Eficácia das citocinas pró-inflamatórias na pulpotomia do molar primário

A cárie dentária é uma doença infecciosa crônica comumente encontrada em crianças. O tratamento com pulpotomia coronária é geralmente preferido para dentes com lesões de cárie profunda que são clínica e radiograficamente assintomáticas. O sucesso deste método de tratamento é altamente dependente do estado inflamatório da polpa e dos materiais utilizados. Ao prever o sucesso clínico do tratamento da pulpotomia, a gravidade da inflamação pulpar também deve ser avaliada. Uma abordagem molecular que auxilia na distinção clínica entre pulpite reversível e irreversível pode aumentar a taxa de sucesso da terapia pulpar vital, avaliando com precisão o estado de inflamação da polpa. Embora o aumento de vários mediadores na inflamação pulpar avançada tenha sido examinado em muitos estudos anteriores, o papel de muitas biomoléculas envolvidas na inflamação pulpar ainda não foi determinado. Devido à natureza complexa da doença inflamatória pulpar, é improvável que um pequeno número de mediadores forneça informações suficientes para diagnosticar doença inflamatória avançada. Portanto, estudos que visam identificar novos mediadores continuam relevantes na odontologia. A presepsina, descoberta em 2004, é um biomarcador de alta sensibilidade e especificidade de grande importância no diagnóstico precoce de doenças bacterianas na medicina. Quando a literatura odontológica é revisada, observa-se que a presepsina não foi avaliada para detecção de inflamação bacteriana na polpa, e acredita-se que este biomarcador possa ser utilizado para detecção precoce de inflamação pulpar. Assim, com a capacidade de medir os níveis de presepsina usando kits de pacientes, a inflamação pulpar pode ser avaliada quantitativamente, auxiliando no fornecimento de tratamentos pulpares precisos. O objetivo da nossa pesquisa é investigar se a presepsina, um novo biomarcador que pode ser rapidamente detectado em bactérias infecções, também pode ser utilizado como mediador na detecção de infecções pulpares, e para avaliar os níveis dos marcadores confiáveis ​​de inflamação pulpar, IL-8 e IL-6, comparando o efeito desses mediadores no sucesso do tratamento com o materiais de maior sucesso utilizados no tratamento de pulpotomia, MTA, Neo MTA, Biodentine e óxido de zinco eugenol.

Este estudo foi conduzido de acordo com a aprovação do Comitê de Ética da Faculdade de Medicina da Universidade Ataturk (Data: 05.2021/Sessão nº:04/Decisão nº:66) e diretrizes da Declaração de Helsinque. Além disso, os pais das crianças pacientes foram amplamente informados sobre os procedimentos antes do tratamento e seus consentimentos por escrito foram obtidos. Inicialmente, um total de 75 crianças de 4 a 9 anos (36 meninas e 39 meninos) sem doença sistêmica e apresentando pelo menos um segundo molar decíduo indicado para pulpotomia foram incluídas no estudo e 4 agentes de pulpotomia (MTA, Biodentine™, NeoMTA™ e ZOE) foram divididos aleatoriamente em quatro grupos de estudo de 30 dentes e a pulpotomia foi aplicada em um total de 120 dentes.

Para distribuir aleatoriamente os grupos de estudo, foi utilizado o software Research Randomizer (versão 4.0) de http://www.randomizer.org/ foi usado para gerar uma lista antes de iniciar a pulpotomia e os agentes de pulpotomia foram usados ​​adequadamente.

Protocolos para Tratamento e Armazenamento de Amostras:

Para uma melhor visibilidade, um dique de borracha é colocado sobre o dente que necessita de pulpotomia após anestesia local. A cavidade endodôntica foi acessada removendo primeiro o tecido cariado, destapando a câmara pulpar com broca redonda diamantada (nº:18), removendo o tecido coronal usando uma broca redonda estéril de carboneto de tungstênio (nº:14) montada em peça de mão contra-angular de baixa velocidade e limpando o tecido pulpar remanescente com uma escavadeira.

