSS® Statistics 25 a un livello di significatività di 0,05.