Antes de tratar a hemorragia pulpar, uma bolinha de algodão estéril foi colocada sobre o tecido pulpar por 30-45 segundos. para a obtenção de amostras de sangue pulpar, os espécimes foram coletados em tubos revestidos de heparina (Vacutainer, BD, EUA) com 1 mg de solução salina e armazenados a -20 oC (-4,0°F) por 6 meses até o dia do teste.

Em seguida, a hemostasia pulpar foi obtida colocando NaOCl a 0,5% sobre os orifícios do canal por 30 segundos. Os molares decíduos, nos quais a hemorragia pulpar foi controlada, foram distribuídos aleatoriamente em 4 grupos de estudo diferentes (ProRoot MTA, Biodentine™, NeoMTA™ e ZOE respectivamente) e foram tratados com pulpotomia. Cimento de ionômero de vidro foi aplicado sobre todos os medicamentos de pulpotomia utilizados no estudo e os dentes pulpotomizados foram restaurados com coroas de aço inoxidável (SSCs).

Processo de descongelamento e avaliação:

As amostras foram descongeladas à temperatura ambiente e centrifugadas a 4000 rpm durante 15 min. Em seguida, os pellets de algodão foram removidos dos tubos de ensaio e os níveis de presepsina, IL-6 e IL-8 foram medidos usando imunoensaio enzimático (ELISA) [kit ELISA de presepsina humana (Cat.No:E3754Hu, BT LAB, China),Human presepsin ELISA kit (Cat.No:E3754Hu, BT LAB,China),Human Kit IL-6 ELISA (Cat.No:E0090Hu,BT LAB,China), Human IL-8 ELISA Kit (Cat.No:E0089Hu, BT LAB,China)] teste de acordo com as instruções do fabricante. Os intervalos de medição do kit para presepsina, IL-6 e IL-8 foram 5-1000 ng/L, 2-600 ng/L e 5-1000 ng/L, respetivamente. O CV interensaio foi <10% para todos os biomarcadores.

Método de avaliação clínica e radiográfica:

Os segundos molares decíduos foram avaliados clínica e radiograficamente no 6º e 12º meses pós-tratamento.

Dor espontânea ou estimulada, inchaço no sulco vestibular, fístula, mobilidade patológica, sensibilidade à percussão e palpação, linfadenopatia regional adjacente aos dentes pulpotomizados foram avaliados clinicamente e a presença de qualquer um desses sintomas foi considerada como pulpotomia malsucedida.

Radioluscência nas áreas periapicais ou de furca, reabsorções radiculares internas e externas, canais radiculares calcificados, ligamento periodontal alargado foram avaliados radiograficamente e a presença de qualquer um desses sintomas também foi considerada como falha.

Além disso, a presença de lesões em áreas periapicais ou de furca nas radiografias também foi aceita como falha e esses dentes foram submetidos a tratamento endodôntico ou extração. Além disso, os dentes com reabsorção radicular interna foram considerados radiograficamente falhados e foram apenas acompanhados até que algum sintoma ocorresse.

Análise Estatística Estatísticas descritivas (contagem, razão, média, desvio padrão, variáveis ​​mínimas e máximas) foram utilizadas para resumir o conjunto de dados do presente estudo. O teste exato de Fisher foi empregado para analisar a relação entre os achados clínicos pré-tratamento e as patologias dentárias desenvolvidas no 12º mês pós-tratamento, quando as patologias se tornaram mais aparentes. A relação entre os níveis médios de biomarcadores inflamatórios pulpares e patologias dentárias ocorridas no 12º mês pós-tratamento foi analisada pelo teste U de Mann-Whitney. O teste U de Mann-Whitney também foi utilizado para comparar os níveis médios de biomarcadores inflamatórios e os achados clínicos. O teste de Kruskal Wallis foi utilizado para comparar as diferenças entre os escores médios dos biomarcadores inflamatórios pelos agentes de pulpotomia utilizados.

Os valores limite foram calculados com a análise das Características Operacionais do Receptor (ROC) e, em seguida, esses valores obtidos foram usados ​​para determinar as pontuações mais altas dos biomarcadores nos grupos de materiais para pulpotomia. Todas as análises do estudo foram realizadas com o IBM® SPSS® Statistics 25 com nível de significância de 0,05.